鼻疽菌素点眼变态反应实验操作规程

维护日期：2007年07月31日 浏览 1294 次

1.原理 机体受到鼻疽杆菌刺激时，导致T淋巴细胞转变为淋巴母细胞，并进而增殖分化为致敏淋巴细胞，使机体致敏；以后如再次接触相同的抗原（鼻疽菌素），致敏淋巴细胞即释放出各种淋巴因子，一方面使机体表现特异性的细胞免疫，而另一方面则发生迟发型变态反应，出现以单核细胞浸润，以及由于巨噬细胞释出溶酶体酶（水解酶），从而导致肉眼看到的发炎、肿胀、脓性眼眦等变化。本试验过程中，细胞介导应答起重要作用。当马匹感染鼻疽杆菌后约2-3周，即对鼻疽菌素开始呈现阳性反应。以后随着病程的发展，反应性逐渐增强。慢性型病马的反应性可保持数年之久（在诊断上这是一种必不可少的手段）。

2.器械和试剂 鼻疽菌素，脱脂棉，纱布，硼酸，酒精，碘酊等；点眼器，唇（耳）挟子，镊子。 3.操作步骤

3.1点眼前必须两眼对照详细检查眼结膜，眼结膜正常者方可进行点眼，点眼后检查颔下淋巴结，看马匹的健康状况。

3.2 规定间隔5-6日作两回点眼算作一次检疫，每回点眼用鼻疽菌素原液3-4滴（0.2-0.3ml），两回点眼必须于同一眼中，一般应点于左眼，左眼生病可点于右眼，须在记录上注明。（因为第一次通常只能检出60%-70%的病马，而第二次阳性检出率可提高到95%，第三次可提高至98%）。 3.3点眼时间应在早晨进行，以便三次判定时间都在白天进行。

3.4点眼前助手固定马匹，术者左手用食指插入上眼睑窝内，使瞬膜露出，用母指拨开下眼睑，使瞬膜与下眼睑构成凹兜，右手持吸有鼻疽菌素点眼器，保持水平方向，手掌下缘支于额骨之眶部，点眼器尖端距凹兜约一厘米，拇指按胶皮乳头滴入鼻疽菌素3-4滴。

3.5点眼后注意系栓，防止风沙侵入，阳光直射已被点医药费的眼睛及动物自行磨擦眼部。 3.6判定反应时间：应在点后3、6、9小时，共检查三次并尽可能做到第24小时再检查一次。判定时先由马头正面两眼对照观察，在第6小时要翻眼检查，其余观察要根据情况看是否翻眼检查。细查结膜状态，有无眼眦，并按判定标准做好记录。

3.7每次检查点眼反应时均应记录判定结果。最后判定应以连续两次点眼之中最大的一次为标准。 3.8判定标准

3.8.1阳性反应：结膜发炎，肿胀明显，并分泌脓性眼眦。其记录符号为（+）。 3.8.2疑似反应：结膜潮红，轻微肿胀，有粘性分泌物。其记录符号为（±）。 3.8.3阴性反应：无反应或结膜轻微充血及流泪者。记录符号为（-）。 3.9结果记录与统计 3.9.1检疫记录

编号、畜别、性别、年龄、特征、第一次点眼反应（临床检查，3、6、9、24小时判定），第二次点眼反应（临床检查，3、6、9、24小时判定），综合判定，兽医签字。 3.9.2结果统计

日期、畜别、阳性头数、阳性率、备注。

此外，鼻疽菌素点眼后可引起体温升高达38.5℃以上，精神不振，食欲减退、寒颤，有的颌下淋巴结肿大，眼分泌物经鼻泪管由鼻孔流出，不必惊慌，经过24小时即可消失。