2010版—实验室控制系统GMP实施指南

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1 前言 .............................................................................................................................................. 1 2 目的 .............................................................................................................................................. 2 3 范围 .............................................................................................................................................. 3 4 指南内容结构 .............................................................................................................................. 4 5.质量控制实验室总体描述 ........................................................................................................... 5

5.1 职责 ................................................................................................................................... 5 5.2 布局 ................................................................................................................................... 5

5.2.1原则 ......................................................................................................................... 5 5.2.2 要求 ........................................................................................................................ 5 5.3 人员 ................................................................................................................................... 6

5.3.1 组织架构 ................................................................................................................ 6 5.3.2 资质要求 ................................................................................................................ 6 5.3.3 培训 ........................................................................................................................ 6

5.4 文件系统 ................................................................................................................................... 7

5.4.1 分类 ........................................................................................................................ 7 5.4.2 要求 ........................................................................................................................ 7

6 取样 ............................................................................................................................................ 10

6.1 定义 ......................................................................................................................... 11 6.2 应用范围 ................................................................................................................. 12 6.3 要求 ......................................................................................................................... 12

6.3.1人员 ....................................................................................................................... 12 6.3.2取样器具 ............................................................................................................... 12 6.3.3样品容器 ............................................................................................................... 13 6.3.4取样间 ................................................................................................................... 13 6.4 流程实施 ................................................................................................................. 13

6.4.1取样方案 ............................................................................................................... 13 6.4.2取样 ....................................................................................................................... 14 6.4.3标识 ....................................................................................................................... 14 6.4.4取样记录 ................................................................................................................ 14 6.4.5取样的异常处理 ................................................................................................... 14 6.4.6留样 ....................................................................................................................... 15

7 试剂及试液的管理 .................................................................................................................... 17

7.1 定义和应用范围 .............................................................................................................. 17 7.2 要求 ................................................................................................................................. 17

7.2.1 采购接收和标识 ................................................................................................... 17 7.2.2 储存和使用 ........................................................................................................... 18 7.2.3 试剂使用效期的管理 ........................................................................................... 18 7.2.4 报废 ...................................................................................................................... 18 7.2.5 文件管理 .............................................................................................................. 18

8 标准品/对照品............................................................................................................................ 19

8.1 定义 ................................................................................................................................. 19 8.2 分类 ................................................................................................................................. 19 8.3 应用范围 ......................................................................................................................... 20 8.4 要求 ................................................................................................................................. 20

8.4.1 接收 ...................................................................................................................... 20 8.4.2 标识 ...................................................................................................................... 20 8.4.3 标准溶液的稳定性研究 ...................................................................................... 20

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8.4.4 标准品、对照品的使用、处置和贮存 ............................................................... 21 8.4.5 文件管理 .............................................................................................................. 21

9 实验室分析仪器的确认 ............................................................................................................ 22

9.1 应用范围 ......................................................................................................................... 23 9.2 确认实施 ......................................................................................................................... 24

9.2.1 验证总计划 ........................................................................................................... 24 9.2.2 确认方案 .............................................................................................................. 24 9.2.3 确认实施 .............................................................................................................. 25 9.2.4 确认报告 .............................................................................................................. 27 9.2.5 系统适用性试验 ................................................................................................... 27 9.2.6 实验室仪器控制系统和数据处理系统的确认 ................................................... 27 9.2.7 再确认 .................................................................................................................. 28

10 实验室分析仪器的校准与维护 .............................................................................................. 32

10.1 定义................................................................................................................................ 33 10.2 应用范围 ....................................................................................................................... 33 10.3 要求................................................................................................................................ 33

10.3.1 人员 .................................................................................................................... 33 10.3.2 分类 .................................................................................................................... 34 10.3.3 实施指导 ............................................................................................................ 34 10.3.4 文件 .................................................................................................................... 36

11 分析方法的验证和确认 ........................................................................................................... 45

11.1 分析方法 ....................................................................................................................... 46 11.2 方法验证 ....................................................................................................................... 46 11.3 方法确认 ....................................................................................................................... 47 11.4 适用范围 ....................................................................................................................... 47 11.5 方法验证的一般原则 ................................................................................................... 47 11.6 需要验证的检验项目 ................................................................................................... 47 11.7 方法验证内容 ............................................................................................................... 49 11.7.1 准确度......................................................................................................................... 49

11.7.2 精密度 ................................................................................................................. 50 11.7.3 专属性 ................................................................................................................ 52 11.7.4 检测限（LOD） .................................................................................................. 53 11.7.5 定量限（LOQ） ................................................................................................. 53 11.7.6 线性 .................................................................................................................... 54 11.7.7 范围 .................................................................................................................... 55 11.7.8 耐用性 ................................................................................................................ 55 11.8 方法确认 ....................................................................................................................... 59 11.9 方法再验证 ................................................................................................................... 59 11.10 文件管理 ..................................................................................................................... 60 12 稳定性实验 .............................................................................................................................. 64

12.1 定义................................................................................................................................ 66 12.2 应用范围 ....................................................................................................................... 66 12.3 原则................................................................................................................................ 66 12.4 稳定性分类 ................................................................................................................... 66 12.5 技术要点 ....................................................................................................................... 67

12.5.1 基本要求 ............................................................................................................ 67 12.5.2 样品储存 ............................................................................................................ 67 12.5.3 样品提取 ............................................................................................................ 73 12.5.4 分析 .................................................................................................................... 73 12.5.5 简化方案设计 ..................................................................................................... 78 12.5.6 上市产品的稳定性试验 ..................................................................................... 79

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12.5.7 评估 .................................................................................................................... 80 12.5.8 数据汇总 ............................................................................................................ 82 12.5.9 统计分析的程序 ................................................................................................ 82 12.6 文件................................................................................................................................ 83

12.6.1 标准操作规程 ..................................................................................................... 83 12.6.2 稳定性实验草案 ................................................................................................ 83 12.6.3 计划 .................................................................................................................... 83 12.6.4 记录 .................................................................................................................... 83 12.6.5 报告 .................................................................................................................... 84 12.6.6 年度趋势分析与评估 ........................................................................................ 84 12.7 稳定性超标或超趋势调查处理 ................................................................................... 84

12.7.1 原则 .................................................................................................................... 84 12.7.2 程序 .................................................................................................................... 84 超出标准及超趋势的实验结果调查 ....................................................................................... 87 13.1 定义................................................................................................................................ 87 13.2 重要性 ........................................................................................................................... 87 13.3 应用范围 ....................................................................................................................... 87 13.4 实施................................................................................................................................ 87

13.4.1 一般原则 ............................................................................................................ 87 13.4.2 流程 .................................................................................................................... 88 13.4.3 文件 .................................................................................................................... 93 13.7.2 职责的确定： ..................................................................................................... 93 原始数据的管理 ...................................................................................................................... 98 14.1 实验室原始数据的范围 ................................................................................................ 99

14.1.1 实验室记录要求 .............................................................................................. 100 14.1.2 数据完整性 ...................................................................................................... 100 14.1.3 数据记录形式 ................................................................................................... 100 14.2 实验室记录的设计 ...................................................................................................... 101 14.3 实验室记录的填写和复核 ......................................................................................... 101

14.3.1 实验室记录的填写 ........................................................................................... 102 14.3.2 记录的复核 ...................................................................................................... 102 14.3.3 记录更正要求 ................................................................................................... 103 14.4 记录的管理 ................................................................................................................. 103 物料及产品的检验 ................................................................................................................. 105 15.1 质量标准的管理 ......................................................................................................... 108

15.1.1 质量标准的设计与制定 ................................................................................... 109 15.1.2 质量标准的审核与批准 ................................................................................... 110 15.1.3 质量标准的分发、撤销、复制、销毁 ........................................................... 110 15.2 检验.............................................................................................................................. 111

15.2.1 检验样品： ...................................................................................................... 111 15.3 检验报告书的管理 ...................................................................................................... 111 15.4 委托检验 ..................................................................................................................... 112

15.4.1 原则 .................................................................................................................. 115 15.4.2 应用范围 .......................................................................................................... 115 16.4.3 职责 .................................................................................................................. 116 16.4.4 受托方的选定 ................................................................................................... 116 15.4.5 合同签订 .......................................................................................................... 117 15.4.6 合同实施 .......................................................................................................... 117 15.4.7 结果评估 .......................................................................................................... 117 15.4.8 实验后样品处理 .............................................................................................. 118 微生物检验 ............................................................................................................................ 119

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16.1 应用范围 ..................................................................................................................... 120 16.2 原则.............................................................................................................................. 120 16.3 人员资质及培训要求 ................................................................................................. 120 16.4 设施.............................................................................................................................. 120

16.4.1 无菌及微生物限度检验等实验区域 ............................................................... 121 16.4.2 菌种处理、微生物鉴别和阳性对照室 ........................................................... 121 16.4.3 抗生素微生物检定室 ...................................................................................... 121 16.4.4 培养室及其他功能间 ...................................................................................... 121 16.5 设备.............................................................................................................................. 122

16.5.1 无菌隔离器（如使用） ................................................................................... 122 16.5.2 实验室用层流台 .............................................................................................. 123 16.5.3 培养箱 .............................................................................................................. 123 16.5.4 蒸汽灭菌柜 ...................................................................................................... 123 16.5.5 空调高效过滤器 .............................................................................................. 123 16.6 灭菌消毒方式 .............................................................................................................. 123 16.7 菌种的管理 ................................................................................................................. 124 16.8 培养基 ......................................................................................................................... 125

16.8.1 培养基的制备 ................................................................................................... 125 16.8.2 培养基的贮藏 ................................................................................................... 126 16.8.3 培养基的质量控制实验 ................................................................................... 126 16.9 实验分类 ..................................................................................................................... 127

16.9.1 总菌落数检查 ................................................................................................... 127 16.9.2 控制菌检查 ...................................................................................................... 132 16.9.3 非无菌产品的实验频率 ................................................................................... 134 16.9.4 无菌检查法 ...................................................................................................... 135 16.9.5 内毒素检查 ...................................................................................................... 138

参考文献 ....................................................................................................................................... 141 术语表 .......................................................................................................................................... 142 关键词索引 .................................................................................................................................. 144

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实验室控制系统 GMP实施指南

表格索引

表 格 索 引

表 1-1 指南逻辑关系图 ............................................................................................................... 1 表 9-1 自动取样溶出仪确认测试项目示例 ............................................................................. 29 表 10-1 仪器使用日志示例 ......................................................................................................... 36 表 10-2 校准记录示例 ............................................................................................................... 37 表 10-3 外部校准评估报告示例 ............................................................................................... 38 表 10-4 分析天平校准要求示例 ............................................................................................... 40 表 10-5 HPLC 校准项目及周期示例 ....................................................................................... 42 表 10-6 HPLC年度预防性维护示例 ........................................................................................ 43 表 11-1 检验项目和验证内容 ................................................................................................... 48 表 11-2 方法验证对比表 ........................................................................................................... 48 表 11-3 准确度方法验证示例 ..................................................................................................... 49 表 11-4 精密度验证方法 ........................................................................................................... 51 表 11-5 中间精密度的设计方案 ............................................................................................... 51 表11-5 专属性方法验证 ............................................................................................................ 52 表 11-6 杂质测定检测限验证方法 ........................................................................................... 53 表 11-7 杂质定量测定验证方法 ............................................................................................... 53 表 11-8 线性验证和准确度验证需涵盖的最低浓度范围 ......................................................... 54 表 11-9 方法耐用性影响因素示例 ........................................................................................... 55 表 11-10 HPLC含量方法耐用性考虑因素及变化范围示例 .................................................. 56 表11-11 分析方法验证接受标准示例......................................................................................... 56 表 12-1 四个气候带的分类表 ................................................................................................... 67 表 12-2 标准贮藏条件表 ............................................................................................................. 68 表 12-3 温度选择性制剂的标准贮藏条件 ............................................................................... 69 表 12-4 原料药包装分类（水蒸气渗透性） ............................................................................ 69 表 12-5 原料药及制剂影响因素试验条件 ................................................................................. 71 表 12-6 半渗透包装标准贮藏条件 ........................................................................................... 72 表 12-7 密闭包装贮藏条件 ....................................................................................................... 72 表 12-8 拟冷藏药物的贮藏条件 ............................................................................................... 72 表 12-9 拟冷冻贮藏药物标准贮藏条件 ................................................................................... 72 表 12-10 稳定性试验点时间表 ................................................................................................. 74 表 12-11 原料药及制剂稳定性重点考察项目参考表 ............................................................... 74 表 12-12 片剂中间产品放置时间研究示例 ............................................................................. 77 表 12-13 转运运输条件示例 ..................................................................................................... 78 表 12-14 括号法方案设计 ......................................................................................................... 79 表 12-15 矩阵法方案设计 ......................................................................................................... 79 表 16-1 非无菌制剂产品类型与检验频次示例 ..................................................................... 34 表 16-2 原料检验频次及分类标准示例 ................................................................................. 135

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表格索引 实验室控制系统 GMP实施指南

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实验室控制系统 GMP实施指南

1 前言

1 前言

作为质量管理体系的一部分，质量控制实验室管理是确保所生产的药品适用于预定的用 途，符合药品标准和规定的要求的重要因素之一。

为了帮助制药企业中的实验室更好地满足GMP的要求，本指南主要参照国内外相关法

规和标准及指南对于实验室管理的阐述和要求，描述一个全面的实验室管理体系，以起到一 定的指导作用。

本指南的内容不具有法律约束性，超出现行 GMP规定的内容是建议性和参考性的，而

非强制性要求，可以有选择地使用。

企业在运用本指南过程中，涉及到剂型特点或相关公用系统的内容时，还应参考其它 配套指南（见下表），并结合本企业的实际情况和现行法规要求开展相关工作。

表 1-1 指南逻辑关系图

系统 制剂 口服固体 无菌制剂 原料药 其它

质量管理 体系

设施设备 水系统 空调系统 物料 质量控制 其它

对于系统指南和制剂指南共有的内容，系统指南强调系统的通用程序 的建立、实施和管理过程；制剂指南则根据剂型特点给出针对性的描 述。

水平有限，不足之处，恳请指正。

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2 目的

实验室控制系统 GMP实施指南

2 目的

建立、实施并维护一个有效的实验室管理体系能够有效支持企业整体质量管理体系的 有效实施，持续稳定地生产出符合满足顾客、法律法规等方面所提出的质量要求如有效性、 可靠性、安全性的产品，从而实现公众和个人的共同目标，即：为患者提供高质量的药品， 具体表现在以下方面：

 

及时放行合格的生产物料用于药品的制造，为生产出合格的药品提供必备的前提条件。 有效的药品生产过程中间控制保证了各个阶段生产产物的正确性和质量符合性，准确的

终产品的检验数据为产品最终放行提供了重要的质量依据。



有效的稳定性数据和趋势分析指导企业确定药品正确的有效期、包装材料、运输/贮存

条件等，并确保在市产品处于有效的质量保证状态。



通过实验室各个方面的有效管理，使质量系统始终处于受控状态，例，通过试验数据证

明对工艺运行和产品质量的有效监控，为工艺能力及其稳定性提供保障。

本指南所描述的实验室管理是为了帮助企业的实验室更好地符合 GMP 的要求，推动 整个企业有效地实施质量管理体系，达到长远发展的目的。企业可以根据自身的规模、工艺 复杂程度和有限的资源等特定的条件，在符合法规的要求下，量身制定相应的实验室管理体 系。

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实验室控制系统 GMP实施指南

3 范围

3 范围

质量是指为符合预定用途所具有的一系列固有特性的程度。依此，药品质量是指，为了 满足药品的安全性和有效性的要求，产品所具有的成分、含量、纯度等物理、化学或生物学 等特性的程度。产品质量是在科学合理的设计的基础上，通过对所需的物料和生产过程进行 控制管理实现的。因此，药品质量管理体系应包括影响药品质量的所有因素，以及确保药品 质量符合预定用途所需的有组织、有计划的全部活动。其关键因素之一-质量控制实验室管 理亦应适用于产品生命周期过程中，产品质量形成全过程的各个环节：

包括：产品研发、产品/技术转移、商业生产、产品运输、在市考察甚至产品退市等， 各阶段所设计的技术活动包括：



产品研发阶段：主要在原料药及制剂产品开发过程中，针对处方的选择，分析方法的确

定以及稳定性研究过程。



产品/技术转移：着重于产品转移过程中的工艺过程监控，方法转移等。一般涵盖

 新产品由开发转移至规模生产  不同的生产厂或实验室之间的转移



商业生产：重点指对原辅料、包装材料、中间产品、待包装产品和成品进行取样、检查、

检验及产品的稳定性考察，以及必要时的环境监测。

  

产品贮存/运输过程：根据产品的特性及稳定性研究数据确定不同的条件。 产品在市期：持续的稳定性研究监控在市产品的质量。 产品的退市期：包含产品留样的考察及相关文件/样品的处理

本指南所描述的质量控制管理应着重于药品生产企业的中间控制和质量控制实验室，包 括原料药和制剂生产；化学药和生物制剂生产等。

3

4 指南内容结构

实验室控制系统 GMP实施指南

4 指南内容结构

质量控制包括组织机构、文件系统和取样、检验、产品批准放行等。其工作内容包括专 业技术和管理技术两个方面，围绕产品质量形成全过程的各个环节，对影响工作质量的人、 机、料、法、环五大因素进行控制，并对质量活动的成果进行分阶段验证，以便及时发现问 题，采取相应措施，防止不合格重复发生，尽可能地减少损失。因此，质量控制应贯彻预防 为主与检验把关相结合的原则，必须对干什么? 为何干 ?怎么干?谁来干?何时干等?做出规

定，并对实际质量活动进行监控。而且，因为产品质量要求是随时间的进展而在不断变化， 为了满足新的质量要求，就要注意质量控制的动态性，要随工艺、技术、材料、设备的不断 改进，研究新的控制方法。

基于质量控制的上述工作内容，本指南就以下方面加以陈述和建议：

           

质量控制实验室总体描述 取样

试剂及试液的管理 标准品及对照品的管理 实验室分析仪器的确认 实验室分析仪器的校准与维护 分析方法的验证及确认 稳定性实验研究

超出质量标准或超出趋势的实验室调查 原始数据的管理 物料及产品的检验 微生物检验

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实验室控制系统 GMP实施指南

5.质量控制实验室总体描述

5.质量控制实验室总体描述

5.1 职责

【背景介绍】

质量控制涵盖药品生产、放行、市场质量反馈的全过程，负责原辅料、包材、工艺用水、 中间体及成品的质量标准和分析方法的建立、取样和检验，及产品的稳定性考察和市场不良 反馈样品的复核工作。质量控制的职责也可涵盖产品过程控制。

质量控制实验室的具体工作包括但不限于以下内容：

 

确保实验室安全运行，并符合 GMP 管理规范。

根据药典、申报标准，各种法规及企业内部要求制定原辅料、包材、工艺用水、产品过

程控制、中间体及成品的质量标准及分析方法。

 

组织取样、检验、记录、报告等工作。

对于检验过程中发现的异常现象应及时向质量保证部及相关生产负责人通报，并调查是

否为实验室原因。如确认不是或无可查明的实验室原因，应协助查找其他原因。

     

保留足够的起始物料和产品的样品（即留样），以便以后必要时对产品进行跟踪检测。 根据需要制定稳定性试验方案，并确保其具体实施。 确保用有效的体系来确认、维护、维修和校验实验室仪器设备。 参加与质量有关的客户审计。 参加与质量有关的投诉调查。

根据需要参与和支持生产工艺验证，清洁验证和环境监测工作。

5.2 布局

5.2.1 原则

实验室的设计应确保其适用于预定的用途，并能够避免混淆和交叉污染，应有足够的区 域用于样品处置、留样和稳定性考察样品存放以及记录的保存。

5.2.2 要求



质量控制实验室通常应与生产区分开，生物检定、微生物和放射性同位素的实验室还应

彼此分开，无菌检查实验室、微生物限度检查实验室、抗生素效价测定实验室、阳性菌 实验室也应彼此分开。



实验室的设计必须与生产要求相适应。必须有足够的地方避免混淆和交叉污染。同时还

应有足够的区域用于样品处置、留样和稳定性考察样品的存放及记录保存。



必要时应设置专门的仪器室，使灵敏度高的仪器免受静电、震动、电磁波、潮湿等因素

的干扰。

 

处理生物或放射性样品等特殊样品的实验室应符合特殊要求。

用于微生物检验的实验室应有符合无菌检查法和微生物限度检查法要求的、用于具有开

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5.质量控制实验室总体描述

实验室控制系统 GMP实施指南

展无菌检查、微生物限度检查等检测活动的、独立设置的洁净区或隔离系统，并为上述 检验配备相应的阳性菌实验室、培养室、实验结果观察区、培养基及实验用具准备区、 标准菌种储存区、污物处理区等。



实验室应设有专门的区域或房间用于清洗玻璃器皿，取样器具，以及其它用于样品测试 的物件。

5.3 人员

5.3.1 组织架构

质量控制部负责人必须由具有相应的资格和经验的人员担任，可以根据生产规模设立一 个或几个化验室，例如微生物实验室、化学实验室、原辅料实验室、包材实验室等。

5.3.2 资质要求



负责质量检验的人员应受过适当教育，并经专业技术培训，具有基础理论知识和实际操

作技能。



质量控制实验室所有人员的职责应当书面规定。

5.3.3 培训

 

应有经质量管理负责人审核或批准的有关培训的 SOP、方案或计划，培训记录应保存。 应当由有资格的人员进行有计划的培训，内容至少包括员工所从事的特定操作及和其职

能有关的GMP知识，并应对培训效果进行评估。

 

进入洁净区域的人员需按规定进行相关培训。 培训的分类：

 新化验员的培训：分配到实验室的新员工（包括转岗人员）应接受岗前培训，

考核合格后方可进行独立操作。岗前培训的内容至少涵盖以下内容：部门统一 的GMP管理培训；指定岗位的岗位职责；指定岗位应知应会的标准操作规程、

质量标准和分析方法的学习等。

 在岗化验员的再培训：应定期组织化验员进行 GMP、其他法规要求，以及专

业技术知识、标准操作规程等的培训；应组织化验员对新发布的标准操作规程 的学习；质量控制部负责人可以根据工作需要安排化验员参加权威机构或仪器 供应商组织的专业知识培训；如有必要，质量控制部负责人或其授权的人员可 定期组织进行化验员知识及技能的考核。

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实验室控制系统 GMP实施指南

5.4 文件系统

5.4 文件系统

5.4.1 分类

质量控制实验室的文件应符合 GMP 第八章《文件管理》的原则。大体可分为以下几类 文件：

             

质量标准及分析方法。 取样操作规程和记录。 实验室样品的管理规程。

检验记录、原始数据、超标结果的处理。 检验报告或证书。 环境监测操作规程和记录。 生产用水的监测操作规程和记录。 检验方法验证方案及报告。

实验室分析仪器的使用、校准和维护的操作规程及记录。 实验室分析仪器的确认方案及报告。 实验室试剂的管理规程及配制、使用记录等。 标准品的管理规程及标定、使用记录等。 菌毒种的管理规程及记录。

实验室剧毒物品易制毒的管理规程及记录。

5.4.2 要求

质量控制部实验室的所有文件应受控管理，包括起草、修订、发放、存档、销毁等。下 面对5.4.1中的内容逐项描述：



质量标准和分析方法应和注册/申报中的一致或高于注册/申报标准，可以增加注册/申报

标准以外的附加检验项目。



应该有关于原辅料、包装材料、生产中间过程、中间体及成品的取样规程，应包括经授

权的取样人、取样方法、所用器具、取样量、取样后剩余部分及样品的处置和标示，以 及为避免因取样过程产生的各种风险的预防措施等。应做好取样记录，内容至少包括样 品名称、批号、取样日期、取样量、取样人等。

 

应该有样品的管理规程，包括样品的接收、传递、储存和销毁过程。

检验记录是检验人员对其检验工作的实时记录，检验的内容必须和质量标准/分析方法

一致，检验记录应涵盖检验过程的所有信息。所有检验记录应该受控管理。



全部的原始数据和计算必须受控管理，不得随意转抄，更不能擅自将受控记录更换或销

毁。检验记录必须由第二人复核，负责对原始记录的准确性、完整性和与规定标准的符 合性进行复核。如因意外情况将某页原始记录污染或损坏，需要更换和转抄原始数据时， 必须经主管人员认可后到记录管理员处领取新的空白记录（新的记录编号要与原来的加 以区分）进行更换。所有转抄数据必须有另外一人进行复核，转抄人及复核人应在转抄

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5.4 文件系统

实验室控制系统 GMP实施指南

记录上签名、签日期。原记录须保存在该转抄记录的后面，作为本批记录的一部分，不 得丢弃或销毁。



如果以纸质记录为存档文件，原始数据如色谱图、光谱图等应打印出来，签字并附在批 检验记录中。由仪器打印的数据（如；水分滴定结果、温湿度记录等），化验员应在最 终结果后签字确认。易褪色打印数据，如热敏打印数据，应及时复印，并将原件和复印 件一并保存。



如使用电子数据处理系统、照相技术或其它可靠方式记录数据资料，应有所用系统的详 细规程；记录的准确性应经过核对。如果使用电子数据处理系统，应建立系统受权管理， 任何更改情况均应有记录便于追踪；应使用密码或其它方式限制数据系统的登录；关键 数据输入后，应由他人复核。用电子方法保存的批记录，应采用磁带、缩微胶卷、纸质 副本或其它方法进行备份，以确保记录的安全，且数据资料在保存期内应便于查阅。



与批记录相对应的所有控制记录必须至少保存至产品有效期后一年，确认和验证、稳定 性考察的相关记录和报告等重要文件不得销毁。

实验室偏差和超标结果应如实记录，并进行相应的调查。详细要求可见第14章《超出



标准的实验结果》。

  

检验报告或证书

根据需要对每一批所检验产品出具检验报告单。

检验报告单应当提供所检验产品的名称、批号，必要时包括其规格和报告日期。有有效 期的产品，可以在标签或分析报告单上提供失效期。有复验期的产品，可以在标签或分 析报告单上提供复验期。

检验报告单应当列明按药典或客户要求所做的各项测试，包括可接受的限度和得到的结 果。

检验报告单应当由指定的质量部门人员签名、签日期。如有要求，检验报告还应注明原 制造商的名称、地址和电话。

如果由重新包装者/重新加工者、代理人、中间人或由其代表出具新的报告单，这些报 告单上应当注明做分析的实验室的名称、地址和电话。还应当附注原制造商的名称和地 址，以及原制造商的报告单的复印件。









有洁净厂房或（和）实验室的工厂应该有环境监控的规程，包括取样方式、取样频率、 取样点、警戒限、行动限及异常结果的调查及处理等内容。环境监控记录至少包括取样 点、取样日期、取样方式、取样人、结果等内容，并应定期做趋势分析。



工厂的生产用水应在制定规程的基础上定期监测，，包括生产用水的种类、取样点、取 样方法、取样频率、检验项目、接收标准及异常结果的调查及处理等内容。生产用水的 检验记录至少包括取样日期、取样点、检验日期、检验项目等内容，每次检验都应有检 验报告单。应定期对其关键项目进行趋势分析。



分析方法验证方案和报告应该包括验证目的、适用范围、职责、验证项目及标准、方法 描述、验证结论等。具体要求参见第？？章《分析方法验证》

应该有实验室仪器的使用、校准及维护的规程及记录。使用规程应包括仪器的开关机、 具体操作步骤、使用注意事项等；校准规程应包括校准周期、校准内容、校准项目及标 准，还应规定校准失败后应采取的措施等等；仪器的维护规程应包括维护项目、维护周 期等内容。仪器的使用、校准及维护都应如实记录。



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实验室控制系统 GMP实施指南

5.4 文件系统



实验室仪器的验证包括设计确认（DQ）、安装确认（IQ）、运行确认（OQ）、性能确

认（PQ）等内容。具体要求参见第10章《实验室分析仪器的验证》。所有验证文件应 长期保存。



实验室应有试剂的管理规程，包括试剂的领用、登记、储存、使用等规定。实验室配制 的试剂应有配制记录。

实验室应有标准品的管理规程，包括法定标准品和工作标准品的管理。来源于CP、EP 或 USP/NF 的标准品不需要进一步标定，对使用前有预处理要求的标准品（如：干燥处



理），应按照标签或证书的要求进行。非官方来源的标准品应当通过合理的工作获得最 高的纯度，应当全面测定确保其鉴别、效力、质量、纯度、和效价。标准品的管理应涵 盖标准品的使用、内部标准品的标定、标准品的保存等内容。工作标准品应该用法定标 准品进行标定，并做好记录。所有相关标准品都应建立使用记录。



实验室如果使用菌毒种，应该有相应的规程规定菌毒种的领用、登记、储存、使用及销 毁等，并应有详细的记录。

实验室用到的易制毒品/剧毒物品如砷化物、可溶性钡盐等应有相应的管理规程，必须 严格按照易制毒品/剧毒物品的管理规定执行，并建立试剂配制记录、使用记录和销毁 记录等。



9

6 取样

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6 取样

本章中涉及以下问题：  什么地方需要取什么样品？  对于取样人员、取样间和取样设备有什么需求？  取样的流程，以及在制定取样流程时需要考虑哪些方面？  取样文件有哪些要求？ 【法规要求】

2010版GMP正文：

第二百二十九条 取样

应有取样的操作规程，包括：经授权的取样人、取样方法、取样用设备、取样量、取样后剩 余部分及样品的处置和标识，以及为避免因取样过程产生的各种风险的预防措施等。 1.质量管理部门的人员有权进入生产区和仓储区进行取样及调查。 2.应按照经批准的操作规程取样，操作规程应详细阐述： （1）取样方法； （2）所用器具； （3）样品量； （4）分样的方法；

（5）存放样品容器的类型和状态； （6）样品容器的标识；

（7）取样注意事项，尤其是无菌或有害物料的取样以及防止取样过程中污染和交叉污染的 注意事项； （8）贮存条件；

（9）取样器具的清洁方法和贮存要求。 3.取样方法应科学、合理，以保证样品的代表性。

4.留样应能代表被取样批次的产品或物料，也可抽取其它样品来监控生产过程中最重要的环 节（如生产的开始和结束）。

5.样品的容器应贴有唯一性的标签标明内容物，注明样品名称、批号、取样日期、取自哪一 包装容器、取样人。

6.样品应按规定的贮存条件保存，成品的样品应按照注册批准的成品贮存条件保存。

第二百三十二条 留样

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6 取样

1.企业按规定保存的、用于药品质量追溯或调查的物料、产品样品为留样。用于产品稳定性 考察的样品不属于留样。

2.应按照经批准的操作规程对留样进行管理。 3.留样应能代表被取样批次的物料或产品。 4.成品的留样

（1）每批药品均应有留样；如果一批药品分成数次进行包装，则每次包装应至少保留一件 最小市售包装的成品。

（2）留样的包装形式应与药品市售包装形式相同，原料药的留样如不采用市售包装形式的， 可采用模拟包装。

（3）每批药品的留样数量一般应至少能确保按照注册批准的质量标准完成二次全检（无菌 检查和热原检查等除外）。

（4）如果不影响留样的包装完整性，保存期间内应至少每年对留样进行一次目检观察，如 有异常，应进行彻底调查并采取相应的处理措施。 （5）留样观察应有记录。

（6）留样应按注册批准的贮存条件至少保存到药品有效期后一年。

（7）如企业终止药品生产或关闭的，应将留样转交授权单位保存，并告知当地药品监督管 理部门，以便在必要时可随时取得留样。 5.物料的留样

（1）制剂生产用每批原辅料和与药品直接接触的包装材料均应有留样，与药品直接接触的 包装材料（如输液瓶），如成品已有留样，可不必单独留样。 （2）物料的留样量应至少满足鉴别要求。

（3）除稳定性较差的原辅料外，用于制剂生产的原辅料（不包括生产过程中使用的溶剂、 气体或制药用水）和与药品直接接触的包装材料的留样应至少保存至产品放行后二年。如果 物料的有效期短，则留样时间可相应缩短。

物料的留样应按规定的条件贮存，必要时还应适当的包装密封。

【背景介绍】

6.1 定义

为确定药品或物料的质量是否符合预先制定的质量标准，需要根据制定的取样方案对药 品或物料进行取样，取样方案中应明确取样的方法、所用的取样器具，确定取样点、取样频 率以及样品的数量和每个样品的重量，盛装样品用的容器等。取样是整个质量控制过程中非 常重要的一个环结，对于从一批产品中取出的样品，虽然数量很小，但是对该批整批产品的 质量来说却是具有代表性的。因此有必要非常仔细的制定取样计划、执行取样程序。

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6 取样

实验室控制系统 GMP实施指南

6.2 应用范围

药品生产的各个环节都有可能需要取样进行质量检查，但是制程验证、清洁验证和环境 监测相关的取样不会在此论述，因为制程验证和清洁验证的取样很难一概而论，应根据相应 的验证草案进行取样，而环境监测的取样则将在微生物章节进行论述。取样操作主要服务于 以下生产阶段的质量控制：

   

原材料（包括辅料、活性成分和包装材料） 中间产品

中间过程控制的取样 成品（包括留样的取样）

【技术要求】

6.3 要求

6.3.1 人员

选择取样人员时应该考虑以下几方面：

   

良好的视力和对颜色分辨、识别的能力

能够根据观察到的现象做出可靠的质量判断和评估（例如检查要取样物料的包装状况） 有传染性疾病和在身体暴露部分有伤口的人员不应该被安排进行取样操作 取样人员还要对物料安全知识、职业卫生要求有一定了解

取样人员应该接受相应的培训使其熟悉取样方案和取样流程，他们必须掌握取样技术和 取样工具的使用，必须意识到在取样过程中样品被污染的风险并采取相应的安全防范措施， 同时应该在专业技术和个人领域得到持续的培训。

取样人员的培训应该涵盖以下方面：

      

取样方案的制定（取样指南） 取样程序，包括样品的采集方案

取样技能以及取样器具的使用（取样工具和样品容器） 取样时应采取的安全措施（包括预防物料污染和人员安全防护） 样品外观检验的重要性（样品观察的第一眼原则） 对异常现象的记录（例如包装被污染或破损） 取样器具和取样间的清洁

6.3.2 取样器具

应该根据要取的样品选择合适的取样器具。取样器具应该具有光滑表面，易于清洁和灭 菌。取样器具使用完后应该立即清洁，必须在清洁、干燥的状态下保存，再次使用前应进行 消毒，用于微生物检验样品或无菌产品取样时必须先灭菌。破损的取样器具必须有明确标识

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实验室控制系统 GMP实施指南

6 取样

并立即停止使用。一般用来取原辅料的取样器具有浸取式吸管、分层取样器、吸管、塑料勺、 标签和密封条等，生产单位应该尽可能从有资质的供应商处购买此类取样器具。

6.3.3 样品容器

取样用样品容器一般需满足以下要求：

     

易于装入样品 易于倒出样品 容器表面不吸附样品 易于密封和存储 重量轻、便于携带 如需要应该能够避光

6.3.4 取样间

取样间不能使用易产生颗粒物的材质，应易于被有效清洁和消毒。取样间室内表面（天 花板、墙面和地板）应尽可能的保持光滑无痕。取样间一般应在特殊房间或特别设计的房间 （包括生产区间里的取样间），取样间的洁净级别应等同生产区域，如需要应该有防爆功能， 取样间应装备有良好的灯光、满足取样时对温湿度的要求和充分的通风设施（例如装备抽气 单元、高效滤膜和层流单元）。只有经过授权的人才有权限进入取样间，同时必须准备相应 的规程以规定取样间的清洁程序和清洁频次，以及取样间环境的监测。

【实施指导】

6.4 流程实施

6.4.1 取样方案

取样方案是根据物料或药品中要取的样品数量（一个或多个样品）而预先制定的取样程 序。其中包括取混合样品，例如从 n +1个包装中取样混合进行微生物或理化分析；同时亦

包括基于取样量和应取样包装数确定的各初始样品， 例如从不同包装中取样的单一样用于

鉴别实验；还应该包括留样的取样。样品必须是从整批物料中取出的具有代表性部分（随机 样品）。一般来说，取样方案应该清晰定义以下内容：

       

取样的方法 取样的器具

样品量（一般为 2-3倍的全检量）以及需要取的样品数量

是否有特殊取样要求，例如分包样品 样品容器

取样完成后被取样包装上的标签

避免交叉污染应该采取的措施，特别是对无菌产品 对人体毒害的防护措施

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6 取样

实验室控制系统 GMP实施指南

 

样品的贮存条件

清洁程序以及取样设备的储存方式

需要取的样品数量应该根据相关标准，例如国标GB/T2828和 ISO2858等，基于统计学 原理进行计算确定以确保样品有代表性。中间过程控制的样品应该至少从工艺流程的开始、

中间和结束过程进行取样。

6.4.2 取样

取样方法必须明确说明，其中信息应该包含样品数量（一个或多个）及每个样品的取样 量、样品取样位置（例如底部、 下面、里面、外面、上面、中间或者是周边）。如果要取 多个样品，应该在取样方法里说明样品是否应该混合。一般用于物料的逐桶鉴别实验的样品 不允许被混合。

中间过程控制样品的采集一般由中间控制实验室的人员执行，生产单位应制定相应工艺 的关健控制点和取样检测频率。

6.4.3 标识

取回的样品必须要有明确标识，标签上至少应该包括以下信息：

      

样品名称 样品批号 取样日期

样品来源（应具体到包装容器号） 样品储存条件

如需要，应标明取样时间和样品测试允许时间 取样人

取完样之后，被取样的包装容器应该贴上取样标签，同时密封以使贮存阶段内容物产品 质量受损的风险降至最小。

6.4.4 取样记录

取样过程应该被记录在取样报告或取样记录中。取样记录上应该包含取样计划中的所有 内容，如样品名称、批号、取样日期、取样量及样品来源（即样品取自哪个包装）、取样工 具以及取样人等信息应该清楚的记录在取样记录中，必要的时候还应在取样记录上注明取样 时的温度、湿度以样品暴露时间等信息。

6.4.5 取样的异常处理

取样时，取样人员需要对产品（物料）外包装和物料外观进行现场检查，需要检查核对 标签，如品名、生产日期和失效日期等信息。如果发现不符合的现象，取样人员应立即停止 取样，将观察到的不符合现象记录在取样记录中，并通知公司质量管理相关部门进行调查处 理，调查可与采购人员和供应商/生产商一起进行。

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实验室控制系统 GMP实施指南

6 取样

6.4.6 留样

A. 原则

用于留样的样品要能代表整批物料或产品的质量，也可以抽取其它样品来监控生产过程 中最重要的环节（如生产的开始和结束环节）。成品留样应该是最终市售包装形式，原料药 的留样如不采用市售包装形式的，可采用模拟包装。用于药品生产的活性成份、辅料和包装 材料均需要留样。

B. 数量

一般来说，成品留样量应至少为全检样品量的两倍。对于活性成份、辅料和包装材料的 留样量，应至少足够进行鉴别检验。

C. 储存条件

成品留样应该根据批准的储存条件进行储存，至少储存至效期后1年。原始物料应按照

生产商/供应商要求的条件储存，如果稳定性许可的话应储存到物料最后使用日期后2年。

生产过程中用到的溶剂、气体和制药用水不需要留样。

D. 使用

留样的使用可以分为主动使用和被动利用两种类型，主动使用是指公司内部主动对留样 进行质量追溯。被动使用是指有客户或政府监查机构投诉或其它非预期事件发生，用于质量 调查时对物料或产品的质量确认。留样使用之前必须得到所在公司授权部门的批准。

E. 文件

留样应有相应的留样记录，记录留样的名称、批号、数量，取样日期，产品（物料）失 效日期、储存条件、储存期限以及留样管理人员的签名等信息。

对于成品留样，应至少每年一次对留样外观进行检查并留下检查记录，一般应每年至少 对同一产品的3批留样进行外观检查。外观检查不应损坏留样包装。在效期内出现外观异常

时（例如外包装变形、褪色、字迹不清淅或掉字等），公司质量管理部门应对异常现象进行 全面彻底调查并采取相应纠正和/或预防措施。

【实例分析】



某药厂的取样计划示例

该药厂将供应商根据其历史供货状况将供应商分成批准级（Approval）、授权级(Qualified) 和认证级(Certified)三个不同等级。接收物料时，对于来自不同等级供应商的物料需要进行 不同程度的取样和检验。以下是该药厂一份针对批准级供应商提供的固体原料药 A的取样

方案，该原料要求储存于2-8℃的环境中：

 取样量和取样数量的确定

基于统计学原理对来货进行取样，每一个包装都需要分别取样2g，并根据现行控制方

法进行鉴别实验；从 n+1个包装中取样混合进行微生物限度实验，总取样量20g，每个取

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6 取样

实验室控制系统 GMP实施指南

样包装取平均量；从 n +1个包装中取样混合进行理化全检实验，总取样量40g，每个取 样包装取平均量；从任意一个包装中取样50g作为留样。

 取样工具

不锈钢勺、不锈钢插入式取样枪，其中用于微生物取样的不锈钢勺须先灭菌并且在灭菌 后一周内使用。

 盛装样品用的容器

2#自封袋用于装鉴别样品，5#自封袋用于装理化样品，经过灭菌的玻璃瓶用于装微生物 样品，适当体积的棕色玻璃瓶用于装留样。

 取样程序

取样之前，根据现行 SOP准备样品标签，标签信息包含样品名称、样品类别、数量、 批号、取样日期、取样人等。根据现行 SOP对取样工具进行消毒并做好消毒记录。

取样过程严格按照现行SOP 执行，佩戴口罩、手套、套袖等防护设施，每一件取样工

具只能用于从一个包装中取样。样品取回后应储存于 2-8℃冷藏冰箱。留样交由留样管理员 登记接收并尽快转移至冷藏库中储存。

从上述示例可以得到整个取样操作所需要的全部信息，任何一个合格的取样操作员都可 以根据描述取回样品。这正是一个完善的取样计划所应该达到的目的。

【要点备忘】

任何时候都必须清楚理解以上提到的各个方面，没有代表性的样品，其分析结果并不能 得出整批产品质量的准确结论。取样错误会让质量控制程序的余下所有阶段处于令人怀疑的 状态。在实际工作中，要确定分析结果不符合质量标准的根本原因是由于取样错误造成的是 非常费时和费事的。所以，有代表性的样品将是实验室能否提供准确可靠的实验结果的最重 要前提。为了获得有代表性的样品，实验室应该重点关注以下方面：

   

建立取样操作规程 明确和完善取样计划 严格执行取样计划

建立取样员的培训制度，既有新员工的取样技能培训，还应有持续性的取样技能和相关

法规的培训计划。

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实验室控制系统 GMP实施指南

7 试剂及试液的管理

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试剂及试液的管理

本章中涉及以下问题：  试剂与标准品和对照品有什么区别？  试剂应该怎么标识？  试剂的用途和稳定性如何规定？  针对试剂的文件有哪些要求？ 【法规要求】

2010版GMP正文：

第二百三十三条 试剂、试液、培养基和检定菌

1.试剂和培养基应从可靠的供应商处采购，必要时应对供应商进行评估。

2.应有接收试剂、试液、培养基的记录，必要时，应在试剂、试液、培养基的容器上标注接 收日期。

3.应按照相关规定或使用说明配制、贮存和使用试剂、试液和培养基。特殊情况下，在接收 和使用前，还应对试剂进行鉴别或其它检验。

4.试液和已配制的培养基应标注配制批号、配制日期和配制人员姓名，并有配制（包括灭菌） 记录。不稳定的试剂、试液和培养基应标注有效期及特殊贮存条件。标准液，滴定液还应标 注最后一次标化的日期和校正因子，并有标化记录。

【背景介绍】

7.1 定义和应用范围

试药或试剂是实验室对物料或产品进行质量控制的重要组成部分。正是考虑到试剂在质 量控制程序中的重要性，要求在试剂准备、配制和文件记录方面应视同标准品或对照品进行 管理。欧盟GMP 实施指南明确要求，不管试剂将用于定量分析还是定性分析，都应该确保

试剂质量并按批准的方法配制试液。。化学试剂用于质量控制的各个分析阶段，根据使用领 域不同，可以选择不同级别的试剂。本章主要讨论化学类试剂和试液，培养基的管理将在第 17章中详细论述。

【技术要求】

7.2 要求

7.2.1 采购接收和标识

实验室在接收试剂、试药时，应在每个试剂瓶或包装箱上贴上标签，标签上应注明接收 日期和试剂的失效日期。如果试剂生产厂家给出有效期的可以采用厂家的效期，厂家没有明

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7 试剂及试液的管理

实验室控制系统 GMP实施指南

确给出有效期的，使用单位应规定使用效期。实验室配制的试剂，标签上还应标明试剂名称、 贮存条件以及试剂配制人和配制日期，若是滴定液还需要标明浓度、校正因子以及标定条件。 试剂的第一次开瓶使用者，应将试剂的开瓶日期同时标注于试剂标签上并签名。

试剂标签上的试剂名称可以使用规定的编码代替，但是必须确保编码是唯一的，防止引 起试剂与试剂之间或者同种试剂不同批次的混淆。

对于剧毒或易制毒试剂的采购和管理应符合国家相关法规的要求，应该在申请采购之前 向相关部门提出申请，接收时应有专门的可控区域进行储存。

7.2.2 储存和使用

如果试剂瓶上有明确的储存条件要求，必须遵照执行。否则，试剂应储存在密闭容器中， 避免阳光直射并置于干燥、温度可控的环境中，且试剂库温度应有记录。

原则上，试剂均用于特定的实验目的，如果不能采购到，试剂的配制过程应尽可能详细 的描述作为试剂配制指南。

剧毒或易制毒试剂的储存应有专人进行管理，使用应有记录，进行物料数量平衡管理， 确保剧毒或易制毒试剂被用于预定用途。

使用试剂时，其名称或代号、生产商的名称、生产日期和有效期都应包括在质量控制测 试过程的记录中，以保证其可追溯性。

7.2.3 试剂使用效期的管理

实验室用到的所有试药和试剂，都应该有合理的有效期。试剂的有效期应该是基于历史 数据的总结或者是稳定性研究的结果，并经过质量管理部门的批准。对于采购的试药和试剂， 应该遵守生产厂家规定的有效期。对于生产厂家没有规定有效期的试剂，使用单位可以根据 合理的科学依据规定试剂的有效期，一般来说试药自开瓶之日起最长推荐有效期不应超过5 年。

7.2.4 报废

实验室应该制定相应的试剂报废处理流程，根据不同的试药、试剂特性和相应的法规要 求制定相应的报废流程。

7.2.5 文件管理

试剂管理的文件一方面应涵盖试剂的接收与配制，另一方面也应涵盖试剂在实验室的使 用。

试剂的配制程序必须精确描述，最好是使用同公司实验指南一致的格式。配制程序中应 规定使用试剂的质量等级。试剂配制记录应包含配制日期以及所用试剂的生产厂家、批号等 信息。对于实验室配制滴定液，使用单位应该有相应的程序规定其配制和标定，并明确标定 与复标的接受标准。

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实验室控制系统 GMP实施指南

8 标准品/对照品

8 标准品/对照品

本章中涉及以下问题：  标准品/对照品的类型有哪些？  标准品/对照品的定义？  为什么要用标准品/对照品？  标准品/对照品的处理？ 【法规要求】

2010版GMP正文：

第二百三十四条 标准品或对照品

1.标准品或对照品应按规定贮存和使用。

2.标准品或对照品应有适当的标识，内容至少包括名称、批号、制备日期、有效期（如有）、 首次开启日期、含量或效价、贮存条件。

3.企业自制工作标准品或对照品的，应建立工作标准品或对照品的质量标准以及制备、鉴别、 检验、批准和贮存的操作规程，每批工作标准品或对照品应用法定标准品或对照品进行标化， 并确定有效期，还应通过定期标化证明工作标准品或对照品的效价或含量在有效期内保持稳 定。标化应有相应的记录。

【背景介绍】

8.1 定义

标准品是通过特殊合成工艺单独合成或者是用正常流程生产的通过额外的提纯工艺得 到的物质。标准品在用作标准品/对照品之前须经检定确认其质量和最高可能达到的纯度。 国家药品标准品、对照品是指国家药品标准中用于鉴别、检查、含量测定、杂质和有关物质 检查等的标准物质。

企业可以选择相应的物质，对照国家标准品进行标定，标定后的物质可以在企业内部用 作标准品，是为企业自制工作标准品。

8.2 分类

标准品按照纯度可以分为以几类：

   

基准标准品纯度达到原子重量级标准的物质。 一级标准品市售的纯度达到99.98%的标准品。

工作标准品市售的纯度达到99.95的物质。

二级标准品用一级标准品标定的、纯度较一级标准品稍低的物质。

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8 标准品/对照品

实验室控制系统 GMP实施指南

8.3 应用范围

标准品、对照品应用于药品鉴别、检查、含量测定、杂质和有关物质等药品检验的各方 面。

【技术要求】

8.4 要求

企业应建立对标准品、对照品的管理规程，明确对其的管理和使用。

8.4.1 接收

质量控制部门应安排有专人负责接收和管理标准品并建立标准品接收记录。接收标准品 时对于有储存温度要求的标准品应该立即放到符合温度要求的环境中。标准品负责人在接收 时应该检查标准品名称、批号、数量、有效期等信息并将其记录在标准品接收记录中。第一 位开瓶者应该在标签上注明首次开瓶日期，并签名签日期。

8.4.2 标识

购自官方或有资质厂家的标准品、对照品一般都会有明确的标识。

企业自制的标准品、对照品应该有明确的标识，标签中应该至少包含标准品的名称、批 号、纯度、有效期或复检期、数量和贮存条件等，如有必要，还应包括处理指南、安全指南 等信息。

企业自制的标准溶液也应该有明确的标识，标签中应该包含标准溶液名称、配制人、配 制日期和溶液有效期。为了便于标准溶液使用的追踪，标准品溶液标签中还可以定义标准品 液的编号，编号的形式可以根据情况由使用单位自行定义，实验记录中应能体现标准品溶液 的编号。

对于企业自制的工作标准品，还应在标签中明确标定日期，标定人及标定浓度。

8.4.3 标准溶液的稳定性研究

药典或者其它标准品、对照品的提供机构一般不会明确规定标准品的有效期，特别是对 开封的标准品或配制的标准溶液使用期限，原则上来讲，不推荐重复使用标准溶液，如果需 要重复使用同一份标准溶液，使用单位应对其稳定性和使用效期进行研究。在进行标准品溶 液的稳定性研究之前，应起草该标准品溶液稳定性研究草案，并获得公司质量管理部门的批 准。稳定性研究草案里应明确标准品溶液的配制程序、储存条件、稳定性研究方案、稳定性 结果的记录和判断程序。对于标准品的有效性的判断，可以根据不同时间点的标准品检查结 果，比如HPLC的峰面积、UV 的吸收值或者TLC展开图中斑点大小和颜色深浅等。稳定 性研究结束后，需要对实验结果进行总结、分析，根据评估给出溶液的内部推荐效期，同时

征求质量管理部门的意见并获得其批准。批准后的标准品溶液效期可用于实验室内部对标准 品溶液的使用。

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实验室控制系统 GMP实施指南

8 标准品/对照品

8.4.4 标准品、对照品的使用、处置和贮存

使用单位应该有 SOP对标准品、对照品的储存、处置和分发等流程进行规定。SOP 中

应该规定有正确的处置方式、文件的处理，对于不在室温贮存的标准品还应规定从储存区域 取出后恢复至室温的时间。

SOP还需要规定标准品的使用注意事项，例如是否需要在称量使用前干燥、是否需要

重新测定标准品、对照品的LOD或者有其它应规定的流程，最后还应规定用于计算的数值。

应根据标准品、对照品的特性决定其储存条件。有些可能需要冷冻储存，有些可以是冷 藏储存，还有一些性质比较稳定，只需要储存于常温环境中即可。从标准品稳定性角度来说， 对标准品、对照品最好的储存方法是将其分装成合适的小包装单独标识进行储存。

8.4.5 文件管理

标准品、对照品的管理的文件应包括标准品的接收、标识，标准品和标准品溶液的储存 和使用，以及过期标准品和标准品溶液的处置。

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9 实验室分析仪器的确认

实验室控制系统 GMP实施指南

9 实验室分析仪器的确认

本章中涉及以下问题：  哪些分析仪器需要确认  如何进行分析仪器的确认  分析仪器的确认文件如何编写 【法规要求】

2010版GMP正文：

第七章 确认与验证

第一百四十六条：企业应确定需要进行的确认或验证，以证明有关操作的关键要素能得到有 效控制。确认或验证的范围和程度应经过风险评估来确定。

第一百四十七条：企业的厂房、设施、设备和检验仪器应经过确认或验证，应采用经过验证 的生产工艺、操作规程和检验方法进行生产、操作和检验，并保持持续的验证状态。 第一百五十二条：确认和验证不应视为一次性的行为，首次确认和验证后应根据产品质量回 顾分析情况进行再验证。关键的生产工艺和操作规程应定期进行再验证，确保其能够达到预 期效果。

第一百五十四条：企业在验证主计划或其他相关文件中作出相应规定，确保厂房、设施设备、 检验仪器、生产工艺、操作规程和检验方法等保持持续的验证状态。

第一百五十五条：应根据验证对象制定验证方案，经过审核、批准。并经过审核、批准。验 证方案应明确实施验证的职责。

第一百五十六条：验证应按照预先确定和批准的方案实施；验证工作完成后，应写出验证报

告，并经审核、批准。验证结果和结论（包括评价和建议）应有记录并存档。

 与国外法规的比较

新版中国GMP 中第七章“确认与验证”对企业确认和验证工作进行了较详细的描述， 这些与欧美法规中的要求基本一致。

下表中列出了美国和欧盟指南中涉及实验室分析仪器和实验设备确认的相关指南 机构或组织 文件名称 美国食品药品监督管理局（FDA） Guide to Inspection of Pharmaceutical Quality Control Labs药物质控实验室检查指南 Guide to Inspection of Microbiological Pharmaceutical Quality Control Labs 微生物药物质控实验室检查指南 世界卫生组织（WHO） 22 WHO Expert Committee on Specifications for Pharmaceutical Preparations Report 40 实验室控制系统 GMP实施指南

9 实验室分析仪器的确认

WHO药品生产专家委员会报告40 欧洲药品管理局（EMEA） EC GMP Annex 11 Computerized Systems 欧盟GMP附录11 计算机化系统 Annex 15 to the EU Guide to Good Manufacturing Practice, Qualification and Validation 欧盟GMP指南附录15，确认和验证 药品检查合作组织（PIC/S） PI 023-2 Aide Memoire on Inspection of Quality Control Laboratories QC实验室检查备忘录 美国药典（USP） Chapter 1058 Analytical Instrument Qualification 分析仪器的验证 【背景介绍】

近年来，自动化程度高，构造复杂的分析仪器的应用日益增加，分析仪器确认在实验室 管理系统越来越重要。虽然过去也进行仪器、设备的测试和检定，来确保仪器的准确，但随 着全面确认体系的发展建立，国际上对于生产设备、设施的确认指南和要求也逐渐被应用于 分析仪器的确认。

适用的分析仪器是获得准确可靠实验数据的基础。分析仪器的确认是证明仪器的安装， 运行和性能满足使用要求，并建立相关校验和维护程序的过程，通常包括设计确认，安装确 认，运行确认和性能确认。

9.1 应用范围

分析仪器的确认适用于质量控制实验室（QC）和中间过程控制实验室(IPC)的实验设备 和分析仪器。

现代制药工业的实验室有很多种类的仪器设备，包括从简单的熔点仪到程序化高的高效 液相色谱仪，近红外分析仪等。复杂程度不同的仪器所需要的确认级别和范围也不一样。用 户可以根据仪器的复杂程度和使用需要，将仪器分为不同的类别，确定不同的确认级别。目 前国内还没有实验室仪器设备分类的标准，参考美国药典第1058章 >分析仪器的确认<， 根据所需的确认级别，可以分为以下3类：

Ａ类，不具备测量功能，或者通常只需要校准，供应商的技术标准可以作为用户需求。 例如：磁力搅拌器，离心机，摇床。

Ｂ类：此类仪器具有测量功能，并且仪器控制的控物理参数（如温度，压力或流速等） 需要校准，用户需求一般与供应商的功能标准和操作限度相同。例如：熔点仪，分析天平， ＰＨ计，折射仪，滴定仪，干燥箱等。此类仪器或设备通常需要进行安装确认和运行确认， 并制定相关操作和校验ＳＯＰ。

23

9 实验室分析仪器的确认

实验室控制系统 GMP实施指南

Ｃ类：此类仪器通常包括仪器硬件和其控制系统（固件或软件），用户需要对仪器的功 能要求，操作参数要求，系统配置要求等详细描述。例如：溶出仪，紫外分光光度计，高效 液相色谱仪，气相色谱仪，恒温恒湿箱，近红外分析仪，红外光谱仪，等等。此类仪器和设 备需要安装确认，运行确认和专门的性能确认，并制定相关操作、校验和维护SOP。

需要指出的是仪器类别的划分及其适应的确认程度应由实验室根据仪器的使用需求确 定，可以将分类的原则在仪器确认的ＳＯＰ中描述。根据仪器的使用不同，不同实验室的仪 器分类也可能不同。

9.2 确认实施

9.2.1 验证总计划

分析仪器确认和验证与其他确认活动一样，应按照公司确认或验证总计划进行管理和实 施。确认或验证总计划全面介绍了公司确认的方针策略，组织实施，以及确认活动的范围包 括厂房、设施、设备、检验仪器、生产工艺、操作规程，分析方法，计算机系统等；再确认、 变更控制的要求，计划和时间安排也是确认或验证总计划的重要内容。根据不同公司确认管 理的要求，分析仪器确认可以作为公司确认或验证总计划的一部分，也可以制定单独的确认 或验证总计划。确认总计划的制定可参见公用系统指南确认和验证章节。

9.2.2 确认方案

在确认实施前，应由确认负责人编写方案。确认方案要对确认各个阶段（设计确认，安 装确认，运行确认和性能确认）的要求进行规定，对于比较复杂的仪器设备，每个阶段可以 准备单独的确认方案；对于相对简单的仪器，所有阶段可以包含在同一个方案中。 在确认方案中，应对仪器的使用目的，主要功能，关键构造进行描述，详细定义需要确 认的项目、测试程序和接受标准，通常确认方案要包括以下内容

  

确认目的 确认过程的职责

仪器介绍，包括仪器的生产商， 型号，序列号，操作系统，关键构造和主要功能的描

述

        

设计确认的程序和接受标准 安装确认的程序和接受标准 运行确认的程序和接受标准 性能确认的程序和接受标准 仪器的校准要求

确认过程中的培训，包括使用，校准和维护的培训 相关SOP 的制定，包括仪器操作，校准和维护标准操作规程

确认过程中偏差的处理 确认报告的编写

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实验室控制系统 GMP实施指南

9 实验室分析仪器的确认

如果确认方案是由仪器供应商提供，在确认实施前，确认方案应由确认负责人和质量部 门审核批准，以确认符合本公司确认的要求才能使用。如不符合，应和供应商进行沟通并修 改或增加确认项目或要求。

9.2.3 确认实施

确认活动要依照已批准的确认方案实施，所有确认活动应进行实时记录。实施过程中如 果出现偏差，应对其进行及时调查和评估。

A. 设计确认 DQ (Design Qualification)

设计确认是根据用户需求标准（URS）的要求检查仪器的设计规格，包括仪器的功能， 配置，操作参数的范围是否满足使用要求，以及对仪器供应商提供确认，维护，培训资质能 力的确认。设计确认通常在仪器采购前进行。

设计确认主要有以下活动和文件：



检查仪器的设计，包括仪器的主要配置，功能原理，参数范围，操作系统，安装、使用

环境以及与其他系统的连接等

   

如需要，检查仪器及其配件的材质证明，如溶出杯的材质

确认供应商的资质能力。如需要，可对供应商进行审计，形成审计文件 主要配件列表 P&ID图

实验室仪器大部分为市售的非订制仪器（commercial off-the-shelf），此类仪器已经由制

造商在出厂前完成设计和生产，对于实验室用户不必再进行单独的设计确认，但仪器确认负 责人和使用者应检查和评估供应商提供的设计确认文件或规格标准是否满足要求。并应确认 供应商有能力提供仪器安装，确认，维护以及培训的要求。

B. 安装确认 IQ(Installation Qualification)

安装确认是提供文件性的证明，确认仪器是按照规定的要求安装的，并且安装环境满足 运行要求。并且检查仪器及其配件是否与订单一致，使用手册、出厂证明是否齐全。

安装确认主要包括以下内容和文件：



交付物检查，检查仪器的型号与订单一致，仪器配件，软件，操作手册齐备，没有遗漏

和破损。



检查并记录仪器的相关信息，型号，序列号，操作系统的种类和版本号，以及安装房间

号等。通常使用表格或安装图。



检查并记录安装环境及相关动力系统是否满足规定的要求，包括环境的温湿度，电力系

统，压缩空气等。例如对于天平，溶出仪检查安装实验台的水平度是必须的。



仪器的安装，包括硬件和软件的安装。通常由供应商和实验室确认人员共同完成。按照

确认方案的要求，安装并记录仪器安装过程。 确保仪器主体，测量仪表，传感器，管

路，电源电缆等被正确连接，需要时应对关键部件和管路进行标识。对于需要计算机软 件控制的仪器，安装前要确认计算机的配置满足控制软件的要求。。

25

9 实验室分析仪器的确认

实验室控制系统 GMP实施指南

 网络和数据存储: 一些仪器需要连接网络或者数据存储器，比如HPLC，应按要求连接，

并检查其功能。

C. 运行确认 OQ (Operation Qualification)

在仪器安装确认完成后，测试仪器的功能能否满足设计要求和用户需求的过程。测试的 种类和范围依赖于仪器的复杂性和功能性。如需要，仪器所采用的操作系统的功能也在此阶 段进行测试. 运行确认的草案应包含测试项目，详细地测试过程，使用的标准仪器或标准品 等，以及接受标准。每个测试结果应被清晰的记录，并由专人复核。

主要测试内容和文件要求如下：



校验：关键仪表、传感器应在运行确认前或在运行确认中进行校验。校验范围应满足用

户使用的范围。如HPLC的流速，若实际使用范围是0.5-3.0ml/min，则校验范围应至少

涵盖0.5-3.0ml/min。



仪器功能测试：用户需求中所有规定的功能都应该被测试，特别是对于质量控制和安全

有关键影响的功能是非常重要的。应根据用户需求的操作范围，对操作参数的范围进行 试确认，而不能仅仅对典型的情况进行测试。如果可以，应进行挑战性试验。

 

报警测试，如冰箱温度超出要求，恒温恒湿箱的温湿度超出规定范围。

如果操作系统有登录权限的设定功能，应进行测试。不同级别的权限如管理员、使用者

应在使用SOP 中进行规定。



数据的保存、备份和存档----基于对操作系统和数据处理系统的需要，数据的处理如安

全性，存储，备份，恢复, 审计追踪等应按照规定的程序进行测试。

 

培训，应由供应商对使用人员，维护人员进行培训。

此外，如果适合，仪器的操作标准规程，校验和维护程序也应该在运行确认阶段制定。

D. 性能确认 PQ (Performance Qualification)

性能确认的目的是确认仪器能够按照用户需求持续运行。在安装确认和运行确认完成后， 通过性能确认证明仪器的在正常操作环境中的适用性，主要活动包括：

性能测试：根据用户的使用要求，设计一个或多个测试确认仪器满足预期的使用要求， 如培养箱的性能确认，应根据用户要求的温度范围进行空载和最大负载实验。系统适用性实 验，或其他测试检查也可用于性能测试，如 TOC可以依照药典进行系统试用性试验。水分

滴定仪可以进行重现性测试证明仪器的稳定性。有些仪器的运行确认和性能确认可以在一个 阶段进行并记录的，如HPLC的 OQ/PQ 测试,UV-Vis的OQ/PQ测试

在 OQ/PQ 中进行的测试，可以规定在仪器的操作或校验SOP 中，在日常使用过程中定

期执行，以检查和确认仪器持续始处于受控的状态，建立日常使用中的测试项目和频率是 OQ/PQ的一部分。测试项目和频率的设定应基于下列因素和必要的风险评估：

   

法规要求

测试功能的关键程度 仪器供应商的推荐 仪器的操作环境

26

实验室控制系统 GMP实施指南

9 实验室分析仪器的确认

 仪器本身的稳定性，或基于此类仪器的历史数据分析

9.2.4 确认报告

所有测试项目完成后，应由确认人员根据确认记录起草仪器确认报告，用来总结确认活 动，并确认确认方案中的所有项目是否完成，评估测试结果以及对仪器状态明确的阐述和结 论。确认报告主要包括以下内容：

  

对确认结果的总结概述

设计确认，安装确认，运行确认和性能确认的结果和记录

确认支持性文件，如标准仪器或标准品的证书，供应商工程师的证书等文件应被附于确

认报告。

  

对确认过程中偏差的总结。

确认结论。 清晰的阐述仪器是否满足使用要求。

仪器的操作、校验和维护的 SOP 的制定作为确认活动的一部分，应在确认报告中予以

描述并确保在仪器使用之前得到批准。仪器操作程序，校验频率、项目及接受标准，维 护内容和频率，以及人员的职责应在SOP 中详细规定.



性能测试项目，系统适用性试验的要求：如果在确认过程中，一些测试项目需要在日常

使用中定期检查，应在报告中描述。通常可以统一在使用或校验 SOP 中规定。使用、 维护的培训情况，应有相应的培训记录



仪器再确认的要求：可以根据法规和使用要求，供应商的推荐或历史数据规定再确认的

周期。

9.2.5 系统适用性试验

系统适用性试验通常在仪器使用过程中进行，是证明仪器或系统在使用时满足预期使用 要求的测试，逻辑上可以认为是仪器确认的持续。

美国药典中定义系统适用性试验是用来确认仪器或系统的性能能够满足既定标准，这些 测试与样品测试一起进行，以确保仪器或系统的性能在使用时是被接受的。系统适用性试验 是液相和气相色谱法必须的组成部分。是用来证明色谱系统在使用时满足预期的实验要求， 是对仪器性能，分析操作，色谱柱条件及被测试样品的综合评价。主要评价指标包括:分离 度（R），系统精密度（RSD）， 托尾因子（T）等。评价指标的标准通常来自方法确认的 规定，所以这种系统适用性试验认为是基于实验方法的系统适用性试验，是实验方法的必要

组成。

有些系统适用性试验的测试项目来源于仪器确认。例如，水分滴定仪，可以用酒石酸钠 二水物测量器准确性和精密性，如果测量结果满足要求，说明仪器满足日常使用的要求；PH 计使用前需要进行标准液的校准。TOC 的系统适用性试验。该试验的项目和标准通常来自 于仪器确认的性能测试项目，可以被规定在仪器使用或校验的 SOP中。

9.2.6 实验室仪器控制系统和数据处理系统的确认

美国药典第 1058章 >分析仪器的确认<将实验室应用的软件分为3类：固件；仪器控 制，数据获取、处理的软件；独立软件。

27

9 实验室分析仪器的确认

实验室控制系统 GMP实施指南

 固件系统（firmware）

固件系统内置于系统的集成芯片中，仪器的操作通过集成芯片完成。用户通常不能改变 固件的设计和功能，只能进行简单的参数选择或设置，如果固件出现问题，仪器也不能正常 操作。因而，固件和仪器硬件是一体的，而不是独立于仪器的软件。毫无疑问，当仪器进行 确认时，其集成固件的功能已经被确认，所以不需要进行单独的固件确认。如果可能，应在 IQ过程记录固件的版本号。当仪器固件的版本升级或改变时，应通过仪器的变更系统进行

控制。



仪器控制， 数据获取、处理的软件

这类软件通常安装在与仪器连接的专用电脑上，比如 HPLC的化学工作站，UV的操作 软件等。仪器的操作，数据的获取和处理都通过软件操作完成，只有很少的操作需要通过仪 器硬件。软件和仪器的功能是紧密配合，难以分开的，对产生可靠的分析数据都是至关重要 的。因而，对于系统整体的确认要比单独进行软件确认更有效。用户在系统测试时，如果仪 器操作和数据处理都是满足要求的，则证明软件的功能也是适合的。但当有专门的要求，或 软件重新安装或升级是，应进行软件的安装确认和运行确认。

在仪器初始确认时，仪器的供应商应提供软件设计和经过确认的证明。安装软件的电脑 和操作系统应满足软件的配置要求，应按照供应商的要求进行软件安装，安装后确认安装是 否完全。

无论是软件和固件，根据仪器的功能和使用的需要，权限控制，数据的保存，备份，存 档或审计追踪应该按照批准的方案在运行确认中进行确认。



独立软件

独立的软件系统，例如LIMS，实验室色谱处理系统等的确认可参照质量系统指南计算

机系统确认的规定执行。

9.2.7 再确认

再确认通常分为定期再确认和基于仪器变更等引起的再确认。



仪器变更等引起的再确认

当仪器有下列情况时，其确认状态受到影响应进行再确认，

 经历重大维修，或更换关键部件  仪器的安装地点需要变化，  软件或硬件升级，

 由偏差，数据超出标准或数据趋势分析引起

这类再确认的范围应建立在风险评估、变更控制和偏差文件的基础上，根据评估结果， 重新进行安装确认，运行确认或性能确认。仪器变更应该有记录，再确认应按照要求准备确 认方案和报告。



定期再确认

仪器定期再确认的目的是为了提供证明在仪器日常使用过程中，仪器本身或使用环境的 变化(有意的或无意的)没有影响仪器的整体性能，确保分析数据的可靠性。定期再确认通常

28

实验室控制系统 GMP实施指南

9 实验室分析仪器的确认

重复初始确认过程中 PQ 的全部测试或部分测试。再确认的时间间隔和测试内容应规定在确 认报告或仪器的使用 SOP中，制定时应考虑下列因素：

 法规要求，  仪器类型，  供应商的建议，  使用环境，

 日常的维护和校验的程度。

一个很好的方法是，定期对实验室仪器进行确认状态的回顾评估，根据评估的结果，决 定再确认的执行和范围。回顾和评估应至少包括以下内容：

 上次确认的方案和报告  是否有新的法规要求  仪器相关的技术文件是否齐备

 校验和维护是否按规定执行，历史记录和趋势回顾  操作 SOP是否被正确执行，使用日志的回顾

 仪器相关的偏差情况

 仪器变更控制，一系列微小变更的累积会产生关键性的影响

【实例分析】

某实验室购买一台新的溶出仪，需要进行仪器确认。下面介绍自动取样溶出仪的IQ,OQ

和 PQ 的主要测试项目和要求：

表 9-1 自动取样溶出仪确认测试项目示例

测试 测试内容 接受标准 测试结果 项目 DQ 此溶出仪为市售的非订制仪器， 不需要专门的设计确认 由厂家在出厂前完成设计并生 产，不需要专门的设计确认。应 检查其规格标准是否满足用户 需求 IQ-1 仪器包装及开箱检查 外包装无破损 仪器主机及配件齐全（参照合 同清单） 记录仪器序列号 仪器出厂合格证书及机器使 用说明书齐全 IQ-2 安装条件是否满足要求： 试验台水平测试：用水平尺测  水平测试符合  试台面水平度 压缩空气连接 电源电缆连接 压缩空气压力3-5 bar  29

9 实验室分析仪器的确认

实验室控制系统 GMP实施指南

IQ-3 开机显示 IQ-4 加热水域循环检查 IQ-5 循环泵

样品收集器 溶媒补加器

电源连接正常 所有功能键显示正常



水域循环正常，循环过程没有气 泡

循环泵管路连接正常，溶媒循环 正常

连接正常，溶媒经各个通道被收 集到对应的样品收集器中

连接正常，溶媒能经各个通道加 到对应的溶出杯中

OQ-1 显示功能确认

日期和时间显示 日期和时间显示正确 记录操作程序版本号 OQ-2 操作测试:

搅拌开关: 开/关按钮 桨转动/停止 加热开关 加热开始/停止 温度设定：按住 SET键，同时键 开始加热 入所需温度（20℃/45℃），然后 按ENTER键确认

转速设定：按 SET键至转速反显 桨转动正常 为灰色，设定速度范围  25-250RPM

手动/自动操作： 自动取样运行：

Ready / remote 模式显示正确 运行正常，溶媒经各通道收集到 对应的样品收集器中

OQ-3 校验

晃动度: 转轴, 桨, 转篮 转轴： 不得大于2mm 用 晃 动 度 测 试 仪 测 量 桨：不得大于0.5 mm

转篮：不得大于1.0 mm （标准参照中国药典）

转动速度：

用转速测试仪测定

应在设定转速的±4%内，如 50 RPM：±2 RPM 100 RPM：±4 RPM （标准参照中国药典） 转桨和转篮下沿应在测试装置 标识线内，即25 ± 2 mm （标准参照中国药典）

桨/转篮到溶出缸底的距离

温度控制： 溶出杯温度实际温度应为 37±  水域加水至刻度线，溶出缸 0.5℃

（标准参照中国药典） 加脱气水900毫升，

 温度设定37度，运行至温

30

度稳定，一般至少1小时

实验室控制系统 GMP实施指南

9 实验室分析仪器的确认

 查看显示温度

 用标准温度探头测试水域 温度

 用标准温度探头测试溶出

各通道流速与平均流速间的允 许偏差为± 2.0%

PQ-1 根据美国药典要求,用泼尼松标 测试结果应符合要求（基于所使

准校正片进行系统适用性测试 用USP校正片的批号） 其他

培训 仪器操作培训 由供应商进行仪器操作培训，并

有培训记录

由供应商进行校准和维护的培 仪器校验和维护培训

训，并有培训记录

SOP 仪器操作标准程序 在确认过程中准备，并在仪器使 的制 用前被批准 定 仪器校验和维护标准程序 在确认过程中准备，并在仪器使

用前被批准

支持 标准仪器证书（晃动度仪，转速 应有相关证书原件或复印件，并 性文 仪，标准温度测试仪） 作为报告的附件 件 标准物质证书（校验片及标准物

质）

确认工程师资质证书

杯的实际温度 自动取样泵速度校准

【技术要点】



用户需求说明（URS）

用户需求标准： 在购买仪器前，通常由仪器使用者起草用户需求标准，并由相关技术 部门和质量部门审核批准。用户需求标准的内容主要包括仪器的功能性要求，系统配置要求， 以及供应商的服务要求等。用户需求标准不但是选择仪器的标准，也将作为仪器确认的基础。 所以对于仪器功能描述，参数的使用范围要根据实际需求规定明确，以便在确认过程中测试， 例如：温度范围，流速范围等。



风险分析（Risk analysis）

风险分析已经被很多公司应用于确认过程。作为确认活动的组成，风险评估可以被用来 对仪器的功能或 GMP 风险进行分析，根据分析的结果，可以确定所需要的确认活动和相关 文件。如采用失效模式和效果分析（FMEA）工具, 详细介绍请参见质量体系指南第六

章。



确认SOP

实验室应建立仪器确认的ＳＯＰ，对确认的流程，职责，文件的准备与批准，确认的实 施，偏差处理，再确认作出规定。可以是确认总则，也可以针对不同的仪器设定专用的ＳＯ Ｐ，如天平确认，溶出仪确认，高效色谱仪确认。

对于确认方案，确认报告，用户需求，风险分析制定相应模板，规范确认人员的编写。

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10 实验室分析仪器的校准与维护 实验室控制系统 GMP实施指南

10 实验室分析仪器的校准与维护

本章中涉及以下问题：  哪些实验设备、分析仪器需要校准  分析仪器校准周期、校准项目和接受标准的制定  分析仪器的校准与维护的文件要求 【法规要求】

2010版GMP正文：

第九十三条 应确保生产和检验使用的关键衡器、量具、仪表、记录和控制设备以及仪器经

过校准，所得出的数据准确可靠。

第九十四条 应按照操作规程和校准计划定期对生产和检验用衡器、量具、仪表、记录和控

制设备以及仪器进行校准和检查，并保存相关记录。应特别注意校准的量程范围涵盖实际生 产和检验的使用范围。

第九十五条 应使用标准计量器具进行校准，且所用标准计量器具有可以溯源到国际或国家

标准器具的计量合格证明。校准记录应标明所用标准计量器具的名称、编号、校准有效期和 计量合格证明编号，确保记录的可追溯性。

第九十六条 衡器、量具、仪表、记录和控制的设备以及仪器应有明显的标识，标明其校准

有效期。

第九十七条 超出校准合格标准的衡器、量具、仪表、记录和控制的设备以及仪器不得使用。

第二百二十八条 质量控制实验室应有仪器校准和设备维护的操作规程及记录

下表中列出了美国和欧盟指南中涉及到实验室分析仪器和实验设备校准的文件

机构或组织 文件名称 美国食品药品监督管理局（FDA） Guide to Inspection of Pharmaceutical Quality Control Labs药 物质控实验室检查指南 Guide to Inspection of Microbiological Pharmaceutical Quality Control Labs 微生物药物质控实验室检查指南 世界卫生组织（WHO） WHO Expert Committee on Specifications for Pharmaceutical Preparations Report 40 WHO药品生产专家委员会报告40 PI 023-2 Aide Memoire on Inspection of Quality Control Laboratories QC实验室检查备忘录 药品检查合作组织（PIC/S）

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实验室控制系统 GMP实施指南

10 实验室分析仪器的校准与维护

【背景介绍】

10.1 定义



校准(Calibration)

中国2010版GMP指南中的定义：在规定条件下，为确定一个测量、记录、控制仪器或 系统所指示的量值（尤指称量）或实物量具所代表的量值，与对应的由参照标准所重现的量 值之间关系的一系列活动。

欧盟的 GMP 指南中的附录 18中校准的定义：校准是在适当的量程范围内，与一参比

标准或可追溯标准比较产生的结果证明某一特定的仪器或装置产生的结果在规定的限度范 围内的过程。



维护可以分为预防性维护和非计划性维护（维修）：

预防性维护：按照既定的程序，定期对实验设备或仪器的部件进行检查，清洗，修整， 更换，确保仪器运行的可靠性，消除可能导致实验结果失败的系统性误差，降低仪器在使用 中出现故障的可能。

非计划性维护（维修）：是指仪器使用过程中发生故障，或校准不合格时，需要对其进 行调整，维修或更换相关部件，使仪器功能满足使用要求。



对于实验室分析仪器，一些性能测试，例如HPLC定性、定量的重现性，基线噪音、基

线漂移的测试，UV-VIS波长、透射比准确度和重现性的测试，水分滴定仪的重现性测 试等也可以包含在仪器校准和维护的范畴内。

10.2 应用范围

质量控制实验室（QC）和中间过程 控制实验室(IPC)用于实验分析的设备、分析仪器， 测量仪表都应该进行校准，包括简单的测量仪器如温度计，密度计，熔点仪，和复杂的分析

仪器如 HPLC，TOC等，关键的设备和仪器应有预防性维护计划。

10.3 要求

10.3.1 人员

A. 资质

只有经过培训并授权的人才能进行仪器的操作、校准和维护，相关培训包括：

  

国家或国际计量的相关规则及法规、专业知识和技能的培训 公司内部标准规程的培训 仪器供应商提供的培训

B. 职责

实验室应指定相应的仪器负责人或校准小组，负责按计划安排仪器的校准和维护，确保 校准和维护工作能够及时执行，使仪器始终处于良好的运行状态。

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10 实验室分析仪器的校准与维护

实验室控制系统 GMP实施指南

仪器的使用者应按照仪器的标准操作过程进行仪器分析，在使用前检查仪器是否在校准 有效期内。当仪器发生故障时，应及时通知仪器的负责人。

10.3.2 分类

分析仪器的校准可以分为内部校准和外部校准：

内部校准是指由公司内部人员进行的校准活动，通常由具有资质的工程人员或实验室校 准人员按照公司的标准操作规程执行，并填写相关校准记录或报告。

外部校准是由具有校准资质的外部机构进行的校准，外部机构如国家权威机构：中国计 量研究院，各省市计量院；国外校准机构：瑞士 SGS校准机构，德国DKD和PTB校准机

构；或有资质的仪器生产商的实验室等。外部校准要提供有校准结果和有可追溯性的证书。 它包括了：国家强制检定、参比仪器的校准以及由外部权威机构人员执行的其他校准等。如 有必要，外部校准结果需要由公司校准负责人评估确认后，方可放行使用。

10.3.3 实施指导

实验室应建立总的仪器校准标准规程，规定校准的基本原则，主要内容如下：

       

校准的分类，

校准计划表或仪器校准目录的更新， 校准文件的要求，

标准仪器或标准品的来源和管理， 校准结果的评估， 校准失败的处理， 仪器的校准标识， 人员职责

对于一些简单，不需要专门的操作规程的仪器，比如温度计，卡尺，砝码等，其校准周 期和接受标准也可以描述在此规程中。

对于配置复杂的仪器，应该建立专门的校准标准操作规程，比如高效液相色谱仪，分析 天平，溶出仪等。规程应对校准的项目，校准方法，可接受标准，标准仪器或标准品，校准 周期进行详细的规定。

A. 校准的周期，校准项目和可接受标准的制定

对于国家强制校准的设备、仪器、仪表，应由国家执行部门根据国家计量检定规程进行 校准。

对于非国家强制校准的项目，校准周期和可接受标准应在仪器校准规程中详细规定，并 由校准负责人按规定程序执行。对于配置复杂的仪器，应选择仪器的关键参数进行校准，可 以为不同的模块或校准点设置不同的校准间隔。通常关键参数来源于仪器验证时对仪器功能 和参数的评估。

34

校准的项目和周期还应考虑以下因素：

实验室控制系统 GMP实施指南

10 实验室分析仪器的校准与维护

   

可适用的相关标准和法规 仪器的类别 制造商的推荐

相类似的仪器的历史信息和经验

每一个校准项目，必须有对应的接受标准。接受标准应该根据计量法规、使用需求、药

典或供应商的推荐而定，但必须以满足实验分析的准确度和精密度为依据。

B. 评估和放行

  

校准结果应经过审核或评估，只有校准结果满足接受标准的仪器才能放行使用。 当校准没有在规定的日期前完成，或校准结果不合格时，仪器应有明显的禁止使用标识。 当有下列情况发生时，应及时通知质量部门根据公司的偏差处理程序进行偏差调查，并

对使用该仪器所产生的实验数据进行相应评估：

 

定期校准结果超出接受标准 超出校准期的仪器被使用时

C. 标识

仪器应有明显的校准状态标识，以便仪器使用者检查，比如可以使用不同颜色的标签：



当仪器校准合格，校准报告被批准后，则发放校准合格标签，标签至少应有仪器编号、

此次校准的日期，下次校准日期，签发人签字。 校准合格标签示例（绿色标签）：

校准标签举例 仪器编号： 校准日期： 有效期至： 签发人：



当仪器校准不合格，校准没有在规定的日期前完成，或者仪器需要维修不能使用时，应 有明显的禁止使用标识，表示仪器不能使用。禁止使用标识应有仪器编号、日期和签发 人签字。

禁止使用标签示例（红色标签）：

仪器不可使用

仪器编号:

签字/日期:

35

10 实验室分析仪器的校准与维护

实验室控制系统 GMP实施指南

10.3.4 文件

A. 仪器使用、校准、维护日志

关键的实验设备和分析仪器应建立仪器使用、校准、维护日志，仪器使用、校准和维护 行为都应在日志上记录。日志通常设计成表格，应至少包含以下内容：

     

仪器名称、仪器编号 仪器位置（如适用） 使用/校准/维护日期

工作描述：实验产品，分析项目，或校准或、维护活动的描述 仪器状态 使用人

表 10-1 仪器使用日志示例

仪器名称 位置 日期

工作说明

仪器编号 负责人

仪器状态

使用人

页码：

B. 校准记录和评估报告

内部校准记录或报告：对于由工厂工程师进行的内部校准应设计专用的校准记录或报告， 校准记录或报告应具有可追溯性，一般包括：

     

仪器名称、编号、位置（如适用） 校准记录或报告编号 校准方法或校准操作规程编号 校准数据原始记录

如果原始数据需要计算，也可以将计算公式规定在校准记录中。 校准的接受标准

36

实验室控制系统 GMP实施指南

10 实验室分析仪器的校准与维护



所用标准计量器具名称、编号、校准有效期和计量合格证明编号，或标准溶液的名称， 批号，有效期限，证书编号。也可以将标准仪器计量合格证明或标准溶液的证书作为校 准记录的附件

 

校准结论及再校准日期 校准人和审核人签名

表 10-2 校准记录示例

某公司实验室溶出仪水浴和溶出杯内的温度测试记录

仪器名称 校准记录编号 仪器编号 校准日期 校准方法 下次校准日期

参比仪器名称

型号

序列号

校准结果和要求:

校准证书号

有效期至

对于温度探针

温度（℃）

设定温度 显示温度 测量值

测试结果

符合

不符合 符合 不符合

37.0℃

接受标准：测量值和显示值偏离设定值都不超过 37.0℃±0.2℃。显示值和测量值的差异不能超过 0.2℃。 溶出杯内的测量温度 1 号溶出杯 2 号溶出杯

3 号溶出杯

4 号溶出杯

5号溶出杯

6 号溶出杯 7 号溶出杯

符合 不符合

符合 不符合

符合 不符合

符合 不符合

符合 不符合

符合 不符合

符合 不符合

接受标准：所有的测量值都不能够超过 37.0℃±0.5℃。

校准人 :

日期：

外部校准评估报告

审核人: 日期：

对于由外部机构进行的校准，收到校准证书后，应由校准负责人根据证书评估校准结果 是否符合企业要求，并出具评估报告，评估报告的内容应至少包括：

仪器的名称、编号、位置（如适用） 校准证书编号，校准日期，校准机构名称 评估结果 评估人和审核人签名

37

10 实验室分析仪器的校准与维护

实验室控制系统 GMP实施指南

表 10-3 外部校准评估报告示例 仪器名称 仪器用途 仪器编号 放置地点 使用范围 校准机构

报告编号 制造商 仪器序列号 责任人 校准范围 校准证书编号 企业接受标准 下次校准日期

通过：仪器校准结果符合内部评估要求，可以使用。

未通过：仪器校准结果不符合评估要求，未达到要求前不可使用。

签名： 日期：

校准结果

校准日期 评估结论

评估人

审核人 备注:

仪器的维护

 仪器的维护和校准是紧密联系的，维护程序和校准程序可以规定在同一篇操作规程中。

一般情况，仪器进行预防性维护后，应按预定的规程对相关部件进行校准或其他性能测

试。例如UV-VIS更换紫外灯后，应进行波长、透射比准确度和重现性测试。

当仪器经历重大维修后，应根据对仪器功能的影响程度进行评估，以确定需要进行校准 或再验证的项目。



仪器的维护活动应该被记录在仪器校准、维护日志中。对于比较复杂的仪器可以设计专

用的维护记录表格，维护记录表格可以逐项列出需要检查和要更换的项目，记录维护结 果，维护日期，执行人和复核人签名。

【要点备忘】



实验室应建立仪器的年度校准和维护计划，设定仪器的校准和维护日期，确保按时完成

仪器校准或维护工作。此外，也可以建立仪器目录，将仪器关键信息归纳在目录中，便 于仪器的校准和维护的执行，仪器目录应包括：仪器名称，编号，生产厂商，型号，序 列号，校准状态和日期，下次校准日期，关键仪器的维护信息等。仪器目录应定期更新， 一般为每季度或每半年。



质量控制实验室和中间控制过程实验室所用的计量容器如滴定管、容量瓶、量筒等应由

经过培训并获得资质的分析师或有资质的外部机构依照以下计量规程进行检定：

 中华人民共和国国家计量检定规程JJG 20－2001：标准玻璃量器

38

实验室控制系统 GMP实施指南

10 实验室分析仪器的校准与维护

 中华人民共和国国家计量检定规程JJG 10－2005： 专用玻璃量器



 中华人民共和国国家计量检定规程JJG 196－2006： 常用玻璃量器

实验室应建立仪器档案，便于仪器的管理与追溯，与该仪器相关的的文件和记录可以在 仪器档案中保存，包括仪器的购买信息，供应商资料，使用说明书，使用日志，校准维 护记录等。对于比较简单的仪器，例如秒表，密度计，温度计等，可以按类别建立统一 的档案。仪器档案应标识仪器的名称，唯一编号。



每台仪器应标有仪器编号（投资号或其他编号）。仪器使用、校准和维护日志，仪器档 案，校准报告，检验报告等仪器文件中应使用该仪器编号作为追溯。

只有经过培训的分析师才能进行仪器操作，使用者要确保仪器使用时的状态，检查仪器 是否在校准周期内。

分析仪器经过维护，维修或升级后，在重新投入使用前应进行相应的校准或再验证，以 确认其性能满足使用的要求 仪器报废

实验室应建立仪器设备的报废程序，应考虑以下方面：

 采用一些合适的方法对分析仪器的性能进行确认，如可进行校准，以确认上一

个校准周期所产生数据的有效性。  GMP相关的原始数据的存档和保存时间







 相关仪器档案如校准维护记录的存档和保存时间  更新仪器目录，将报废仪器从仪器目录  有些仪器报废时还需考虑EHS的影响

 公司资产的处置要求

【实例分析】



分析天平

分析天平

称量是分析实验过程中最普遍的操作之一，准确可靠的分析天平是实验室必不可少的仪 器。下面列举了分析天平校准需要考虑的因素：



根据 >JJG 1036-2008 电子天平检定规程< 分析天平至少每年检定一次，主要检定项目：

 天平的偏载误差  天平的重复性  线性误差（示值误差）



许多技术领先的天平生产商提供了具有校准功能的天平，内置自动/手动校准功能和使

用外部标准砝码进行校准。可以定期执行天平的自动/手动校准功能，但不能完全代替 外部性能测试。



美国药典> 41 < 章 规定对于定量分析的称量操作，称量不确定度（随机和系统误差）

不能超过0.1%，例如称量50mg的物质，则误差不能超过0.05mg。

39

10 实验室分析仪器的校准与维护

实验室控制系统 GMP实施指南

 美国药典> 1251 < 章规定为减少天平的准确度随时间的漂移对称量准确度的影响，应

每天对天平用标准砝码进行日检，即每天第一次称量前，分析师称量标准砝码，检查称 量值是否在已制定的限度内。通常根据天平的称量范围选择两个不同重量标准砝码。 下表为某实验室 METTLER AX205 分析天平的校准要求：

METTLER AX205 分析天平 ：可读性：0.00001g ， 称量范围10mg～200g

表 10-4 分析天平校准要求示例

项目 偏载

测试方法

频率 每年

可接受标准

不得超过±0.15mg

(根据国标JJG 1036-2008)

重复性 线性

按图示位置，用100g的标准砝码 进行称量，计算不同位置的示值 误差。

用 200g 的标准砝码称量 6 次， 每年 计算最大示值与最小示值的差 值。

称量标准砝码组：10mg，1g，5g， 每年 20g，100g，200g，计算示值误 差。

不得超过0.15mg

(根据国标JJG 1036-2008)

内置校准功能 天平日检

按使用说明书规定进行

0.01g ≤ M ≤5g: ±0.05mg 5g ＜ M ≤20g: ±0.1mg 20g ＜ M ≤200g: ±0.15mg (根据国标JJG 1036-2008)

1g（E2） 100mg（E2）

每月 每天 -

±0.001g

(根据 USP不确定度 0.1%的要求)

±0.1mg

国家强制检定

JJG 1036-2008

(根据 USP不确定度 0.1%的要求)

每年 符合检定要求

说明：（1）偏载，重复性，线性测试时间与国家检定时间可间隔6个月安排进行，这 样保证天平每半年进行一次该项目测试。

（2）根据天平的精度，METTLER AX205 分析天平的校准和日检应使用E2等级标准 砝码。

天平的使用与维护示例：



环境：天平应放置在稳定、水平、无振动的位置，应避免强风（来自空调或门窗）和过

大的温度波动。保持天平及其周围的干净整洁。



称量前后，分析师应检查天平的清洁，用软毛刷对天平内部进行清洁。如果需要移开天

平的称量托盘进行清洁，则应十分小心的将托盘移走，用软毛刷仔细清洁托盘下部残留 物质，不要用力触碰天平的机械装置，清洁后重新放置托盘后，应稳定几分钟或更长时 间，进行天平日检确认后再使用。

 

称量前，分析师应检查天平的水平，确认水平传感器的气泡是否在内圈中。

每天第一个使用天平的分析师应按上表进行天平日检，检查称量值是否在制定的限度内，

并记录在使用日志上。



每个分析师在使用前应检查使用日志确认天平日检已经被完成，并确认校准标签是否在

检验期内。

40

实验室控制系统 GMP实施指南

10 实验室分析仪器的校准与维护

   

称量物质和称量盅的总重不能超过天平的最大称量范围。

称量被冷藏的物质时，应放置到室温再打开瓶盖进行称量操作，以避免吸潮。 称量结束后，及时用软毛刷对天平进行清洁，清理所使用的称量纸或称量盅。 移动后的校准或检查

天平移动后应使天平稳定到新环境的温度，应至少进行天平日检的检查。根据天平的精

度和移动的程度，可能需要重新进行偏载、重复性和线性误差的检查。



断电后的稳定和检查

通常天平应保持通电状态，如果断电或重新开机应根据天平使用说明书的要求稳定一段 时间（如AX205需要稳定2个小时），并按天平日检程序检查合格后，方可使用。

以下列举出天平称量误差通常的影响因素：

          

天平的防风门未关闭（气流影响度数） 称量物质的重量变化（吸潮） 静电影响（冬天经常发生） 天平和被称量物质的温度不一样 气流影响（没有防风装置） 天平水平未调节好

其他操作造成的震动（影响天平的稳定性） 实验室温度波动

天平移动后没有足够的平衡和稳定 天平断电，重新开机后没有足够的稳定 天平托盘放置不合适，或称量纸接触托盘的周围



高效液相系统校准和维护举例：

以 1100高效液相系统为例介绍HPLC系统的维护与校准：

1100 HPLC 系统包括脱气机，四元泵，自动进样器，柱温箱和检测器5个模块，以及 仪器控制、数据处理系统。液相系统的校准是一系列比较消耗时间测试，通常仪器厂商提供

校准（验证）的软件包，验证结束后用户可以选择哪些项目需要定期校准并确定校准周期及 接受标准。

1100HPLC校准软件包的项目：

41

10 实验室分析仪器的校准与维护

实验室控制系统 GMP实施指南

流速的准确度和精密度 柱温箱温度的准确度 波长准确度（低波段，咖啡因溶液） 波长准确度（高波段，钬玻璃） 基线噪音和基线漂移 进样精密度和 残留

线性测试 梯度测试 某公司 QC实验室选择的校准项目及周期：

表 10-5 HPLC 校准项目及周期示例

校准项目 波长准确度 （低波段，咖啡因溶液） 波长准确度 （高波段，钬玻璃） 基线噪音和基线漂移 线性测试 进样精密度 国家检定 校准周期 6个月 接受标准 2.0nm 6个月 噪音：0.04 mAU 漂移：0.5 mAU /hour R=0.9990 色谱峰面积：1.000% 色谱峰高：2.000% 符合检定规程要求 JJG 705-2002 液相 色谱 仪检定规程 1年 1年 2年

主要项目：泵流速的准确度 与稳定性，定性、定量重复性， 基线噪音，基线漂移，最小检测 浓度，和柱温箱温度的准确度。 说明：进样精密度，流速和柱温箱温度的校准应涵盖实际使用范围。 HPLC 的使用与维护举例



操作SOP 的建立

实验室应建立HPLC系统的操作 SOP，对以下方面进行规定：



流动相的准备

依据分析方法的要求配制流动相，通常流动相需要经过0.45um的滤膜过滤并经超声脱

气



系统运行程序

系统登录：只有经过培训的分析师才有权使用工作站。分析师使用自己的用户名以操作

员级别登录工作站进行造作。只有主管或授权的分析师有权使用管理员级别登录，进行分析 方法的编辑或修改。



分析方法的建立

42

实验室控制系统 GMP实施指南

10 实验室分析仪器的校准与维护

根据使用说明书，描述对进样器，泵，柱温箱，检测器的设置方法，规定方法命名和数 据保存的命名方式。



样品命名和序列表设置

应对样品的命名原则进行规定，对序列表的命名和设置进行规定，例如：

序列 位置 样品名称 进样次数 样品类型 1 1 空白溶液(blank) 1 样品 2 2 系统适用性标准溶液(SST) 1 控制样品 3 3 对照品溶液(CS) n 控制样品 4 4 待测试样品1 n 样品 5 5 待测试样品2 n 样品 ... ... ... ... ...



色谱图的打印的基本要求

 应设计固定的模板供图谱打印使用，模板一般包含以下内容：

 通用信息：数据名称，样品名称，检测项目，检测时间和实验者用户名等  方法名称：数据采集方法和分析方法名称

 液相信息：仪器名称，色谱柱编号，检测波长，进样体积，流速等。  色谱图和积分结果，如需要也包括分离度，对称因子等



实验结束

实验结束后，应使用规定的方法对色谱柱进行冲洗。可以建立专用的清洗程序，设置在 序列表的最后。

为延长紫外灯的寿命，应选择“序列结束后仪器自动关闭” 清洁表面



色谱柱的管理

色谱柱的性能对高效液相色谱分析至关重要，维护并监控柱效有利于分析实验的一致性， 实验室应制定色谱柱的管理和维护要求， 一般包括：

 将色谱编号，制定色谱柱使用日志，记录每次实验的项目，标准品峰值，分离

度，拖尾因子等。  制定色谱柱平衡要求，如对于新的色谱柱，应按照说明书的要求进行平衡。  色谱柱的清洗和保存，如对于手性色谱柱，应该首先用纯化水短时间冲洗随后

用10%的异丙醇冲洗3个小时，并且要保存在2-8度冰箱中。



某公司 HPLC 1100年度预防性维护举例

表 10-6 HPLC 年度预防性维护示例

模块 泵

具体项目 把泵头拆下并清洗 用异丙醇清洗过滤部件，如腐蚀，则



结果 执行人

更换

43

10 实验室分析仪器的校准与维护

实验室控制系统 GMP实施指南

清洗支撑环，如有划痕要更换 取下旧的密封圈，清洗柱塞腔，装上  新的密封圈 如果装有密封圈清洗装置，就更换清 洗密封圈 检查柱塞上的弹簧，如损坏或被腐蚀 就更换 和塑料帽 更换出口球阀上的滤网  更换冲洗阀上的PTFE滤芯、金密封圈 更换入口主动阀上的阀滤芯 清洁废液盘，泄露传感器，如需要则 更换 自动进样器 进行泄露测试 清洁针座，检查针和针座的准值性， 如需要进行校正 检查转子密封圈，如需要则更换  检查定子，如有划痕则更换 更换计量装置柱塞得密封圈 清洁废液盘，泄露传感器，如需要则 更换 柱温箱 检查柱切换阀，如需要则更换转子密 封圈或转子面 清洁废液盘，泄露传感器，如需要则

更换 进行测试 清洁 VWD 检测 进行钬玻璃测试 器 紫外灯能量测试 清洁废液盘，泄露传感器，如需要则 更换 说明：以上维护工作必须由经过培训并授权的分析师进行。维护完成后应进行仪器内部

校准以确保仪器性能。

44

实验室控制系统 GMP实施指南

11 分析方法的验证和确认

11 分析方法的验证和确认

本章中涉及以下问题：  哪些检验项目需要方法验证？  方法验证内容有哪些？如何进行验证？  什么时候需要方法确认？  什么时候需要再验证？  验证文件怎样保存？ 【法规要求】

2010版GMP正文：

第十二条 质量控制的基本要求： （四）检验方法应经过验证或确认； 第二百二十三条 检验

应有物料和不同生产阶段产品的书面检验操作规程，阐述所用方法、仪器和设备。检验结果 应有记录。

1. 企业应确保药品按照注册批准的方法进行全项检验。 2. 符合下列情形之一的，应对检验方法进行验证： (1) 采用新的检验方法；

(2) 检验方法需变更的；

(3) 采用《中华人民共和国药典》及其它法定标准未收载的检验方法；

(4) 法规规定的其它需要验证的检验方法。

3. 对不需要进行验证的检验方法，企业应对检验方法进行确认，以确保检验数据准确、可 靠。

【背景介绍】

除中国药品生产质量管理规范对分析方法验证和确认有明确的要求外，下表所列法规中 均有“分析方法需验证”的要求。

国家，机构或组织 文件名称 美国食品药品监督管理局 Guide to Inspection of Pharmaceutical Quality （FDA） Control Labs（section 15） 药物质量控制实验室检查指南中15 章节

45

11 分析方法的验证和确认

实验室控制系统 GMP实施指南

欧洲共同体药物评审委员 EU Guidelines to 会(EMEA) Good Manufacturing Practice

Medicinal Products for Human and Veterinary Use Part I: Basic Requirements for Medicinal Products， Quality Control

良好的医药和兽药生产质量管理规范，第一部分中的 质量控制

药品检查合作组织 Aide Memoire on Inspection of Quality Control （PIC/S） Laboratories

质量控制实验室检查检查备忘录

Guide to Good Manufacturing Practice for Medicinal Products PART I chapter 6

良好的药品生产质量管理规范，第一部分第六章 加拿大

Good Manufacturing Practice（GMP）Guideline -2009 edition

药品生产质量管理规范指南2009版

下表中列出了国内外针对分析方法验证的相关指南： 机构或组织 美国药典(USP) 文件名称 <1225> VALIDATION OF COMPENDIAL PROCEDURES 方法验证 <1226> VERIFICATION OF COMPENDIAL PROCEDURES 方法确认 人用药品注册技术要求国 Validation Of Analytical Procedures: Text And 际协调会（ICH） Methodology Q2(R1) 分析方法验证：文本以及方法Q2(R1) 中国药典(Ch.P2010) 附录XIX A 药品质量标准分析方法验证指导原则 11.1 分析方法

分析方法是为完成检验项目而设定和建立的测试方法，它详细描述了完成分析检验的每 一步骤。一般包括分析方法原理、仪器及仪器参数、试剂、供试品溶液与对照品溶液的制备， 测定，计算公式及检测限度等。

分析方法可采用化学分析方法和仪器分析方法。这些分析方法各有特点，同一分析方法 可用于不同的检验项目，但验证内容会有不同。例如采用高效液相色谱法用于药品的鉴别和 杂质定量检验应进行不同要求的方法验证。前者重点要求验证专属性，而后者则需要重点验 证专属性、准确度和定量限。

11.2 方法验证

在建立药品质量标准时，分析方法需经验证。

定义：方法验证就是根据检验项目的要求，预先设置一定的验证内容，并通过设计合理 的实验来验证所采用的分析方法是否符合检验项目的要求。

目的：证明采用的分析方法科学、合理，符合检验要求并能有效控制药品的内在质量。

46

实验室控制系统 GMP实施指南

11 分析方法的验证和确认

作用：方法验证在分析方法建立过程中具有重要的作用。只有经过验证的分析方法才可 以可靠有效地用于控制药品质量，因此方法验证是制订质量标准的基础。

11.3 方法确认

在应用已验证的药典方法和其他法定方法前，应在当前的实验室条件下进行方法确认来 证明方法在该实验室的适用性。

11.4 适用范围

适用于：

 

化学药品的物料，中间产品，中间过程控制和产品的理化分析方法的验证和确认. 清洁验证方法的验证

不适用于：

 

化学药品的微生物方法（微生物方法的验证参见第17章）

生物制品分析方法验证

【实施指导】

11.5 方法验证的一般原则

通常情况下，分析方法需进行方法验证。外观、崩解时限、密度、重量、pH 值、硫酸

盐、灰分、装量不需进行方法验证。

方法验证的内容应根据检验项目的要求，结合所采用分析方法的特点确定。 同一分析方法用于不同的检验项目会有不同的验证要求。

11.6 需要验证的检验项目

检验项目是为控制药品质量，保证药品安全有效而设定的测试项目。根据检验项目的设 定目的和验证内容的不同要求，本指导原则将需验证的检验项目分为四类：

   

鉴别试验 杂质的限度检查 杂质的定量测定

含量测定，包括原料药或制剂中有效成分的含量，制剂中其他成分（如防腐剂等）的含

量，溶出度与释放度等检查中的溶出量、和含量均匀度。

除此之外还有一些物理项目的检测如粒径分布、旋光度、熔点和硬度，其要求与其它检 验项目有所不同，通常在进行分析方法验证应有不同的要求。

鉴别的目的在于判定被分析物是目标化合物，而非其它物质。用于鉴别的分析方法要求 具有较强的专属性和耐用性。

47

11 分析方法的验证和确认

实验室控制系统 GMP实施指南

杂质检查主要用于控制主成分以外的杂质，如无机杂质，有机杂质等。杂质检查分为限 度检查和定量测定两部分。用于限度检查的分析方法验证侧重专属性、检测限和耐用性。用 于定量测定的分析方法验证强调专属性、准确度、精密度、线性、范围、定量限和耐用性。

含量测定对准确度要求较高，因此所采用的分析方法要求具有一定的专属性、准确度和 线性等要求。

中国药典2010 版中规定了不同的检验项目需要验证不同的内容，详见表1。

表 11-1 检验项目和验证内容

检验项目

验证内容

鉴别 否

重复性 否

精密度 中间

否

精密度

杂质测定 定量 是 是 是* 是 是*** 是 是 是 是

否 否 否 是 是 否 否 否 是

含量/含 量均匀度/溶

限度 出量

是 是 是* 是 否 否 是 是 是

准 确 度

专 属 性

**

是 否 否 否 否 是

检 测 限 定 量 限 线性 范围 耐 用 性

备注：

1. *: 已有重现性验证，不需验证中间精密度；

2. **:如一种方法不够专属，可由其它分析方法予以补充。 3. ***:视具体情况予以验证。 4.‘是’代表该项内容需要验证，‘否’代表该项内容不需要验证

有关欧盟，世界卫生组织，美国药典，ICH 和中国药典2010版对方法验证的要求详见

下表。

表 11-2 方法验证对比表

证 目 C 密 度 确 度 48

杂质 鉴别试验 含量测定 定量测定 限度检查 H S CH R R R R R R T T T R R R R R R P C H S CH P C H S CH P C R H R S CH P R R R R 实验室控制系统 GMP实施指南

11 分析方法的验证和确认

属 R R R R R 性 测 限 量 限 性 围

R

R R R R R R R R R R R R R R

R T T R R R R R

R R R R R R R R

R R R R R R T

R R R R R R R R R R

用 R R R R R R R R R R R R R R R 性

R=必须验证的参数，T=可视具体检测而定的参数

EC: 分析方法验证，参照指南，III，844/87，最终版，1989年8月（欧洲） WH: 分析方法验证被用于药物原料的测定中，WHO技术报告系列，1992 US : 美国药典 USP <1225> ICH: 分析方法验证Q2(R1) CP 中国药典2010 版

11.7 方法验证内容

本章节内容除特殊标注外，主要依据中国药典2010附录XIX A 药品质量标准分析方法

验证指导原则。

11.7.1 准确度

准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度。一般用回收率表示。准 确度应在规定的范围内测试。

A. 验证方法

准确度应在规定的范围内建立，至少用9个测定结果进行评价。例如，设计3个不同浓

度，每个浓度各分别制备 3份供试品溶液，进行测定。应报告已知加入量的回收率（％）或 测定结果平均值与真实值之差及其相对标准偏差或可信限。

准确度是定量测定的必要条件，因此含量测定、杂质定量测定均需验证准确度。原料药 与制剂所用的具体方法详见下表。

表 11-3 准确度方法验证示例

检验项目 原料药 制剂 备注

49

11 分析方法的验证和确认

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含量测定

方法1：用已知纯 度的对照品或供 试品进行测定。 方法2：用本法所 得结果与已知准 确度的另一方法 测定的结果进行 比较

杂质的定量 测定

方法 1：用含已知 量被测物的各组分混 合物进行测定。 方法 2：如不能得到制 剂的全部组分，可向制 剂中加入已知量的被 测物进行测定。 方法 3：用本法所得结 果与已知准确度的另 一方法测定的结果进 行比较。

方法1：可向原料药或制剂中加入已 知量杂质进行测定。

方法2：如果不能得到杂质或降解产物， 可用本法测定结果与另一成熟的方法进行 比较，如药典方法或经过验证的方法。

如该分析方法已经测试 并求出精密度、线性和 专属性，在准确度也可 推算的情况下，准确度 可不必再做。

在不能测得杂质或降解 产物的响应因子或不能 测得对原料药的相对响 应因子的情况下，可用 原料药的响应因子。应 明确单个杂质和杂质总 量相当于主成分的重量 比（％）或面积比（％）。

例如：测定含量的准确度, 按标示量的80%, 100%和120%配制三个浓度的溶液，每个

浓度各分别制备 3份供试品溶液，进行测定。根据测定结果与配制浓度计算出平均回收率以

及相对标准偏差。

B. 数据要求

需报告已知加入量的回收率（％），或测定结果平均值与真实值之差及其相对标准偏差 或可信限。

11.7.2 精密度

精密度系指在规定的测试条件下，同一均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接

近程度。 精密度一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。

精密度与准确度不同，下图形象地描绘了精密度和准确度之间的差别（A=准确度，P= 精密度）。精密度测定了一系列重复性的被分析物之间的接近程度，但它不能表达与已建立 的真值之间的符合程度，后者由准确度来测定。通过一系列的测定值，可以得到良好的精密 度，但是由于所用分析方法存在的偏差，所得的平均值不一定与真实值（请看图中左下角的 较低的打靶环数）相符，在这种状况下，需要修改方法以消除偏差。

50

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11 分析方法的验证和确认

图 11-1 精密度与准确度关系图

A. 验证方法

精密度可从重复性、中间精密度、重现性三个层次考察。详见下表。

表 11-4 精密度验证方法

名 称 定义 在相同条件下，由同一个分析 人员测定所得结果的精密度称 为重复性。 验证方法 在规定范围内，至少用9次测定结果进行评 价。例如，设计3个不同浓度，每个浓度各 分别制备3份供试品溶液，进行测定3次， 或将相当于100％的浓度水平的供试品溶 液，用至少测定6次的结果进行评价。 重复性 中间精密度 在同一个实验室，不同时间由 不同分析人员用不同设备测定 结果之间的精密度，称为中间 精密度。 在不同实验室之间由不同分析 人员测定结果之间的精密度， 称为重现性。 为考察随机变动因素对精密度的影响，应设 计方案进行中间精密度试验。变动因素为不 同日期、不同分析人员、不同设备。 法定标准采用的分析方法或在不同实验室 之间进行方法转移时 ，应进行重现性试验。例如建立药典分析方 法时，通过协同检验得出重现性结果。协同 检验的目的、过程和重现性结果均应记载在 起草说明中，应注意重现性试验用的样品本 身的质量均匀性和贮存运输中的环境影响 因素，以免影响重现性结果。 重现性

表 11-5 中间精密度的设计方案

实 验 日 期 分析人员 仪 器 色 谱 柱 1 1 A M T 2 2 B N U 3 3 A N U 4 4 B M T 5 5 A M U 6 6 B N T

51

11 分析方法的验证和确认

实验室控制系统 GMP实施指南

B. 数据要求

均应报告标准偏差、相对标准偏差和可信限。

11.7.3 专属性

专属性系指在其他成分(如：杂质、降解产物、辅料等)可能存在下，采用的方法能正确 测定出被测物的特性。

通常, 鉴别反应、杂质检查、含量测定均应考察其专属性。如一种方法不够专属，可由 其它分析方法予以补充。例如检测具有旋光特性的活性物质, 除采用非手性薄层色谱法或高

效液相色谱法外,还应增加旋光度的检查。

A. 验证方法

表 11-5 专属性方法验证

检验 项目 鉴别试验 概述 鉴别试验用于 确认被测成分 符合其特征。 验证方法 专属性要求证明其能与可能共存的物质或结构 相似化合物区分。 含被测成分的供试品呈正反应， 而不含被测成分的供试品以及结构相似或组分 中的有关化合物，应均呈负反应。 方法1：在杂质可获得的情况下，可向试样 中加入一定量的杂质，考察杂质与共存物质能得 到分离和检出，并具有适当的准确度与精密度。 方法2：在杂质或降解产物不能获得的情况下， 专属性可通过测定含有杂质或降解产物的试样， 与另一个已验证的方法或药典方法比较结果。或 对试样用强光照射，高温，高湿，酸（碱）水解 或氧化的方法进行加速破坏，以研究可能的降解 产物和降解途径，并比对破坏前后检出的杂质个 数。必要时可采用二极管阵列检测和质谱检测， 进行峰纯度检查。 备注 对于药品，辅 料不得干扰 其有效成分 的鉴别。 杂质测定 （包括限 度检查和 定量测定） 作为纯度检查， 所采用的分析 方法应确保可 检出被分析物 中杂质的含量 测定，如有关物 质、重金属、有 机溶剂等。因此 杂质检查要求 分析方法有一 定的专属性。 色谱法和其 他分离方法， 应附代表性 图谱，以说明 方法的专属 性，并应标明 诸成分在图 中的位置，色 谱法的分离 度应符合要 求。 含量测定 含量测定的目 的是得到试样 中被分析物的 含量测定或效 价的准确结果。 方法1：在杂质可获得的情况下，可向试样 中加入杂质或辅料，考察测定结果是否受干扰， 并可与未加杂质和辅料的试样比较测定结果。 方法2：在杂质或降解产物不能获得的情况下， 专属性可通过测定含有杂质或降解产物的试样， 与另一个已验证的方法或药典方法比较结果。或 对试样用强光照射，高温，高湿，酸（碱）水解 或氧化的方法进行加速破坏，用两种方法进行含 量测定，比较测定结果。必要时可采用二极管阵 列检测和质谱检测进行峰纯度检查，证明含量测 定成分的色谱峰中不包含其他成分。

52

实验室控制系统 GMP实施指南

11 分析方法的验证和确认

11.7.4 检测限（LOD）

检测限系指试样中的被分析物能够被检测出的最低量。

药品的杂质测定，应通过测试确定方法的检测限。

A. 验证方法

表 11-6 杂质测定检测限验证方法

检验项目 验证方法 方法1 ：非仪器分析目视法 用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。 方法2 ：信噪比法 用于能显示基线噪音的分析方法，即把已知低浓度试样测出的信号与空 白样品测出的信号进行比较，计算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。 一般以信噪比为3：1或2：1时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。

除信噪比法外，ICHQ2 R1中还介绍了根据响应因子的标准偏差和斜率计算出检测限的方法 LOQ= 3.3 s

S

s = 响应因子的标准偏差

S = 校正曲线的斜率

斜率S根据分析物的校正曲线评估而来，响应因子 s可采用不同方法获得，如：

（1） 根据空白溶液的标准偏差

测定分析背景的响应就是通过分析适量空白溶液并计算其响应值的标准偏差 （2） 根据校正曲线

用样品建立校正曲线，其中含有检测限范围的分析物，其回归线的剩余标准偏差或或回 归线截距的标准偏差作为标准偏差.

B. 数据要求

应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。

11.7.5 定量限（LOQ）

定量限系指试样中的被分析物能够被定量测定的最低量，其测定结果应具有一定的准确 度和精密度。

杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定方法的定量限。

A. 验证方法

表 11-7 杂质定量测定验证方法

检验项目 验证方法 53

11 分析方法的验证和确认 实验室控制系统 GMP实施指南

杂质定量测定 方法： LOQ = 10 s

S

s = 响应因子的标准偏差 S = 校正曲线的斜率

斜率S根据分析物的校正曲线评估而来，响应因子 s可采用不同方法获得，如：

信噪比法：一般以信噪比为10：1时相应浓度或注入仪器的量确 定检测限。

除信噪比法外，ICHQ2 R1中还介绍了根据响应因子的标准偏差和斜率计算出定量限的

（1） 根据空白溶液的标准偏差

测定分析背景的响应就是通过分析适量空白溶液并计算其响应值的标准偏差 （2） 根据校正曲线

用样品建立校正曲线，其中含定量限范围的分析物，其回归线的剩余标准偏差或或回归 线截距的标准偏差作为标准偏差.

11.7.6 线性

线性系指在设计的测定范围内，检测结果与试样中被测物的浓度直接呈正比关系的程度。 线性是定量测定的基础，涉及定量测定的项目，如杂质定量测定和含量测定均需验证线 性。

A. 验证方法

应在设计的测定范围内测定线性关系。可用一贮备液经精密稀释，或分别精密称样，制 备一系列供试样品的方法进行测定，至少制备5个浓度的供试样品。每一个浓度的样品3 份，以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性，用最小二乘法进行线

性回归。必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。

不同分析方法的线性验证和准确度验证需涵盖的最低浓度范围,见表11-8。

表 11-8 线性验证和准确度验证需涵盖的最低浓度范围

检验项目 含量测定 含量均匀度 溶出度或释放 度的溶出量测 定 杂质的定量测 需涵盖的最低浓度范围 至少标示量的80 - 120% (ICH) , 推荐包含50%-150%的浓度 至少标示量的70 - 130% (ICH) , 推荐包含50%-150%的浓度， 根据剂型特点，如气雾剂和喷雾剂，范围可适当放宽。 限度的± 20%。 a. 对于具有不同剂量的同种药品, 但测试溶液浓 度一样的前提下，只需进行一个剂量的线性试验(应涵盖 限度的± 20%) , 该试验即可用于该种药品的所有剂量。 b. 如规定了限度范围，则应为下限的-20%至上限 的+20%。 例如: 缓释制剂的标准是1小时20%，24小时后 增到90%，那么验证范围应为标示量的0-110%。 范围应根据初步实测，拟订为规定限度的± 20%。 54

实验室控制系统 GMP实施指南

11 分析方法的验证和确认

定 如果含量测定与杂质检查同时进行，用百分归一化法，则范围应 为杂质规定限度的-20%至含量限度（或上限）的+20%。推荐包含 LOQ － 规定限度的＋20%。 B. 数据要求

应列出回归方程、相关系数和线性图。

11.7.7 范围

范围系指能够达到一定的精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区 间。

范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果和要求确定，要求见线性 内容章节。

11.7.8 耐用性

耐用性系指测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度,为使方法可用于常

规检验提供依据。

开始研究分析方法时，就应考虑其耐用性。经试验，应说明小的变动能否符合系统适用 性试验要求，以确保方法有效。如果通过耐用性研究发现分析方法对某个或某些测试条件敏 感或要求苛刻，则建议在方法中予以写明。

表 11-9 方法耐用性影响因素示例

典型影响耐用性的变动因素 1. 被测溶液的稳定性 2. 样品的提取次数,时间等. 1.流动相的组成 2. 流动相的pH值 3. 不同品牌或不同批号的同类型色谱柱 4. 柱温 5. 流速 6．其他 1.不同品牌或不同批号的同类型色谱柱 2. 固定相 3. 不同类型的载体 4. 柱温 5. 进样口和检测器温度 6．其他 液相色谱法(HPLC)中的典型 影响耐用性的变动因素 气相色谱法(GC)中的典型影 响耐用性的变动因素

【实例分析】



HPLC含量方法耐用性考虑因素

下表列出了在评估HPLC含量方法耐用性中部分需考虑的因素及变化范围, 仅供参考，

实际变化范围可依据使用条件设计

55

11 分析方法的验证和确认

实验室控制系统 GMP实施指南

表 11-10 HPLC 含量方法耐用性考虑因素及变化范围示例

HPLC中的变动因素 变化范围 有机相的± 5%, 例如方法规定流动相缓冲溶液与甲醇的比例为45:55, 那么允许使用 40:60 至 50:50范围的比例. 流动相的组成 流动相的pH值 ±0.5, 如果已知pH值为关键影响因素, 变化范围会更 小。 色谱柱 柱温 溶液的稳定性研究 如可能，推荐使用同一品牌的填料可由不同供应商填充 的色谱柱。可通过回顾实验分析次数或方法研究确定色 谱柱的质量。 ±5oC  溶液的稳定性研究用来证明根据相应方法制备的样品溶液和标准品溶液在规定的储存 条件下在一定时间内保持稳定。如果方法中没有规定有效期，样品溶液和标准品溶液需进行 稳定性研究。

样品溶液和标准品溶液依据方法进行配制和分析。在室温或其他条件下（如冰箱 2-8° C ）条件下储存适当的时间。每个间隔点，用新鲜配制的标准品溶液做对照，测定储存的 样品溶液和标准品溶液。测定结果与初始结果进行比较，符合接受标准便可确认样品溶液和 标准品溶液在规定的储存条件下在规定储存时间是稳定的。



分析方法验证接收标准

下表为某制药公司分析方法验证的接受标准，仅供参考。

表 11-11 分析方法验证接受标准示例

检验项目 鉴别试验 (HPLC, TLC, GC) 鉴别试验 (IR/UV) 溶出度(6) (DR) 验证内容 专属性 专属性 精密度/重复性, n ≥ 6 中间精密度 专属性 接受标准 色谱峰/斑点分离 与标准物质响应相同，能清晰的与相似物 质区分 Srel ≤ 2.0% 方案中具体规定 色谱法: 色谱峰分离 UV: UV特征光谱 空白片的影响≤ 3.0% 线性 - 相关系数 -截距(1) - 剩余标准偏差 范围(篮法/桨法) 56 n ≥ 6 r ≥ 0.990 ≤ 5%(2) ≤ 2.5%(2) - 低于标准的20% 到标示量的120% 实验室控制系统 GMP实施指南

11 分析方法的验证和确认

准确度 (平均值) - 回收率 - 回收率的Srel 标示量的95 - 105% ≤ 2.5% 在规定时间内变化≤ 2.0% 稳定性 - 样品溶液 - 对照溶液 含量 ( HPLC, GC, UV) 精密度/重复性, n ≥ 6 中间精密度, n ≥ 4 专属性 Srel ≤ 2.0% (原料≤ 1.0% ) Srel ≤ 2.0%, n ≥ 4 色谱峰基线分离，无干扰 UV: UV特征光谱 峰纯度(如认为需要) 线性 - 相关系数 - 截距(1) - 剩余标准偏差 范围 准确度 制剂: - 回收率 (平均值) (n=9, 3 个浓度，每个浓 度三份样品) - 回收率的Srel (n ≥ 9, 至少3 个浓度， (5)) 稳定性 空白片的影响≤ 3.0%. 证明含量测定成分的色谱峰中不包含其 他成分。参见准确度 r ≥ 0.998 ≤ 2.0%(3) ≤ 2.0%(3) 至少标示量（100% 溶液）的80 - 120% 98.0 - 102.0% Srel ≤ 2.0% 规定时间内变化≤ 2.0% 方法通过系统适用性实验 Srel ≤ 2.0% Srel ≤ 3.0% 色谱峰基线分离，无干扰 UV: UV特征光谱 - 样品溶液 - 对照溶液 耐用性 含量均匀度 精密度/重复性, n ≥ 6 中间精密度, n ≥ 4 专属性 空白片 的影响≤ 3.0%. 线性 - 相关系数 -截距 (1)

r ≥ 0.990

≤ 5.0%

57

(3)

11 分析方法的验证和确认

实验室控制系统 GMP实施指南

- 剩余标准偏差

范围 准确度 滤芯的验证 稳定性 - 样品溶液 - 对照溶液 杂质的定量测定 (副产品/降解产 物，对映结构 体, ... ) ≤ 2.0%

(3)至少标示量的70 -130% 参见含量 ≤ 2.0% 未过滤（离心）和过滤 规定时间内变化量（change over）≤ 2.0% 精密度/重复性, n ≥ 6 限度 < 0.1%, srel ≤ 30% 0.1 ≤ 限度 < 0.2%, srel ≤ 20% 0.2 ≤ 限度 < 0.5%, srel≤ 10% 0.5 ≤ 限度 < 5%, srel ≤ 5.0% 限度 ≥ 5%, srel ≤ 2.5% 精密度/ 中间精密度 限度<0.1%, srel ≤40% 0.1 ≤ 限度<0.2%, srel ≤30% 0.2 ≤ 限度<0.5%, srel ≤15% 0.5 ≤ 限度<5%, srel ≤7.5% 限度 ≥5%, srel ≤4.0% 专属性 峰纯度 (如认为需要) 线性 - 相关系数 -截距(1) - 剩余标准偏差 色谱峰基线分离，无干扰 证明含量测定成分的色谱峰中不包含其 他成分。 制剂, r ≥ 0.990 原料, r ≥ 0.998 ≤ 25%(4) 限度 < 0.5%, srel ≤ 10%(4) 0.5 ≤ 限度 < 5%, srel ≤ 5.0%(4) 限度 ≥ 5%: ≤ 2.5%(4) 范围 检测限 定量限 报告限 / LOQ 到 标准的120% 信噪比≥ 3:1 Srel ≤ 20%, n ≥ 5 信噪比≥ 10:1 Srel ≤ 10%, n ≥ 5 准确度 -回收率 (平均值) 限度 < 0.5%: 80-120% (n=9, 3 个浓度，每个浓度 0.5% ≤ 限度 < 5% : 90-110% 三份样品) 58

限度 ≥5% : 95-105% -回收率 的Srel 限度 < 0.5% : ≤10% 实验室控制系统 GMP实施指南

11 分析方法的验证和确认

(n ≥ 9, 至少3 个浓度)

0.5% ≤ 限度 < 5%: ≤5.0%

限度 ≥ 5% : ≤2.5%

稳定性 -样品溶液

限度 < 0.5%: change ≤ 20% 0.5% ≤ 限度 ≤ 5%: change ≤ 10% 限度 ≥ 5%: change ≤ 5% 没有新的色谱峰出现。 >

储存期变化 ≤ 5%

截距的绝对值 (2) 指回归线的y值对应于完全溶出(x=100%)时的浓度 (3) 指回归线的y值对应于标示量(x=100%)时的浓度 (4) 指回归线的y值对应于允许限度(杂质的标准)时的浓度 (5) 3个浓度，每个测3次。

(1)

-对照溶液



在 FDA 质量控制实验室检查指南“15.方法验证”中指出许多含量和杂质的方法采用高 效液相色谱法, 对于这些方法的精密度的要求希望小于或等于系统适应性试验的相对 标准偏差.

在美国药典<621> 色谱法中对系统适应性试验的相对标准偏差有如下规定:

“对用于含量测定的标准溶液或其他标准溶液重复进样分析，比较其结果来确认精密度 是否符合要求。连续进样5次，除在方法中已明确规定外，其峰面积测量值的相对标准偏差 应不大于2.0%。 如果5针的相对标准偏差大于2.0%，可连续进样6次，其峰面积测量值

的相对标准偏差应不大于 2.0%。”

11.8 方法确认

适用于药典方法和其他已验证的法定标准。因为药典方法和其他法定标准被认为是验证 过的分析方法，不需要验证，但需要通过方法确认来证明方法在该实验室条件下的适应性。

不适用于：实验室日常测试操作步骤不需要进行方法确认，例如（包括但不限于）干燥 失重，炽灼残渣，各种湿法化学步骤如酸值和简单的仪器方法如PH计，除非有特殊要求。

11.9 方法再验证

在某些情况下，如原料药合成工艺改变、制剂处方改变、分析方法发生部分改变等，均 有必要对分析方法再次进行部分或完整的再验证，以保证分析方法可靠。

当原料药合成工艺发生改变时，可能引入新的杂质，杂质检查方法和含量测定方法的专 属性就需要再进行验证，以证明有关物质检查方法能够检测新引入的杂质，且新引入的杂质 对主成份的含量测定应无干扰。

当制剂的处方组成改变、辅料变更时，可能会影响鉴别的专属性、溶出度和含量测定的 准确度，因此需要对鉴别、含量测定方法再验证。当原料药产地来源发生变更时，可能会影 响杂质检查和含量测定的专属性和准确度，因此需要对杂质检查方法和含量测定方法进行再 验证。

59

11 分析方法的验证和确认

实验室控制系统 GMP实施指南

当质量标准中某一项目分析方法发生部分改变时，如采用高效液相色谱法测定含量时， 检测波长发生改变，则需要重新进行检测限、专属性、准确度、精密度、线性等内容的验证， 证明修订后分析方法的合理性、可行性。

再验证原则：根据改变的程度进行相应的再验证。 当这种改变到达一定程度时，则需 要完整的验证。如分析方法完全改变时，则应视为新方法并需要完整的验证。方法再验证是 对分析方法的完善过程，应根据实际改变情况进行再验证，从而保证所采用的分析方法能够 控制药品的内在质量。

11.10 文件管理

 

必须制订方法验证和确认的标准操作规程。

在开始验证分析方法之前，必须依据操作规程起草一个验证方案。对于方案存在的需求，

有两个重要的原因：其一是要被执行的程序在方案中能够详细地描述，其二是每个被测 参数的接受标准能被具体地规定。



进行方法验证或确认前，应确认如下条件已符合

 从事分析方法验证或确认的分析师是合格的分析师。  所用分析仪器已通过验证和校验。  实验必须依据批准的方案进行。

 实验过程中任何失败的测试，过程中的偏差或异常均需复核和评估并查出原因。

过程中的偏差或异常需通过正式的体系（如调查报告，验证或确认报告中偏差 的鉴定和批准 ）进行记录和批准.



验证的结果应以报告的方式给出，它包括了某一产品所有方法的验证， 这与方法描述

的要求一致。作为一种可供选择的方法，可以将测试规程与分析方法验证部分附在一起， 这样做的优点是相关的文件总是和分析方法在一起。

【实例分析】



以下为某制药公司分析方法验证/确认的文件管理流程，仅供参考

60

实验室控制系统 GMP实施指南

11 分析方法的验证和确认

（1）分析方法验证或确认的方案

对于分析方法的验证或确认，应制订方案并由相关人员批准后方可进行。验证或确认方案通常含有以下信息

 唯一的方案号.

 分析方法的版本号以及物料/产品的名称:  验证或确认的实验项目  验证或确认的原则和目的  验证或确认的参数以及接受标准

 验证或确认实验中所用标准品，检验样品信息  分析仪器的相关信息

 所用仪器的信息，如已确认的情况下  方案起草者，复核人和批准者需签字确认

61

11 分析方法的验证和确认

实验室控制系统 GMP实施指南

（2）方法验证或确认的执行

进行方法验证或确认前，应确认如下条件已符合

 从事分析方法验证或确认的分析师是合格的分析师。  所用分析仪器已通过验证和校验。  实验必须依据批准的方案进行。

 实验过程中任何失败的测试，过程中的偏差或异常均需复核和评估并查出原因。

过程中的偏差或异常需通过正式的体系（如调查报告，验证或确认报告中偏差 的鉴定和批准 ）进行记录和批准.

（3）报告的起草与批准

分析方法验证或确认结束后，需起草报告相关人员批准。报告中通常含有如下信息：

 唯一的报告号.  相关方案号

 分析方法的版本号以及物料/产品的名称:  验证或确认的实验项目

 验证或确认实验中所用标准品，检验样品以及分析仪器的相关信息  结果汇总，并与方案中规定的接收标准进行评估  偏离方案的偏差汇总及处理结论

 结论，需对方法验证或确认是否成功进行正式描述。  报告起草者，复核人和批准者需签字确认

（4）分析方法验证或确认的方案与报告的存档

方案与报告均集中存档，并长期保存



FDA关于分析方法验证内容设置不合理的警告信

例：据统计，FDA发给中国企业的警告信涉及到分析方法验证和清洁验证。其中最多 的是分析方法验证，尤以验证内容设置不合理和缺少最为常见。 例如：2000年FDA发给

中国一企业的警告信：

........

2. 用于稳定性检测的分析方法不指示稳定性。另外，没有确立xx的杂质框架。

我们的检查显示你们公司在使用的检测 xx的USP 滴定法不是一个稳定性指示的方法。

另外，你们公司没有确立这个 API的杂质框架。

在你们的答复中，你们制定和验证了一个指示稳定性的xx的分析方法，它将包括强制

降解研究。请在这封警告信的答复中提交分析方法验证和你们降解研究的结果的拷贝件。 我们注意到你们的答复仍然没有解决xx杂质谱确立的问题。FDA希望生产厂家确立每 个API的杂质谱，说明用控制工艺生产的典型批次中出现的鉴定杂质和未鉴定杂质。杂质

62

实验室控制系统 GMP实施指南

11 分析方法的验证和确认

谱架包括鉴定或者定性分析界定（如保留时间）、可检测到杂质的范围和每个鉴定杂质的分 类（如，无机、有机或溶剂）。杂质的框架应该在适当的间隔与历史数据进行对比，以发现 因原料、设备运行参数或者生产工艺的改变引起的API 的变化。请在这封警报信的答复中

解决这个问题。

【要

点备忘】

 在进行方法验证或确认前，应已建立分析方法。  分析方法应经验证或确认。

 分析方法验证或确认的方案与报告应长期保存。



分析方法在实际使用过程中，应与验证或确认报告中确定的内容一致。

63

12 稳定性实验 实验室控制系统 GMP实施指南

12 稳定性实验

本章中涉及以下问题：  为什么需要进行稳定性试验?  存在什么样的稳定性试验?  运输条件是如何确定的?  怎样的程序和特殊要求是需要特别加以考虑的（指南）?  文件的要求是什么?  如何降低成本，以及在哪些领域能降低成本?  数据应该如何评估 (推测)?  如何处理稳定性试验的超标及超出趋势结果？ 【法规要求】

2010版GMP正文：

第三节 持续稳定性考察

第一条 应进行适当的持续稳定性考察，监控已上市药品的稳定性，以发现市售包装药品与

生产相关的任何稳定性问题（如杂质含量或溶出度特性的变化）。

第二条 持续稳定性考察的目的是在有效期内监控药品质量，并确定药品可以或预期可以在

标示的贮存条件下，符合质量标准的各项要求。

第三条 持续稳定性考察主要针对市售包装药品，但也需兼顾待包装产品。例如，当待包装

产品在完成包装前，或从生产厂运输到包装厂，还需要长期储存时，应在相应的环境条件下， 评估其对包装后产品稳定性的影响。此外，还应考虑对储存时间较长的中间产品进行考察。 第四条 持续稳定性考察应有考察方案，结果应有报告。用于持续稳定性考察的设备（尤其

是稳定性试验设备或设施）应按照第七章和第五章的要求进行确认和维护。 第五条 考察方案应涵盖药品有效期，应至少包括以下内容：

（一） 每种规格、每种生产批量药品的考察批次；

（二） 相关的物理、化学、微生物和生物学检验方法，可考虑采用稳定性考察专属的检验 方法；

（三） 检验方法依据； （四） 合格标准；

（五） 容器密封系统的描述； （六） 试验间隔时间（测试时间点）；

（七） 贮存条件（应采用与药品标示贮存条件相对应的《中华人民共和国药典》长期稳定

64

实验室控制系统 GMP实施指南

12 稳定性实验

性试验的标准条件）；

（八） 检验项目，如检验项目少于成品质量标准所包含的项目，应说明理由。 第六条 考察批次数和检验频率应能获得足够的数据，以供趋势分析。通常情况下，每种规

格、每种内包装形式的药品，至少每年应考察一个批次，除非当年没有生产。

第七条 某些情况下，持续稳定性考察中应额外增加批次，如重大变更或生产和包装有重大 偏差的药品应列入稳定性考察。此外，任何采用非常规工艺重新加工、返工、或有回收操作

的批次，也应考虑列入考察，除非已经过验证和稳定性考察。

第八条 关键人员，尤其是质量受权人，应了解持续稳定性考察的结果。当持续稳定性考察

不在待包装产品和成品的生产企业进行时，则相关各方之间应有书面协议。生产企业应保存 持续稳定性考察的结果以供药品监督管理部门审查。

第九条 应对不符合质量标准的结果或重要的异常趋势进行调查。任何已确认的不符合质量

标准的结果或重大不良趋势，都应向当地药品监督管理部门报告；企业还应考虑是否可能对 已上市药品造成影响，必要时应实施召回。

第十条 应根据所获得的全部数据资料，包括考察的阶段性结论，撰写总结报告并保存。应

定期审核总结报告。

除中国药品生产质量管理规范对稳定性试验有明确的要求外，下表所列法规中均有对此 部分的要求。

国家，机构或组织 美国食品药品监督管理局

（FDA） 欧洲共同体药物评审委员会

(EMEA)

WHO 国家药品监督管理局 中华人民共和国国务院

文件名称

Guide to Inspection of Pharmaceutical Quality Control Labs（section 15）

药物质量控制实验室检查指南中 19 章节

EU Guidelines to Good Manufacturing Practice Medicinal Products for Human and Veterinary Use Part I: Basic Requirements for Medicinal Products， Quality Control EU GMP第一部分中的质量控制

Quality assurance of pharmaceuticals, A compendium of guidelines and related materials volume 2, Chapter 17

《药品注册管理办法》

《中华人民共和国药品管理法实施条例》

Health products and food

Good manufacturing practices (GMP) guidelines-2009 GUI-0001 branch inspectorate

Canada

Aide Memoire on Inspection of Quality Control Laboratories 药品检查合作组织 质量控制实验室检查检查备忘录

（PIC/S）

Guide to Good Manufacturing Practice for Medicinal Products

65

下表中列出了国内外针对稳定性试验的相关指南：

机构或组织

文件名称

12 稳定性实验

实验室控制系统 GMP实施指南

人用药品注册技术要求国际 协调会（ICH） Q1A(R2)Stability Testing of New Drug Substances and Products 新原 料药和制剂的稳定性试验

Q1B Stability Testing: Photostability Testing of New Drug Substances and Product 新原料药和制剂的光稳定性试验

Q1C Stability Testing for New Dosage Forms Annex to the ICH Harmonised Tripartite Guideline on Stability Testing for New Drugs and Products 新剂型的稳定性试验

Q1D Bracketing and Matrixing Designs for Stability Testing of New Drug Substances and Products 括号法和矩阵法

Q1E Evaluation for Stability Data 稳定性数据的评价

Q1F Stability Data Package for Registration Applications in Climatic Zones III and IV 气候带 III和 IV

[化学药物稳定性研究技术指 导原则]课题组 中国药典(Ch.P2010) USP 美国药典

化学药物稳定性研究技术指导原则 [H]-GPH6-1 附录 XIX C 原料药与药物制剂稳定性试验指导原则 PHARMACEUTICAL STABILITY<1150>

12.1 定义

药品的稳定性是指原料药及其制剂保持其物理、化学、生物学和微生物学性质的能力。 稳定型试验的目的是考察原料药、中间产品或制剂的性质在温度、湿度、光线等条件的影响 下随时间变化的规律，为药品的生产、包装、贮存、运输条件和有效期的确定提供科学依据， 以保障临床用药的安全有效。并且通过持续稳定性考察可以监测在有效期内药品的质量，并 确定药品可以或预期可以在标示的贮存条件下，符合质量标准的各项要求。

12.2 应用范围

稳定性研究是药品质量控制研究的主要内容之一，与药品质量研究和质量标准的建立紧 密相关。其具有阶段性特点，贯穿原料药（API），制剂产品及中间产物的药品研究与开发 的全过程，一般始于药品的临床前研究，在药品临床研究期间和上市后还应继续进行稳定性 监测和研究。

12.3 原则

研发阶段：应进行全面的稳定性实验，以得到注册所需所有数据。此数据用于证明环境 因素对产品特性的影响，以确定包装、储存条件、复验周期（API而言）和有效期。

已上市阶段：产品上市后，应进行适当的持续稳定性考察，监测已上市药品的稳定性， 以发现市售包装药品与生产相关的任何稳定性问题（如杂质含量或溶出度特性的变化）；也 用于考察产品上市后因变更对产品稳定性的影响。

12.4 稳定性分类

按照中国药典2010 版及法规要求，我国的稳定性研究可以分为以下几类：

  

影响因素实验 加速稳定性实验 长期稳定性实验

66

实验室控制系统 GMP实施指南

12 稳定性实验

 持续稳定性实验

各公司根据需求及法规规定，还可以进行中间产品放置时间稳定性实验，批量放大及上 市后变更（如生产设备变更，原辅料变更，工艺调整等）稳定性实验以及特殊目的稳定性实 验，例如对偏差调查等的支持性实验。

12.5 技术要点

12.5.1 基本要求

稳定性试验应遵循具体问题具体分析的基本原则，其设计应根据不同的研究目的，结合 原料药的理化性剂型的特点和具体的处方及工艺条件进行。参照中国药典2010版本，一般

性要求如下：



影响因素实验用 1 批原料药或 1批制剂进行。加速实验和长期稳定性试验用3 批供试

品进行。



原料药供试品应是一定规模生产的。供试品量相当于制剂稳定性试验所要求的批量，原

料药合成工艺路线、方法、步骤应与大生产一致。药物制剂供试品应是放大试验的产品， 其处方与工艺应与大生产一致。药物制剂如片剂、胶囊剂，每批放大试验的规模，片剂 至少应为10000片，胶囊剂至少应为 10000粒。大体积包装的制剂如静脉输液等，每批

放大规模的数量至少应为各项试验所需总量的10倍。特殊品种、特殊剂型所需数量，

根据情况另定。



供试品的质量标准应与临床前研究及临床试验和规模生产所使用的供试品质量标准一

致。

 

加速试验与长期试验所用的供试品的包装与上市产品一致

研究药物稳定性，要采用专属性、准确、精密、灵敏的药物分析方法与有关物质（含降

解产物及其他变化所生成的产物）的检查方法，并对方法进行验证，以保证药物稳定性 结果的可靠性。在稳定性试验中，应重视降解产物的检查。



由于放大试验比规模生产的数量要小，故申报者应承诺在获得批准后，从放大试验转入

规模生产时，对最初通过生产验证的3批规模生产的产品仍需进行加速试验和长期稳定 性试验。

12.5.2 样品储存

A. 标准储存条件

（按照气候带不同区域有不同要求）

表 12-1 四个气候带的分类表

四个气候带的分类表 气候带 温度 I 温带 21 ℃ II 亚热带 25 ℃ III 热带（干 30 ℃ 热） IV A 热带 30 ℃ 相对湿度 45 % 60 % 35 % 65 % mbar* 11.2 19.0 15.0 30.0 67

12 稳定性实验

实验室控制系统 GMP实施指南

IV B 30 ℃ 75 % * mbar: 水饱和蒸汽压 各国家/地区被相应分配到以下气候带：

   

气候带 I主要有英国，北欧，加拿大，俄罗斯

气候带 II主要有美国，日本，南欧（地中海地区）

气候带 III 主要有伊朗，伊拉克，苏丹

气候带 IV主要有巴西，加纳，印度尼西亚，尼加拉瓜，菲律宾

基于这种分类，表明大约 90％的全球药品市场位于温带或亚热带气候带。在ICH指导

原则Q1 A 中的气候带I和II，已经作为标准贮藏条件。

我国总体属于亚热带（II），部分地区属湿热带（IV A），按照中国药典2010版规定， 长期稳定性实验采用温度为25℃±2℃、相对湿度60%±10%， 或温度为30℃±2℃、相对

湿度65%±5%，与ICH（美、日、欧国际协调委员会）采用条件基本一致。具体实验储存

条件见下表：

表 12-2 标准贮藏条件表

标准贮藏条件（依据ICH Q1A (R2) 和 ICH Q1F） 对于气候带 I 和II 温度 相对湿度 长期试验研究 25 ℃ ± 2 ℃ 60 % ± 5 % 中间条件 30 ℃ ± 2 ℃ 65 % ± 5 % 加速试验研究 40 ℃ ± 2 ℃ 75 % ± 5 % 对于气候带 III和IV 长期试验研究 30 ℃ ± 2 ℃ 65 % ± 5 %或 75 % ± 5 % 加速试验研究 40 ℃ ± 2 ℃ 75 % ± 5 %

长期稳定性实验或实时试验：参考产品在指定期限内能保持质量稳定的实验条件， 长 期试验选择哪种实验条件-气候带I&II(25℃ /60%RH) 或者III &IV (30℃ /65%RH 或30℃

/75%RH)进行，由厂家自行决定。产品的贮存条件和有效期的制定决定于长期稳定性试验的 条件。

加速稳定性试验：条件至少高于长期稳定性试验条件 15℃ ，用于加快降解反应的速度， 使得相应的质量变更发生在早期阶段。加速稳定性试验通常用于对药品长期稳定性的预测。

中间条件：是指在加速条件下因质量“显著变化”或供试品经检测不符合制定的质量标 准而采用的替代条件，这也被称为后备条件。 按照中国药典规定， 应在30± 2 ℃，65%

±5% 的情况下（可用Na2CrO4饱和溶液）进行， 时间仍为6个月。

一般来说，原料药的“显著变化”应包括：

  

形状如颜色、熔点、溶解度、比旋度超出标准规定，及晶型、水分等超出标准规定 含量测定超出标准规定

有关物质如降解产物、异构体等超出标准规定

68

实验室控制系统 GMP实施指南

12 稳定性实验



结晶水发生变化

药物制剂的“显著变化”应包括：



含量测定中发生 5%的变化（特殊情况应加以说明）；或者不能达到生物学或者免疫学 的效价指标

任何一个降解产物超出标准规定

形状、物理性质以及特殊制剂的功能性试验（如颜色、相分离、再混悬能力、结块、硬 度、每揿给药剂量等）超出标准规定。 pH 值超出标准规定

制剂溶出度或释放度超出标准规定

如果选择气候带 III 和IV的条件作长期稳定性研究，则无中间试验条件。

 

 

除此之外，如下表描述的附加的标准条件应用于对温度较不稳定的产品:

表 12-3 温度选择性制剂的标准贮藏条件

温度选择性制剂的标准贮藏条件 温度 相对湿度 冷藏 5 ℃ ± 3 ℃ 监测 冷冻贮藏 -20 ℃ ± 5 ℃ - 备注： FDA草案中规定的冷冻温度为-15 ℃ ± 5 ℃ (FDA, 1998)。 FDA规定的吸入粉剂和气雾剂贮藏条件的描述见下表：

吸入粉剂和气雾剂的标准贮藏条件(依据FDA) 温度 相对湿度 长期试验研究 25 ℃ ± 2 ℃ 75 % ± 5 % 加速试验研究 40 ℃ ± 2 ℃ 75 % ± 5 % B. 包装

稳定性试验样品的包装应与拟上市产品的包装一致，应紧密, 避光(如需要)。原料药可

采用模拟小包装，所用材料和封装条件应与大包装一致。通常，对于原料药，水蒸汽渗透性 试验用于包材的分级，例如通过硅胶吸收水分的重量测定所得，试验条件为 23C/75%RH下

储存14 天。

表 12-4 原料药包装分类（水蒸气渗透性）

原料药包装分类（依据水蒸气渗透性） 严密性 分类 水蒸气渗透性/天/升 极密封 A ≤ 0.5 mg 密封 B ≤ 2.0 mg 渗透 C ≤ 14.0 mg 极易渗透 D ≤ 14.0 mg C. 样品的准备



取样：

69

12 稳定性实验

实验室控制系统 GMP实施指南

稳定性样品取样应按照规定和需求进行，科学、合理、具有代表性。详见第七章 “取

样”



样品量：

通常，应储存足够量的样品用于稳定性研究，如需要，应确保所有试验都可以重复进行。 许多公司选择储存双倍的全检样品量. 即使选择简化试验方案设计 （例如，括弧法和矩阵）

时，也必须按照全面设计的方案储存所有的样品.

样品标识：

储存于每个条件下的样品应作适当标示，反映出产品的名称，批号，储存条件和稳定性

研究的初始时间等信息。例如:

D. 设备要求

用于稳定性试验样品贮存的设备应按要求进行确认，校正及定期维护，保证处于稳定的 状态。温度/湿度布点测定应建议与设备验证/再验证同步进行。具体参考“实验室设备的验 证及校正/维护章节。

样品储存设备 (恒温恒湿箱) 必须进行监控 （计算机系统自动监控或者手工记录等），

维持温度和湿度水平位于规定的范围内。此监控检查必须正确记录。计算机系统自动监控应 实行访问控制, 相关人员须接受适当培训。设备应有报警系统提示，如果发生控制系统故障

失控，必须于紧急计划中规定后续行动，并对异常情况有及时的记录和调查。超出要求的情 况及相应的处理措施，参见质量保证模块“偏差系统“

样品应有足够的储存空间，同时应考虑备用设备或其它应急措施。如1、委托有资质的

第三方负责样品的贮存，委托应严格按照法规和委托合同执行，详见第十四章 “产品的检 验”中“委托检验”部分。2、降低储存条件，如：

40℃/75%RH条件下样品逐步地转移至30C/75%RH，30℃/65%RH，30℃/环境自然湿 度，25℃/60%RH，25℃/环境自然湿度。

30℃/65%RH 条件下样品可逐步转移至30℃/环境自然湿度，25℃/60%RH，25℃/环境

自然湿度。

25℃/60%RH条件下样品可转移至25℃/环境自然湿度

30℃/75%RH 条件下样品可逐步转移至30℃/65%RH，30℃/环境自然湿度，25℃/60%RH， 25C/环境自然湿度

70

实验室控制系统 GMP实施指南

12 稳定性实验

E. 挑战性试验储存条件

(1)影响因素试验

按照中国药典2010 版规定，如下试验条件分别用于原料药及制剂的影响因素的测定

表 12-5 原料药及制剂影响因素试验条件

目的

试验批次 样品形式

高温试验 高湿试验

强光照射试 验

原料药 制剂

探讨药物的固有稳定性，了解其稳定性的影响因 考察制剂处方的合理性 素和可能的降解途径与降解产物，为制剂生产工 与生产工艺和包装条件 艺、包装、贮存条件和建立降解产物的分析方法 提供科学依据。

1（如试验结果不明显，应加试两批样品）

将供试品置适宜的开口容器中（如称量瓶或培养 去除外包装，置于开口 皿），摊成≤5mm的薄层，疏松原料药摊成≤10mm 容器中 的薄层

60℃ 放置10 days, 于第5 天，第10天取样检测。40℃ 作为备份条件 于25℃, 90% ±5%RH 条件下放置10天，于第5 天，第10天取样检测, 75% ±5%作为备份条件.（备注：除按照稳定性重点考察项目要求检测外，同时 应准确称量试验前后供试品的重量，以考察供试品的吸湿潮解性能。若吸 湿5%以上，则于备份条件下试验）。恒湿条件可在密闭容器如干燥器下部 放置饱和盐溶液，根据不同相对湿度的要求，可以选择 NaCl饱和溶液（相 对湿度75% ±1%，15.6-60C），KNO3 饱和溶液（相对湿度92.5%，25C） 供试品开口放在装有日光灯的光照箱或其他适宜的光照装置内，于照度为 4500lx±500lx 的条件下放置10天，于第5天和第10天取样，检测。设 备：采用定型设备“可调光照箱”，也可用 光橱，在箱中安装日光灯数只 使达到规定照度）

当进行强度试验时，如产生过多降解产物时，试验条件可以适当调整. 根据药品的性

质必要时，可以设计其他试验，如考察pH 值、氧、低温、冻融等因素对药品稳定性的影响。

(2)反复低温或冻融试验

对于易发生相分离、黏度减小、沉淀或聚集的药品须通过低温或冻融试验来验证其运输 或使用过程中的稳定性，作为影响因素试验的一部分。具体方法如下：

低温试验应包括三次循环，每次循环应在2-8C条件下2 天，然后再40C加速条件下考 察 2 天，取样检测。

冻融试验应包括三次循环，每次应在-10C至-20C条件下 2 天，然后再40C加速条件下 考察2 天，取样检测。

F. 特殊储存条件

除 ICH 标准储存条件以外，对于特定的产品，尚需测定进一步的储存条件下的质量稳

定性。例如：

半渗透包装产品的储存条件 (包装于PE安瓿或PE瓶中的洗液, SVPs & LVPs, 鼻喷剂,

眼药等)

71

12 稳定性实验

实验室控制系统 GMP实施指南

表 12-6 半渗透包装标准贮藏条件

半渗透包装的标准贮藏条件 对于气候带I和II 长期试验研究 中间条件 加速试验研究 对于气候带III和IV 长期试验研究 30℃ ± 2℃ 加速试验研究 40℃ ± 2℃ 温度 25℃ ± 2℃ 30℃ ± 2℃ 40℃ ± 2℃ 35 % ± 5 % 最大25 % ± 5 % 相对湿度 40 % ± 5 % 35 % ± 5 % 最大25 % ± 5 %

如果药物制剂使用密闭容器（玻璃瓶、西林瓶、密封的玻璃安瓿）包装，环境湿度对此 影响极小，则水分测定并不是必需的。在这种情况下，建议贮藏条件可以参照下表：一般来 说，在这些试验中提供单独的设施进行考察并没有任何优势，相反，样品往往是储存在正常 气候箱中。

表 12-7 密闭包装贮藏条件

密闭包装的贮藏条件 长期试验研究 中间条件 加速试验研究 温度 25℃ ± 2℃ 30℃ ± 2℃ 40℃ ± 2℃ 相对湿度 环境 环境 环境

拟冷藏的药物制剂的贮藏条件参照下表

表 12-8 拟冷藏药物的贮藏条件

拟冷藏药物的贮藏条件 长期试验研究 加速试验研究 温度 5℃ ± 3℃ 25℃ ± 2℃ 相对湿度 贮藏 环境 若制剂拟深冷冻贮藏，参考以下建议表

在这种情况下，不推荐进行加速试验研究。但应对一批样品在略高的温度下（如：5℃ ± 3 ℃或25℃± 2℃）放置适当的时间进行测试，以了解允许的短期偏离标签贮藏条件的 温度波动（短途运输）范围。

表 12-9 拟冷冻贮藏药物标准贮藏条件

拟冷冻贮藏药物的标准贮藏条件 温度 相对湿度 长期试验研究 -20℃ ± 5℃ - 备注： FDA草案中规定的冷冻温度为-15℃ ± 5℃ (FDA, 1998)。

72

实验室控制系统 GMP实施指南

12 稳定性实验

12.5.3 样品提取

A. 原则

样品必须按照稳定性试验计划从恒温恒湿箱和其他储存条件下按时取出

样品可以在一个允许的时间偏差范围内取出。例如对于试验点间隔至少为一年，则偏差 为一个月是可以接受的。对于短期试验点，允许的时间偏差应适当减少，并应予相应的SOP 中予以规定。例如，在长期稳定性试验的第三个月的试验点，早于或晚于2 周的预设时间

是可以接受的。

对于加速试验条件，样品一般不推荐早于计划取样时间取出。另外，对于有效期月试验 点的样品必须取出并进行检验。 .

任何附加于计划外的试验间隔点取样，必须经由责任授权人签字批准，并登记在册，必 须保证有足够的样品用于余下的 稳定性研究。

从恒温恒湿箱取出的稳定性试验样品应存放于适宜的贮存条件等待检验，并有明显标示。 样品取出后，应作标记，并登记于相应的记录中，进行检验。

B. 文件

稳定性计划：按照要求，应准备每年的稳定性试验计划，并得到相应负责人的批准，以 用于指导稳定性试验计划的实施。.

稳定性试验样品记录: 每次取出的样品数量必须记录.

12.5.4 分析

A. 原则

所有的稳定性试验样品都需按照试验方法进行试验，稳定性特征试验项目应规定于稳定 性试验草案中。

试验室对从贮存条件下取出的样品应在标准操作规程中明确规定完成分析的时间，并必 须在指定实限内完成，以避免试验数据缺少取出时间点的代表性。例如，对于一个月的试验 点样品，推荐于2 周 之内完成测试，对于其他试验点的样品，建议自实际取样日后 4 周之 内完成测试，6周内完成报告。 在完成分析之前，取出的样品应在推荐条件下贮存（如冷

藏等）

B. 试验点的设计

由于稳定性研究的目的是考察质量随时间变化的规律，因此研究中一般需要设置多个时 间点考察样品的质量变化。

考察时间点应基于对药品性质的认识和对稳定性趋势评价的要求而设置。 如长期试验 中，总体考察时间应涵盖所预期的有效期，中间取样点的设置要考虑药品的稳定性特点和剂 型特点。对某些环境因素敏感的药品，应适当增加考察时间。各法规对中间间隔点稍有不同， 但都必需覆盖整个的产品生命周期. 例如，

73

12 稳定性实验

实验室控制系统 GMP实施指南

表 12-10 稳定性试验点时间表

试验时间表 长期试验研究 ICH ChP.2010 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36, 48, 60 月 0，3，6，9，12，18，24， 36 月. 如效期长于 36 个月，则 每年一次直至有效期止 加速试验研究 ICH Ch.P.2010 USA Japan 0, 3, 6月 0，1，2，3，6月 0, 2, 4, 6月 0, 1.5, 3, 6月

C. 考察项目的定义

稳定性研究的考察项目应选择在药品保存期内易于变化，并可能会影响到药品的质量、 安全性和有效性的项目，以便客观、全面地反映药品的稳定性。根据药品特点和质量控制的 要求，尽量选取能灵敏反映药品稳定性的指标。一般地，考察项目可分为物理、化学、生物 学和微生物学等几个方面。具体品种的考察项目设置参考如下的中国药典规定：

表 12-11 原料药及制剂稳定性重点考察项目参考表

74

实验室控制系统 GMP实施指南

12 稳定性实验

D. 消耗性试验

这种试验是为了模拟多剂量容器的应按规定禁止使用（如糖浆、口服溶液、软膏剂、滴 眼液）。根据包装上的说明，当产品含量只剩余 10％时即应该禁止使用。其次对化学和微 生物性质（如无菌）分析和评价。这些调查结果将用于包装信息，例如滴眼液应在开瓶10 天内使用，超过期限则必须妥善处置。

E. 静脉注射剂的兼容性试验

许多的 API 都具有在塑料表面聚集的趋势， 从而引起次剂量的浸出。 因此，所用的

塑料容器和其他组分必须进行试验，如果必要的话，可以选择另外一种材质的塑料（例如： 硬塑料代替软塑料）。另外，还必须进行过滤性检查试验。

F. 橡胶塞和塑料组分的兼容性试验

这些兼容性试验专属 用于液体制剂和无菌粉针制剂。 FDA推荐，除了使用药典中描

述的标准萃取溶剂进行试验外，应附加更灵敏更专属的试验。 例如口服溶剂， 样品倒置存 放，然后用GC/MS 或其他适宜的方法分析内容物可能的污染。外观检测非常重要，例如口

服溶剂盖子 内的橡胶塞即为已知的污染源。

G. 光学稳定性 （ICH Q1 B）

(1)原则

按照ICH Q1A（R2）规定，必须对新原料药和产品的进行光照试验的分析。ICH Q1B

中规定了一般实验条件。这个试验的目的是为了证明光照的影响不会引起质量上的不可接受 的变化。一般来说，光学稳定性只需选一批制剂产品进行试验即可。 API的试验是强度挑

战试验的一 部分，应于研发早期进行。

(2)光源

光源必须符合D65/ID65 的标准。ID65相当于室内简介日光标准。如具有紫外-可见输

出的人造日光荧光灯、氙灯或卤素灯也是适合的。若光源发射光低于320nm，应滤光除去。 另外，样品可暴露于冷白色荧光灯和光谱范围为 320~400 nm的近紫外荧光灯。

(3)试验条件

试验进行时，温度必须加以考虑使得光线的影响可以独立评估。 如必要，一个包裹与 OPAQUE 膜中的控制样品必须放置于样品室（黑暗控制）。曝光必须至少为1200klux.h , 并

2

且由紫外成分产生的能量必须至少为200w.h/m 。

(4)API

API的属性必须在试制阶段纳入考虑避免照射过程中升华，熔融或发生其他变化。 API 必须在所需的适宜的容器和阴凉处进行试验。 必须指出：在早期的研发阶段的挑战性试验

中，特意采用光降解方法进行杂质研究，而后来的调查重点是分析样品的保护措施。 (5)制剂产品

75

12 稳定性实验

实验室控制系统 GMP实施指南

最初使用未包装的样品试验。如发生不能接受的变化，增加保护，首先以初级包装开始， 然后次级包装（即市售包装）。 基于试验结果，其包装必须改进，和/或改变配方。如同 API一样，产品的特性必须加以考虑，并且使用密闭容器排除外部影响。

(6)参数分析

照射后，必须检测样品的物理特性-主要为外观，含量和杂质。制剂产品还包括崩解时 限和溶出度试验。然后，必须确定必要的防护方式。 (7)评估

一旦分析试验完成，必须评估结果。 基于API 或制剂产品在研发阶段的经验，对比质

量标准做出判断。 必须确定相应的有助于保护产品质量防止不利影响的保护措施。

H. 微生物分析

(1)防腐：

无菌以及非无菌药品均可能含有防腐剂以保护制剂不受细菌和真菌污染。在批准的货架 效期结束时，在研发过程中必须确定防腐剂的最低含量。当低于处方中的防腐剂（如乙醇） 需求量时，最低限度必须经过微生物挑战试验确认，以确定安全范围（USP<51>）。 FDA 建议在货架效期内的初次、末次时间点及每一年，微生物应与防腐剂含量测定同时进行分析。 (2)微生物限度：

在非无菌药品的稳定性试验中，应进行定期核查微生物限度的符合情况。美国药典或欧 洲药典的规定同样适用。 (3)无菌试验：

在稳定性试验开始时，应对每批样品进行无菌检查。FDA 还建议应在货架效期每年及 结束时验证内包装的完整性。这个测试必须有足够的专属性和敏感度来检测不合格品的缺陷。 美国药典中的无菌试验（USP<71>）是用来确定样本大小的。根据FDA 的规定，已通过完

整性测试的样品，可同时用于其他物理化学调查。但在任何情况下都不要将这些样品进行储 存及在以后重复使用。FDA还明确指出，通过完整性测试被分析放行的样品不能用于无菌 试验的替代品。

(4)热原和内毒素：

热原和内毒素的检查必须在稳定性试验的开始和适当的时间间隔点进行。大多数的非肠 道用药，试验仅需在开始和效期结束即足够。对于干物质制造或溶液密封于安珀瓶中，只需 在开始进行试验。塑料容器和可旋盖的玻璃容器，至少在开始和结束时试验。

试验方法和标准参见第十七章“微生物”章相应章节。

I. 中间产品放置时间的研究

持续稳定性考察主要针对市售包装药品，但也需兼顾待包装产品。例如，当待包装产品 在完成包装前，或从生产厂运输到包装厂，还需要长期储存时，应在相应的环境条件下，评 估其对包装后产品稳定性的影响。此外，还应考虑对储存时间较长的中间产品进行考察。此 特殊稳定性试验用以建立原料药用于生产前的贮存时间以及需采取的防护措施。类似的调查

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实验室控制系统 GMP实施指南

12 稳定性实验

也需进行去测定生产中间阶段产品，如半成品包装前的最长贮存时间及包装容器。FDA一

般接受 30天的放置时间，更长的时限需要提供数据支持。 至少用一批产品进行指定包装条 件下放置时间的研究。

通常，中间产品放置时间的研究应涵盖以下几个方面： 批次：至少一批，工艺验证中，3 批验证批次可同时用于研究

样品量：至少双倍量样品，单独包装 包装：模拟拟定的包装形式

贮存条件：模拟最恶劣的贮存条件，（如可用恒温恒湿箱）或真实的贮存条件（如生产 的储存间）

取样点：预期的最长储存时间点及设计中间点

关键试验项目：参考稳定性试验的重点考察项目，并结合剂型与药品的特性，设计专署 试验。

例如一片剂产品的生产过程中，如下阶段可以适用于进行中间产品放置时间的研究

表 12-12 片剂中间产品放置时间研究示例

产 品 试 验 生产阶段 项目 包装 贮存 点 时 间 原 料 含量， 2 层 生产储存 0，1， 分包装后 杂质 PE 袋/ 铁 间 （18-25C）/ 2，4周 桶，内有5 （30-65%RH） 克干燥剂 终 混 水分， 2 层 生产储存 0，1， 颗粒 含量，杂质 PE 袋/ 铁 间 （18-25C）/ 2，4周 桶，内有5 （30-65%RH） 克干燥剂 裸 片 水分， 2 层 生产储存 0，1， （片芯） 含量，杂 PE 袋/ 铁 间 （18-25C）/ 2，4周 质，溶出度 桶，内有5 （30-65%RH） 克干燥剂 包 衣 液

微 生 玻 璃 冰 箱 0，1， 物限度，干 瓶 密闭） （2-8C） 2周 物质 半 包 水分， 2 层 生产储存 0 ， 装品（包衣 含量，杂 PE 袋/ 铁 间 （18-25C）/ 2，4，8周 后） 质，溶出度 桶，内有5 （30-65%RH） 克干燥剂

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12 稳定性实验

实验室控制系统 GMP实施指南

I. 运输条件的分析

(1)原则

除标示的储存条件外，转运条件也必须关注。有时必须监控从制造商库房到药房的长途 路线，以保证药品到达最终客户是完整无损的。 适当时，须进行转运验证。验证或调查过 程中，药品必须与记录温湿度的记录仪同时发送， 药品的质量需随后通过试验调查，从温

湿度记录仪中得到的数据需评估。 (2)条件定义

转运条件一般如下规定：

表 12-13 转运运输条件示例

运输条件 类别 名称 A 深冷冻运输 B 不间断冷藏运输 C D E 冷藏运输 受控 一般 描述 在-15 ℃以下不间断运输和临时存储 在+2～+8 ℃温度下不间断运输和临时存 储 在+2～+8 ℃温度下短暂间断运输和临时 存储 在30℃以下短暂运输和临时存储(最大周 期1个月) 运输和临时存储没有特殊要求 必要的运输验证按如下程序进行：

产品被列为处于研发阶段，必须进行检查以确定在特定的条件下该产品是否会继续保持 包装的完整。

新产品经过三次运输并在此期间进行数据记录和评估。评估还应包括运输条件产品外观 的影响。

评估运营商，以确定他们是否能符合入上表指定的条件，并签订商业和质量协议 定期检查运营商的对条件的承诺，例如每隔两年。

12.5.5 简化方案设计

A. 目的

为了将稳定性研究的人员和财务的付出保持在尽可能低的花费上，基于ICH Q1D，可

以如下进行简化试验，目的为减少费用和试验室的消耗，同时必须避免任何信息丢失。

B. 原则

保证法规及必需的基本要求。

C. 括号法

括号法是一种稳定性试验的设计方案，它对某些设计因子（如规格、包装大小和/或 填充量）处在极端状态的样品，与完整设计方案一样，在所有时间点进行试验。这种方

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12 稳定性实验

案假设：任何中间状态样品的稳定性可以用被试验的极端样品的稳定性所代表。括号法 可以应用于处方相同或相近的多个规格的样品研究中。例如由相同粉末混合物、不同填 充量制成的不同规格的胶囊。凡粉末混合物在质量上是一致而其数量上不同时，必须提 供理由。但是，括号法不适合用于质量上不同（其他辅料）的粉末混合物。



应用实例

表 12-14 括号法方案设计

括号法 剂量 批次 包装 规格 15 ml 50mg 1 2 3 T T T T 4 75mg 5 6 T 7 T 100mg 8 T T T 9 T 100 ml 500 ml T T T =已测试样品 备注：所有的样品必须按照全面设计来存储，括号法只能应有于最终的分析。 如果无 法确认被选择受试的规格或容器尺寸和/或填充量确实是处在极端状态，那么应用括号法是 不合适的。

D. 矩阵

定义：用统计学设计作为基础，仅在特定的试验点对选定的子因子进行试验。样品的子 集变化从一个点到下一个点。 一般来讲，所有的因子必须 在开始和效期点进行试验。一般 以 1/2 或1/3比例减少， 但真实的节约应低于此值。设计方案假设受试的每个样品子集的

稳定性代表着所给时间点上所有样品的稳定性（同一制剂、次级包装系统影响、设计因子、 需考虑因素等）。



应用实例

以 1/2 减少量的矩阵设计

表 12-15 矩阵法方案设计

矩阵法 1 (1/2设计，减少 1/2) 剂量 50mg 100mg 2 T T T T 3 T T T T 1 T T T 2 T T T T T 3 T 批次 试验次数(月)

0 3 6 9 12 1 T T T T 12.5.6 上市产品的稳定性试验

药品在注册阶段进行的稳定性研究，一般并不是实际生产产品的稳定性，具有一定的局 限性。采用实际条件下生产的产品进行的稳定性考察的结果，是确认上市药品稳定的最终依 据。

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12 稳定性实验

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在药品获得批准上市后，应采用实际生产规模的药品继续进行长期实验。根据继续进行 的稳定性研究的结果，对包装、贮存条件和有效期进行进一步的确认。

药品在获得上市批准后，可能会因各种原因而申请对制备工艺、处方组成、规格、包装 材料等进行变更，一般应进行相应的稳定性研究，以考察变更后药品的稳定性趋势，并于变 更前的稳定性研究资料进行对比，以评价变更的合理性。

A. 追踪（持续）稳定性实验

目的：保证按照固定验证过的生产参数制造的产品质量维持在稳定的趋势

要求：通常情况下，至少每年每个产品的每个剂量和规格都有一批必须放置于持续稳定 性试验，稳定性报告必须定期更新。

可以按如下设计方案实施：

      

仅在长期稳定性报告中标示的储存条件下储存 在所有 初级包装材料中储存

储存足够量的样品以推动以年度为基础的试验直至有效期 仅分析稳定性涉及的因子

推荐每年进行测定，至少 在有效期的开始，中间和结束点进行分析

矩阵是被接受的

出口美国的产品年度分析（如适用）

B. 承诺稳定性实验

目的：特殊类型的稳定性，其报告与试验方案应提交给权威机构 要求：应用于下面的情况

  

原料药和药品制剂 转移到商业生产上的稳定性研究，即生产的前3批产品已获得批准，

因变更引发的稳定性研究，例如生产的改变、处方或包装的改变、厂房的变更。 权威机构要求补交数据

例如，如果新产品申请用的现有的稳定性数据不是来自于 3 批生产规模的批次，则需 承诺将最初三批生产规模的批次放于长期稳定性实验和加速稳定性实验。

12.5.7 评估

稳定性数据评估的基本概念与单或多因素研究及全部或降低设计的研究相同。从正式的 稳定性研究得到的数据，以及适宜的支持性数据都应进行评估，以确定关键质量属性是否可 能影响产品质量和原料药或药品性能。每个属性应分开评估，并应全面评估判断所提议的复 验期或有效期，储存、包装条件，一般如下确定：



贮存条件的确定

应综合影响因素实验、加速实验和长期实验的结果，同时结合药品受流通过程中可能遇 到的情况进行综合分析。选定的贮存条件应按规范术语描述。

80

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12 稳定性实验



包装材料/容器的确定

一般先根据影响因素实验结果，初步确定包装材料和容器，结合加速试验和长期试验的 稳定性研究的结果，进一步验证采用的包装材料和容器的合理性。



有效期的确定

药品的有效期应综合加速试验和长期试验的结果，进行适当的统计分析得到，最终又效 期的确定一般以长期试验的结果来确定。

由于试验数据的分散性，一般应按 95% 可信度进行统计分析，得出和理的有效期。如 三批统计分析结果差别较小，则取其平均值为有效期， 如差别较大则取其最短的为有效期。

若数据表明测定结果变化很小，提示药品很稳定，则可以不作统计分析。

如下 ICH 具体原则可供参考

A. 欲贮存于室温的 API 复验周期和药品有效期的数据评估



在加速储存条件下无明显变化

 长期和加速试验数据显示很小或无改变和很小或无可变性：无需统计学评估，

但须提交证据说明。复验期和有效期限可以外推至最长支持数据实限的两倍但

不超过12个月

 长期和加速试验数据显示随着时间推移有变化和/或变异：如果一个或几个因

子的变化显著，长期数据的统计学分析适用于确定复验期和有效期。如果存在 批间或其他因素变异，其复验期和有效期限不能超出所提交的合格数据的实限。 如果变化源于特定因素， 可针对该因素的不同水平（如不同规格）设定不同

的复验期或有效期。可用外推法来设置长期稳定性试验数据覆盖范围的复验期 或有效期。但是，外推的程度取决于有效的其数据是否能进行统计分析：

数据不能作统计评估或 统计评估未作，复验期和有效期限可以延长到1.5 倍的最长长

期支持数据，最大允许延长期限为6个月。

数据可以做统计评估， 如已做统计评估，复验期和有效期限可以延长到2 倍的支持数

据的最长实限，最多允许12个月，支持性数据要求来自注册研究。



加速储存条件下明显变化

当加速储存条件下明显变化时，可以使用中间存储条件的数据。

 中间存储条件无明显变化

数据不能统计分析或未评估：复验期和有效期限可以最多延长至长期稳定性数据时间外 3 个月。

数据可以进行统计分析：如完成统计分析，复验期和有效期限可以延长至 1.5 倍的长期 稳定性数据，但最多不得超过 6 个月。

 中间存储条件有明显变化

如明显变化发生于一个或几个因素，复验期和有效期限不能长于长期稳定性数据的实限。 另外，复验期和有效期限有可能被要求短于长期研究的支持数据实限。

81

12 稳定性实验

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B. 拟贮存于冰箱中（2-8 ℃）的 API 复验周期和药品有效期 的数据评估

原则同室温储存产品。因其不稳定性，外推效期需谨慎， 另外，无中间储存条件。



在加速储存条件下无明显变化

 长期和加速试验数据显示很小或无改变和很小或无可变性：无需统计学评估，

但须提交证据说明。复验期和有效期限可以外推至最长支持数据实限的1.5倍

但最多不超过 6个月。

 长期和加速试验数据显示随着时间推移有变化和/或变异：

数据不能作统计评估或未作统计评估，复验期和有效期限可以延长到1.5 倍的最长长期

支持数据，最大允许延长期限为3个月。

数据可以进行统计分析：如完成统计分析，复验期和有效期限可以延长至 1.5 倍的支持

数据，但最多只允许延长 6 个月。



加速储存条件下明显变化

 变化发生于3 个月和6个月之间

复验期和有效期限应根据长期试验的数据来定， 不宜使用外推法。某些情况下，还可

能定一个比长期试验数据覆盖的时间更短的复验期和有效期。如果长期试验的数据显示变异 性，应该用统计分析验证所建议的复验期和有效期是否适用。

 变化发生在前 3 个月

与上相同。 另外，对稳定性有影响的超出储存温度的行动需讨论和评估。

C. 拟贮存于冷冻（-20 ºC）的 API 复验周期和药品有效期的数据评估

长期数据用于确定复验期和有效期。另外，可以储存一批产品于高温（5度或25度）

储存条件，以评估短实限的稳定性影响。作最长三个月的试验，以得到数据证明超出可接受 的限度。

12.5.8 数据汇总

所有的稳定性试验结果和相关调查均需记录，稳定性数据应如下章“文件”方式报告， 以保证从连续的样品点产生的信息易于比较。

12.5.9 统计分析的程序

这一分析的目的是为了建立一个高可信度的复验期或货架期，以确保将来在相似条件下 生产、包装和贮藏的所有批次的样品的定量特性在此期间内能符合认可标准的要求。一旦采 用一种统计分析方法去分析注册批次的数据，则应采用相同的统计方法对后续稳定性承诺批 次的数据进行分析。

回归分析是评价定量特性的稳定性数据和建立复验期或货架期的一种合适的方法。定量 特性与时间的关系决定了这些数据是否需要进行转换，然后再进行线性回归分析。平均值的 95%单侧置信水平低限应用于确定随时间减少的定量特性（如含量）的复验期或货架期。而 平均值的95%单侧置信水平上限将应用于随时间增加的定量特性（如降解产物）。该程序 可用于评估单批或经适当的统计分析后合并的多批次产品的复验期或货架期。

82

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12 稳定性实验

备注：如果一种统计分析用于注册批次，那么相同的统计程序应用于相应的承诺稳定性 批次。

线性回归、合并检验和统计模型一般可应用于稳定性分析的定量结果评价。

12.6 文件

12.6.1 标准操作规程

必须建立标准操作规程去描述稳定性试验的程序和要求，复检期/有效期声明和推荐储 存条件和转运条件的测定。

12.6.2 稳定性实验草案

稳定性草案是稳定性研究的基本部分，应涵盖药品有效期，应至少包括以下内容：

      

每种规格、每种生产批量药品的考察批次；

相关的物理、化学、微生物和生物学检验方法，可考虑采用稳定性考察专属的检验方法； 检验方法依据； 合格标准；

容器密封系统的描述； 试验间隔时间（测试时间点）；

贮存条件（应采用与药品标示贮存条件相对应的《中华人民共和国药典》长期稳定性试

验的标准条件）；



检验项目，如检验项目少于成品质量标准所包含的项目，应说明理由。

所有的稳定性草案必须有责任授权人批准后执行，注册稳定性相关的试验草案须经由注 册部相关责任人复核并批准。稳定性试验草案必须在稳定性研究启动之前得到相关责任人的 批准。

如果在市产品的持续稳定性程序不同于初始的长期稳定性试验研究，则必须提交书面证 明，作为上市批准档案的一部分。

12.6.3 计划

每年的年末必须准备下一年的“年度稳定性计划“ 一旦新的稳定性研究被启动，补充 性的 “ 年度稳定性计划“ 必须相应准备。如果需要，及时更新 “年度稳定性计划”添加 补充性的计划内容。必须按照 “年度稳定性计划”进行稳定性试验管理。

12.6.4 记录

取样: 样品必须根据稳定性试验计划按时取出，并及时记录于相应的记录中，同时，样 品必须转移至相关实验室登记及随后的分析试验，分析记录应及时出具。原则详见 “原始 数据管理”章节。

83

12 稳定性实验

实验室控制系统 GMP实施指南

12.6.5 报告

稳定性报告应包含稳定性研究中收集的所有相关的数据，也包括对正在进行的或已完成 的稳定性 研究所得结果的科学的数据评估和结论. 一般情况下，稳定性报告要按时撰写和

更新.

稳定性报告须包括但不限于以下所列条款:

          

所选的批次 产品性能的汇总介绍 产品有效期 批生产信息 分析试验和质量标准 试验结果

与稳定性试验草案的偏差（若适用） 结论 数据表

适当的趋势分析和统计分析 适当的统计分析图表。

稳定性试验报告应由责任分析师撰写/更新，并经由责任授权人批准。

长期稳定性试验和持续稳定性试验应定期报告汇总，建议每年至少以中期报告或数据汇 总表的形式报告一次。所有稳定性研究完成后，应出具最终的稳定性报告。

12.6.6 年度趋势分析与评估

在年度产品回顾的报告中，其回顾期限内从事的所有稳定性研究均需加以描述和评 估， 对于复验期/有效期的支持结论必须明确定义。

12.7 稳定性超标或超趋势调查处理

12.7.1 原则

应对不符合质量标准的结果或重要的异常趋势进行调查，如超出标准（OOS）、超出趋 势或预期（OOE）。任何已确认的不符合质量标准的结果或重大不良趋势，都应向当地药品 监督管理部门报告；企业还应考虑是否可能对已上市药品造成影响，必要时应实施召回。

12.7.2 程序

调查程序参见“实验室调查”章节，简单描述如下： 例如对持续稳定性试验OOS/OOE的调查处理

原则：任何超出标准和超出趋势的结果必须进行调查，并采取相应的措施

质量警报：一旦追踪稳定性试验OOS 结果被确认，应立即书面通知质量保证部，最好 在短期内完成实验室调查报告。

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实验室控制系统 GMP实施指南

12 稳定性实验

可能的召回：如果质量警报包含潜在的召回，则必须按照召回的调查程序进行。 产品失败的调查：必须在质量保证部的领导下，进行全面的产品失败调查（见QS模块）， 对于已生产或即将生产的批次必须采取相应的措施。

产品评估：在相关质量团队的领导下，对包含所有涉及的操作进行全面的产品质量评估， 并决定应采取的行动，包括召回，以保证现有的和将来批次的产品质量。此评估一般应在 20个工作日之内完成。

相关质量团队的组成：推荐为如下

领导：稳定性试验室负责人/委托方质量保证负责人（如果为第三方制造产品） 委员：生产方质量保证部，法规部，总部质量保证支持

特别专家：供应链部门，医学专家，当地质量保证部，当地药品法规事务部 紧急变更：如紧急行动是必须的，此委员会有责任在正式批准的变更流程生效之前去实 施变更。无论采取何种方式，所有的步骤均需记录， 在变更系统中的追踪记录需随后进行。

通知质量受权人：要将OOS 的结果以及由质量警报组织所作的决定及时通知质量受权

人（负责产品放行至市场）需要被通知。有时 ，当地质量保证部门须将情况报告给当地健 康组织。

通知健康组织：应对所有超出标准或明显的非典型趋势的结果进行调查。所有确认的 OOS结果，或明显的负面趋势，均应报告给相应的主管当局。该结果给在市批次带来的可 能的影响必须在与主管当局的商议中加以考虑。

【要点回顾】



稳定性研究的系统：

 原则描述

 是否使用矩阵或bracketing

 是否委托他人操作  检验试验项目  接受标准定义



进程

 流程

 时间间隔，试验批次定义  适宜的分析方法？

 如果 OOS结果出现，将采取什么措施？

 如果发生变更，如何执行试验？



前提/设备：

 是否有适宜的储存条件？ 专用？是否验证？ 正确标识？

 温度计及湿度测量仪是否校正？ 是否持续监控温度与湿度？ 如何储存光敏

85

12 稳定性实验

实验室控制系统 GMP实施指南

感物质？

 现有的报警系统（使用日志）？

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实验室控制系统 GMP实施指南

13 超出标准及超趋势的实验结果调查

13

超出标准及超趋势的实验结果调查

本章中涉及以下问题：  什么是 OOS/OOE结果？  相关指南适用于哪些领域？  处理OOS/OOE的程序是什么以及处理过程中应考虑哪些因素？  OOS/OOE结果处理的文件要求是什么？ 【法规要求】

2010版GMP正文：

第十一条 质量控制实验室应建立检验结果超标调查的操作规程。任何检验结果超标都必须 按照操作规程进行完整的调查，并有相应的记录。检验结果超标调查

13.1 定义

超出质量标准的实验结果(OOS)：结果超出设定质量标准。

超出趋势/预期(OOE)的实验结果：结果在标准之内，但是仍然比较反常，因为这个结果 与长时期观察到的趋势或者预期结果不一致。

对于上述任何超出质量标准及趋势/预期的分析结果都须进行实验室调查。此调查应应 遵循真实，科学，有效的原则，必须符合相应的法规要求。

13.2 重要性

对分析的结果的调查是判断产品是否放行于市场或从市场中可能的召回（例如持续稳定 性结果超标时）的依据之一，即使最终判断为非产品原因，亦可以指导实验室发现实验缺陷， 进行整改并采取相应的预防措施。

13.3 应用范围

适用于所有在质量控制实验室以及中控实验室发生的任何对初始物料（包括原料、辅料、 包装材料等），中间产物以及成品的检验。不建议用于与 GMP相关的实验室新仪器设备在 批准使用前的仪器和系统的验证，在此阶段出现的此种超标/趋势状况将在验证报告中讨论。

13.4 实施

13.4.1 一般原则



一旦出现超标或超趋势/预期的结果，必须进行实验室调查以便确认结果是否有效。即

使已根据有效的 OOS 结果判定一批产品为不合格品时，仍需进行调查以找出确切的或 可能的不合格原因，并评估该产品或其它产品的其它批次是否受该 OOS 结果的影响。 在调查过程中，应对发现的任何错误采取相应的预防和整改措施。

87

13 超出标准及超趋势的实验结果调查

实验室控制系统 GMP实施指南



实验室调查必须迅速开展，优先权高于其他工作。如果初步调查结论确凿，已上市销售 的产品相关的实验室调查（如投诉样品，稳定性实验），建议应于24小时内开始并在最 短时间内完成，同时上报相关责任人，并及时跟踪调查进展和调查结果。如确认 OOS

结果有效且非实验室原因所致，须在调查报告批准后立刻通知相关法规机构，并在更短 时间内得出调查结果 （例如FDA规定应于 72小时内得到通知）。



对于与上市产品无关的OOS/OOE结果，也建议尽快进行调查，以确定超标是否来源于

生产过程的偏差，以便及时进行纠正。



如在实验中出现明显的错误时（如，突然停电造成仪器自动关机，玻璃仪器爆裂等）， 在通知相关负责人后，可停止实验，并做好相应记录和调查，该实验视为无效。必须重 新进行实验以获取有效结果。



一般情况下，报告结果是分析结果的平均值（如分析报告），但下列情况除外：

 不要把OOS 的结果和其他结果平均得到一个符合标准的结果，任何OOS个值

都需要进行调查。

 不要平均那些可以显示批产品个值差异的结果（例如溶出度，含量均匀度）。



QC 的分析结果总是对部分产品（即样品）的测定。 因此取样过程必须保证样品具有

代表性，保证实验结果能代表该批产品的质量。

  

确认行动必须仔细，有效地，公正地进行，并且在基于事实的基础上完全记录。 所有的溶液必须保留至调查结束。

所有的重复取样、复检都须得到相关责任人的批准后进行。除非按照实验方法和药典规 定可以允许进行到下阶段多样品的分析。例如，对于溶出度的测定，如第一阶段6个单

值不符合要求，可以进行到第二阶段 12 个单值和/或第三阶段 24 个单值进行评估。含 量均匀度测定亦如此，如第一阶段10个单值不符合要求，可以进行到第二阶段30个单 值的结果评估。

13.4.2 流程

如下流程图是实验室调查所遵循的一个通用的指导原则。考虑到不可能预见调查中的所 有可能情况，所以有些调查可能会与流程图描述的顺序有所不同。参与者应全面科学地判断， 合理严谨地思考，调查过程必须完整记录。调查报告应得到相关负责人的批准。

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实验室控制系统 GMP实施指南

13 超出标准及超趋势的实验结果调查

图 13-1 实验室调查流程图示例

分析结果

产品判为合格

OOS/OOE？

通知责任人

文件复核，公式复核

计算是否正确？

调研阶段 1 明显的分析错误 （检查表）

外观，取样过程 样品是否正确？

重新进样

分析是否正确？

检验方案

调研阶段 2 不明显的分析错误 或其它错误 （检验方案）

进一步调查

初始样品复验

（n≥3）

重新取样

调查结论？

分析错误

样品错误

产品失败

未知错误

调查报告 （包括改正和预防措

施）

调查报告

以上流程图中术语定义如下：

初始样品复检：用相同的样品或相同数量的样品重复实验

89

预防措施的实施与监控

13 超出标准及超趋势的实验结果调查

实验室控制系统 GMP实施指南

重复进样：从依然有效的试验溶液中重复进样，以确认是否为分析仪器的影响。 重复取样：按照预定的计划从一批中重新取样， 可以与原始取样计划不同

分析错误：造成分析结果与真值的偏差的原因是实验进行中的错误，如技术问题的结果。 有如下两方面分析错误：表面的（可重复性的）与非表面的 （不可重复性的）。前者可以 归结于不正确执行分析（例如，文件的错误，非正确的计算/ 评估，试验条件不合规，不正

确的标准，不正确的样品/标准品的初始称重，不正确的稀释，未校验的分析仪器），后者 可归结于以前从未检出过的潜在的错误（例如，分析方法的不精确性，不稳定的分析方法引 起）

产品问题：造成分析结果与真值的偏差的原因是制造的错误引起产品质量的缺陷。 分 为以下两种：和制造流程无关（例如，不正确的初始称重，不正确的混合时间，操作错误）

以及与制造流程有关的（流程验证的不足，不精确的/不正确的生产配方）。

此部分不涵盖于实验室调查范围内，此原因应在排除实验室问题后，由质量保证部和生 产部共同调查确定。

样品问题：造成分析结果与真值的偏差的原因是样品准备的错误。例如，取样，样品混 淆，不正确的标示，样品质量的变更等。

未知错误：造成分析结果与真值的偏差的原因不能被定义为以上三种类型，是偶然发生， 不可控的。

具体流程可如下实施：

A. OOS /OOE实验结果的鉴定

分析师对于每一个分析结果都须对照相应的质量标准和历史趋势进行评判，以断定是否 为超标或超出趋势结果。 如有异常数据发现，需立即报告相关责任人，并保留所有样品、

标准品、玻璃仪器、试剂和样品溶液直到实验室调查批准总结为止。后续的调查必须去确认 每一个 OOS/OOE结果的原因

备注：各公司应根据各产品的特性，对每一个实验项目的历史数据进行趋势分析，从而 根据科学的统计法、公司经验及内部需求等制定出OOE的标准（放行实验和稳定性实验标 准可以不同），并作为标准操作规程或内控质量标准严格执行。推荐于每年的年度产品评估

中对此内控标准进行再评估或必要的修订 （如由任何变更可能引起的偏离）

如果一批产品最终被报废，同样需要进行确认，去确定哪些其他批次，其他产品已经被 这个差错影响。调查行动必须与结论，采取的措施等共同记录于报告中

B. 调研阶段 1

证明是否为明显的分析错误引发



计算错误：重新进行计算，以确定是否为计算错误。如必要，重新进行计算公式验证。

如确定为分析错误，必须在分析文件中改正，改正后的结果为最终结果，不需要进一步调查。



样品调查：检查原始样品 (包括外观,标签及包装,储存条件，并与同时检测的其他批次

样品比较)，同时对取样过程进行调查（包括取样环境、取样方法、取样工具和取样人 员的操作过程等），以确定原始样品是否具有代表性。如确定为样品问题，则初始结果

90

实验室控制系统 GMP实施指南

13 超出标准及超趋势的实验结果调查

及原始样品判为无效，需重新取样测定。



实验室分析过程及相关调查：一般可从以下几方面进行 复核实验文件，确认实验过程及方法正确。

确认实验是在现行版实验方法规定的条件下进行，且系统适用性在有要求的情况下符合

要求。

检查色谱和光谱等原始数据是否有异常或可疑的信息。

确认所用仪器已经过校验且操作正确，包括可能会对结果有影响的仪器软件的核实。 确认正确的操作参数或设定。

确认试剂、溶剂和标准品使用正确，且在效期内，溶液正确制备。

检查玻璃容器中剩余溶液的性状和体积，并检查所用容器是否使用正确并没有可见的污 染。

评估分析师的培训历史和经验。

复测包括原始制备的溶液或进样溶液(如果调查需要)，或者是新制备的溶液或进样溶液 （如果原始溶液不再有效）

评估与 OOS或异常数据同时检测的所有批次。

收集该产品的历史数据（一般推荐该批次附近的10个连续批次的数据或两年的历史数

据）并评估，以确认是否有趋势或相关的问题。

经过以上初始调查，应得到明确的结论证明 OOS/OOE是否为明显的试验室错误引起，

否则，需进行到调研阶段2。

C. 调研阶段 2

进一步的试验室调查，证明异常结果是否为实验室原因或者是产品缺陷

多倍量样品的复检一般应用于此阶段调查，推荐 3 倍量，应提前规定于文件中。此复

检应有专人复核, 适当的话可使用同一仪器设备进行复检。所用样品必须是初始样品 （如

不能证明初始样品无效）。除了中间控制实验室为满足生产程序需要立即进行复检以外，其 他复检必须相关责任人批准后进行。

复检可以有下列两种形式：



对部分数量的初始样品进行复检

应对最初所用的相同的样品进行复检，并重复对样品的处理过程（初始称量），但应由 另一检验员来执行。但是，不能够无限地进行重复，复检的次数应是提前规定于测试方案中。 一旦OOS结果被证实，那么这一批次的产品须被判为不合格品。但如果OOS结果未被证明，

那么可以认为第一次的结果是无效的并由新的数据来取代。



对本批新样品进行检测（再取样）

91

13 超出标准及超趋势的实验结果调查

实验室控制系统 GMP实施指南

当第一次的复检结果显示与原检测的差异很大，则在这种特殊情况下，可能会需要重复 取样。其测试方案也应该同样提前得到批准。



对新数据进行计算

复检时每个样品的检验结果应分别评估，不能平均，以便找到 OOS的可能原因只有在 特殊情况下才可进行求平均值，如生物学检测时。隐藏的可变数值的可能性应作为一个问题 来看待。在特定情况下，应列出对平均值的相对标准偏差（含量均匀度测量）。当检测混合 物时，不允许进行求平均值来处理数据。对同一样品溶液的多次进样结果的平均值可以作为 一个结果数据。如果多次测定所获得的结果有符合标准的也有不符合标准的，那么即使平均 值符合标准也应对OOS 结果进行调查来澄清原因。

D. 结果评估与结论

实验室调查中所有结果的状态都必须记录和评估并为最终的产品放行或否决提供一部 分依据。批产品质量的评估是基于调查结果和是否通过批准。如果发现 OOS数据的某个原

因会导致该数据无效，那么它将不能够用于批次评估。如果OOS 结果显示产品质量是受损

的（即 OOS被证实），那么在做出放行决定时就必须仔细考虑。一个被证实的OOS 结果必 将导致批次产品被拒绝或销毁。在得到一个不确定的结果时，必须做出合适的决定。一般来

说在化学分析中是不允许使用统计学方法的（离群值检测）

如经实验室调查后，确认OOS/OOE的根本原因非实验室原因所致，则应由质量部与生

产部共同进行进一步的调查，如进行偏差处理等行动。质量控制实验室应按要求提供必要的 支持性工作。

E. 纠正和预防措施

必须基于调查的结果而采取预防措施，从而防止更多OOS/OOE结果的发生。首先必须

通过执行合适的措施来更正错误。不合逻辑的影响因素必须消除，从而防止将来发生不必要 的额外的OOS/OOE结果。这对于节约成本也将会有直接影响。在进行趋势分析时，需提及 最迫切需要采取的措施。

F. 趋势追踪

按照要求，必须保留OOS/OOE事件的清晰和完整的记录（可以是纸版或电子版）。对

OOS/OOE结果的追踪活动之一就是定期对有关案例进行回顾。出于评价的目的，一个 OOS/OOE结果并不能看作是一个孤立的、可被替换的，该系统应看作是一个整体。对趋势

的分析可以在早期揭示潜在的风险发生的概率，因此可以预防未来 OOS结果的发生。

应对（产品、设备、方法）趋势进行常规监督来防止OOS/OOE结果的发生。例如，如

果某产品的含量值经常发生超标，那么这可能就是有之前未检测出的生产问题存在的信号。 当一个设备有产生OOS 结果的趋势时，则必须对其进行维修、维护和再校准。如，果对设 备已进行了维护和再校准后发生OOS 结果的频率仍然增加的话，更换设备可以作为最终的

选择。该方法适用于类似的程序。就像案例中所示的，方法可能会被阐述得更为详细。最后， 趋势检查也必须把人员因素考虑进去。如果（OOS/OOE）错误经常是由于员工中某一人而 引起的，那么这个员工可能就需要进行额外的更进一步的培训。

92

实验室控制系统 GMP实施指南

13 超出标准及超趋势的实验结果调查

13.4.3 文件

标准操作规程：必须建立标准操作规程以明确调查的目的、范围、方式、流程及参与者 的职责。

实验室调查报告：用以记录所有的调查过程和结果，必须由相关质量负责人批准。调查 记录至少包括以下几部分：

      

OOS/OOE的描述

原始数据的调查 样品的调查

复检计划及试验结果，如涉及复检

调查结果：应阐明调查的各个方面及其结果，汇总可能性的原因 结论：应阐明结果的有效性

预防性行动：如差错确认为系统问题，为避免相同的 OOS 事例再度发生，则，一系列

预防性行动应确定，并在调查报告中体现，并追踪其实施进展。

所有调查过程中的原始数据和相应实验记录均须作为调查报告的附件保留。

13.7.2 职责的确定：

分析师的职责:

分析师首先有责任得到准确的试验结果，并且必须警惕可能出现的问题。如果系统适用 性试验结果不令人满意，所有的数据必须判定为无效。分析师经核对质量标准确认实验结果 符合要求后，方可报废试验溶液。在明显犯错的情况下，分析师一定不可以故意地继续进行。 如果得到OOS/OOE结果，必须通知主管。在调查过程中，分析师应

实验室负责人的职责:

实验室负责人必须客观的，迅速地，公正的进行实验室调查。可能性的实验室差错必须 立即确认。确保在调查过程中清晰，完整地记录每一步。实验室负责人应追踪调查进程并推 动进展。当实验室调查被确证后，应告知和培训所有相关的分析师。

质量保证部负责人的职责：

    

审批报告和文件。 检查整改措施的执行情况

监控已执行的整改措施和预防措施的有效性和适当性 通过回顾足够的调查数据放行和否决产品。

对于在市批次，一旦确定OOS 结果，应在3 日内报告权威机构，并采取相应的措施。

【实例分析】

HPLC法对一产品某一批进行含量测定，发现两个值中有一个值超出质量标准。

超标结果程序 （OOS结果） SOP 号 ： xx-xx-nnn-vv 93

13 超出标准及超趋势的实验结果调查

实验室控制系统 GMP实施指南

起 始 有 效 yyyy年mm月dd日 附 件 2 页 码 第1页，共2页

日 期 ： ： ：

OOS结果的检查（报告水平1） 样品确认（标签） OOS结果

检测项目 结果

标准规定 结果判定 符合规定 不符合规定 符合规定 未应用

API的含量 96.4%

94.8%

Mean X2=95.6% 95.0~105.0% 检查表

文档

书写/转抄错误 计算错误 ………… ………… 执行

操作偏差 错误的操作 ………… 标准品

是否为正确的标准品 是否处于有效期内 是否正确储存 初始称量是否正确 是否正确稀释 ………… ………… 超标结果程序

（OOS 结果）

是 否

SOP 号

日

期

： ： ： ：

xx-xx-nnn-vv

起 始 有 效 yyyy年mm月dd日 附 件 2

页 码 第 2页，共 2页

检查表

样品

是否为正确的样品 是否正确储存 初始称量是否正确 是否正确稀释 …………

94

是 否 未应用

实验室控制系统 GMP实施指南

13 超出标准及超趋势的实验结果调查

………… 仪器

是否进行过校正 参数是否设置正确 进样是否正确 检测器是否正确 ………… …………

是否进行了系统适用性测试 ………… ………… ………… ………… 判定

仪器评估错误 OOS测试水平2

是 否

措施

根据授权的测试时间表重新进行评估

检验人

日期 签名 测试计划

超标结果程序 （OOS 结果）

Yyyy.mm.dd

xxx

主管 Yyyy.mm.dd

xxx

： ： ： ：

SOP 号 xx-xx-nnn-vv 起 始 有 效 日 期 yyyy年 mm月 dd日 附 件 3

页 码 第1页，共1页

OOS结果的检查（第二阶段的测试计划） 样品确认（标签）

执行OOS 调查（=测试计划） 重复分析（复检） 检测员 测试次数 检验员1 6 检验员2 ………… ………… ………… 仪器 评价 1.仪器 ………… 2.仪器 仪器灵敏度对API有条件限制

…………

试剂 评价 同一试剂 ………… 其它试剂 新流动相 其它

另外一批 对照样品分析

…………

重复取样（再取样）

95

13 超出标准及超趋势的实验结果调查

实验室控制系统 GMP实施指南

取样计划 其它调查 原因

………… …………

该API可能....吸附在表面，因此应复检。使用一个对API有 条件限制的灵敏度系统来......

检验人 主管

日期 签名

yyyy年mm月dd日 yyyy年mm月dd日

xxx xxx

表格-报告阶段 超标结果程序 （OOS结果）

SOP 号 xx-xx-nnn-vv

起 始 有 效 日 期 yyyy年mm月dd日 附 件 4

页 码 第1页，共1页

： ： ： ：

OOS结果的检查（报告水平2） 样品确认（标签） OOS结果

检测项目 结果

标准规定 结果判定

API的含量 96.4%/94.8% 符合/不符合规定

95.0~105.0% X2=95.6% 符合规定

复检 98.2%/99.1%

98.0%/98.3% 98.5%/98.4% X6=98.4% 95.0~105.0% 符合规定

另外一批 98.8%/98.4%

X2=98.6%

放行分析结果 98.4%/98.0% (yyyy年mm月dd日） X2=98.2% 结论 错误原因 不明显的错误

样品 产品 未知 其它

从第一次测定获得的结果是无效的并将被删除。复检获得的值将被作 为结果。本批将被放行。

检测程序将需要修订，并将在评价中注明应使用对API有条件限制的

措施

不灵敏的系统进行测定。

检验人 主管

日期 签名

Yyyy.mm.dd Yyyy.mm.dd xxx xxx

【要点回顾】



OOS系统：是否有关于OOS结果调查的SOP？

96

实验室控制系统 GMP实施指南

13 超出标准及超趋势的实验结果调查



实验室差错（操作者，设备）：如何实施实验室调查和高于实验室调查的正式的官方调 查？

程序相关差错：报告程序如何？ QA是否参与？

   

OOS结果的评估：相关OOS的决定如何作出？ 如何确定原因？

试验结果无效：如何判断试验结果无效？ 谁可以判断试验结果无效？ 改正行动：实施的改正行动如何？

97

14 原始数据的管理 实验室控制系统 GMP实施指南

14

原始数据的管理

本章中涉及以下问题：  原始数据需要保存多长时间？  哪些原始数据需要存档？  原始数据的管理程序及注意事项是什么？  存档的要求是什么？ 【背景介绍】

除中国药品生产质量管理规范对质量控制部原始数据有明确的要求外，下表所列法规中 均有明确的要求。 国家，机构或组织 文件名称 美国食品药品监督管理局 Guide to Inspection of Pharmaceutical Quality （FDA） Control Labs（section 13） 药物质控实验室检查指南中13 章节 欧洲共同体药物评审委员 EU Guidelines to 会(EMEA) Good Manufacturing Practice Medicinal Products for Human and Veterinary Use Part I: Basic Requirements for Medicinal Products， Quality Control 良好的医药和兽药生产质量管理规范，第一部分中的 质量控制 药品检查合作组织 Aide Memoire on Inspection of Quality Control （PIC/S） Laboratories 质量控制实验室检查检查备忘录 Guide to Good Manufacturing Practice for Medicinal Products PART I chapter 6 良好的药品生产质量管理规范，第一部分第六章 加拿大 Good Manufacturing Practice（GMP）Guideline -2009 edition 药品生产质量管理规范指南2009版 相关定义与术语



数据

 数据可定义为论据(Facts)

 数据以多种形式存在 ，纸上的数字或文本, 电子形式的位和节点。



原始数据

原始数据包括工作单、记录、备忘录、笔记或准确的副本，它们是最初观察和活动的结

果，也是对项目，工艺或研究报告改进和评估的必要条件。原始数据可以是纸质形式也可以 是电子形式，但需在操作规程中予以规定。[PIC/S]

98

实验室控制系统 GMP实施指南

14 原始数据的管理

作为过程的结果，原始数据有时以数据库的形式存在，以便容易用不同方式对数据进行 处理和分析



原始数据的类型

 手写原始数据：手工记录一项活动的结果（如 pH值，温度）。

 电子原始数据，包括未被加工的原始数据，加工过的原始数据，以及再加工过

（手工/电子）的原始数据 未被加工原始数据：没有由用户选定参数（如色谱中的 积分参数）约束的数据。 加工过的原始数据：经过用户选定参数（如色谱中的 积分参数）约束的数据。

再加工过（手工/电子）的原始数据：由用户有意识的调整 参数后得到的数据（如增强 的色谱图）。



数据的完整性

数据的完整性是指数据自来源没有发生变化而且没有被无意的或故意的修改，改变或销 毁。



数据完整的重要性

 关系到病人的安全

 报告准确和正确的数据是我们需履行的法律义务  关系到企业和个人的名誉

只有完整的记录可以提供书面证据，证明分析的实际操作。原始数据的管理涉及自原辅 料到成品的检验的各个环节。数据的可靠性、准确性、完整性和可追溯性非常关键。它不仅 是完善的质量保证体系的需要，同时也为审计提供强有力的证据。



如何确保数据的完整性？

 培训并增强全体人员的意识  恰当的控制，包括安全性

 良好的管理体系

14.1 实验室原始数据的范围

【法规要求】

2010版GMP正文：

第二百二十八条 文件

1. 质量控制实验室文件应符合第八章的原则，应有下列详细文件，如： (1) 质量标准；

(2) 取样操作规程和记录；

99

14 原始数据的管理 实验室控制系统 GMP实施指南

(3) 检验操作规程和记录（包括检验记录或实验室工作记事簿）；

(4) 检验报告或证书；

(5) 必要的环境监测操作规程、记录和报告；

(6) 必要的检验方法验证记录；

(7) 仪器校准和设备维护的操作规程及记录。

2. 每批药品的检验记录应包括中间产品、待包装产品和成品的质量检验记录，可追溯该批 药品所有相关的质量检验情况。

【技术要求与实施指导】

14.1.1 实验室记录要求

实验室检验记录应包括所有实验的完整数据，以确保符合已确定的质量标准。



样品描述，包括样品名称或来源、批号或其他区分代号、取样日期，以及样品数量和样

品的接收日期。

  

试验中所用标准品的描述

试验中的样品称重或量取的量，标准品、试剂、标准溶液的制备和检验。

实验过程中产生的所有数据，包括来自分析仪器的图表、图谱和曲线图，以及其他能确

认物料和产品的数据。

  

与实验相关的所有计算。例如：度量单位，校正因子。 实验结果以及与接收标准的比对结果的描述。

实验者的签名以及实验日期，复核人签名签日期。复核人需对实验的准确性、完整性和

与质量标准的符合性进行确认。

14.1.2 数据完整性

以下方面的数据也应保持完整:

   

已确定分析方法的任何修改。

分析仪器，设备，计量器具和记录设施的周期性校验。 所有稳定性实验。 超出标准的实验室调查

14.1.3 数据记录形式

实验室的原始数据通常采用以下三种形式记录数据

  

检验记录

实验室日志，包括仪器使用记录，色谱柱使用记录，标准品使用记录等 电子数据处理系统、照相技术或其它可靠方式记录数据资料。

100

实验室控制系统 GMP实施指南

14 原始数据的管理

14.2 实验室记录的设计

【法规要求】

2010版GMP正文：

第一百六十五条 与本规范有关的每项活动均应有记录，以保证产品生产、质量控制和质量

保证等活动可以追溯。记录应留有数据填写的足够空格。记录应及时填写，内容真实，字迹 清晰、易读，不易擦掉。

【技术要求与实施指导】



所有记录的形式在考虑其目的，功能和细节的基础上，应清晰易读以便于复核和审核。

文件避免手写，除非按需要填写数据。记录填写处应留有的足够空格。



记录体系应满足不同需求。检验记录FDA仍倾向使用预先编号装订成册的实验室工作

记事簿。然而其他记录方式因具有较强的灵活性且管理安全也是可以的。例如以单页为 基础的检验记录，单页的检验记录需受控，系统收集后按顺序编号。



如检验记录的母版文件为电子版方式，记录中的计算部分需经验证或确认。母版文件需

在验证或确认报告经批准后方可使用。

14.3 实验室记录的填写和复核

【法规要求】

2010版GMP正文：

第一百六十五条 与本规范有关的每项活动均应有记录，以保证产品生产、质量控制和质量 保证等活动可以追溯。记录应留有数据填写的足够空格。记录应及时填写，内容真实，字迹

清晰、易读，不易擦掉。

第一百六十六条 应尽可能采用生产和检验设备自动打印的记录、图谱和曲线图等，并标明

产品或样品的名称、批号和记录设备的信息，操作人应签注姓名和日期。

第一百六十七条 记录应保持清洁，不得撕毁和任意涂改。记录填写的任何更改都应签注姓

名和日期，并使原有信息仍清晰可辨，必要时，应说明更改的理由。记录如需重新誊写，则 原有记录不得销毁，而应作为重新誊写记录的附件保存。

第一百六十九条 如使用电子数据处理系统、照相技术或其它可靠方式记录数据资料，应有

所用系统的详细规程；记录的准确性应经过核对。使用电子数据处理系统的，只有经受权的 人员方可输入或更改数据，更改和删除情况应有记录；应使用密码或其它方式来控制系统的 登录；关键数据输入后，应由他人独立进行复核。用电子方法保存的批记录，应采用磁带、 缩微胶卷、纸质副本或其它方法进行备份，以确保记录的安全，且数据资料在保存期内应便 于查阅。

101

14 原始数据的管理

实验室控制系统 GMP实施指南

【实施指导】

14.3.1 实验室记录的填写



记录应保持清洁，不得撕毁和任意涂改。记录填写的任何更改都应须遵循以下原则：在

错误的地方画一条横线并使原有信息仍清晰可辨，签注姓名和日期。必要时，应说明更 改的理由。记录不得使用铅笔和水溶性墨水填写。禁止用涂改液和橡皮。



在实验过程中应及时记录实验过程和结果，所有的观察结果都必须仔细记录。追溯性记

录和提前记录都是不允许的。



检验设备自动打印的记录、图谱和曲线图等，并标明产品或样品的名称、批号和记录

设备的信息，操作人应签注姓名和日期。

如打印出的原始数据记录纸张很小（如天平的打印记录）时， 应贴在相关记录的前

面或者背面。同时在打印记录上签名，并标明产品或样品的名称、批号和记录设备的信息， 操作人应签注姓名和日期。

 

活页文件必须系统收集并统一编号。

分析记录和报告应清晰，完整，真实，准确。文件可以是纸版，电子版或者图片形式，

但是在存档期间必须容易准确检索到。

 

原始记录不应留有空白区域或空白页。 仪器的维护和使用日志应符合下列要求：

 重要的仪器应有日志，它用于该仪器的验证、校验、维护、的操作，同时应包

括操作日期和操作人。日志还应记录仪器的使用情况，如使用日期，样品名称

和批号。如有必要，应该包括仪器的使用时间。对于仪器的验证、校验、维护 和操作，操作人员应在操作中时时记录以表明该项工作已进行。

 使用子数据处理系统的，只有经授权的人员方可输入或更改数据，更改和删除

情况应有记录；应使用密码或其他方式来控制系统的登录；关键数据输入后， 应由他人独立进行复核。用电子方法保存的批记录，应采用磁带、缩微胶卷、 纸质副本或其他方法进行备份，以确保记录的安全，且数据资料在保存期内便 于查阅

14.3.2 记录的复核

 

原始数据需由第二个有资质的人进行复核，并签名签日期。

复核过程中如果发现错误，复核人需要与分析师进行讨论并更正。修改需由分析师签名

签日期，如需要还需注明更改原因。



实验室包括仪器使用记录，色谱柱使用记录，标准品使用记录等，如必要，可由责任人

员定期复核。



检验记录的复核必须由第二个人根据批准的操作规程和质量标准进行。复核的内容应在

相应的操作规程规定。

102

实验室控制系统 GMP实施指南

14 原始数据的管理

14.3.3 记录更正要求

对于记录的更正，可采用必要时加注更改理由的方式。也可采用所有更改必须说明理由 的方式。为避免文字描述内容过多，可使用缩写形式表示，这种缩写形式应在相应的操作程 序中明确规定。

记录如因污损需重新誊写，需经批准同意后方可进行。原有记录不得销毁，而应作为重 新誊写记录的附件保存。同时还应说明誊写的原因。原则上记录不应进行誊写。

14.4 记录的管理

【法规要求】

2010版GMP正文：

第一百六十八条 每批药品应有批记录，包括批生产记录、批包装记录、批检验记录和药品

放行审核记录等与本批产品有关的记录。批记录应由质量管理部门负责管理，至少保存至药 品有效期后一年。

质量标准、工艺规程、操作规程、稳定性考察、确认、验证、变更等其它重要文件应长期保 存。

第二百二十八条 文件

3. 宜采用便于趋势分析的方法保存某些数据（如检验数据、环境监测数据、制药用水的微 生物监测数据）。

4. 除与批记录相关的资料信息外，还应保存其它原始资料，如实验室或记录，以方便查阅。

【实施指导】

 

实验室应建立有关原始数据的管理程序。 记录的保存

 所有的原始数据记录必须保留，数据不得随意写在零散的纸片上或记事贴上。  通常不允许使用热敏纸，如果不可避免，可复印并在复印件上签名和签日期。  如果原始数据没有作为最终实验结果出具，它仍需保存并注明其结果不被提供

的原因。这些原因应来源于相应的调查。  应建立相应的规程规定所有记录的保存期。记录必需采用有序的安全的方式保

存。记录的储存区域，应限制人员进入，并在规定保存期内受权人能够容易查

阅。

 对于某些数据如环境监测数据、制药用水的微生物和理化监测数据，宜对数据

进行趋势分析并保存趋势图。

 所有记录在审核批准后，原件均可在专门区域集中存档。由专门人员进行管理。

103

14 原始数据的管理

实验室控制系统 GMP实施指南

【实例分析】

记录是药品生产和质量管理过程中最直接最真实的反应，因此在GMP 检查过程中非常

重视记录的审查。下面是FDA在2010年1月28日给国内某制药企业的警告信: 在2009年

7月检查, 2009年9月回复FDA, 但未能满足要求.主要是三点问题:

（1） 质量部门没有保证原料进行过适当的测试和结果报告。

比如: 采用2009年3月5日Y584-090301批的IR图谱对进厂的Y564-090401和

Y584-090701进行放行。这样的方法是不能被接受的, 同时也使人严重怀疑该工厂实验室进

行分析活动的完整性和可靠性。

（2） 质量部门没有实施相关职责保证工厂生产的API 符合GMP要求和已建立的质量

和纯度要求。

比如, 质量部门没有发现实验室人员提交的 IR图谱, 没有代表进厂物料的真实结果. 你们的反馈没有关注到质量部门是否有能力控制和发现实验室文件的操纵或改变, 所以是

不充分的。

你们2009-09-02的回复中, 表示你们已经解雇了那个实验人员, 也表示你们已经将原来

的 QC经理和质量经理从质量团队中调离. 同时你们也发现了另一个类似问题, LOT

Y535-090601. 但因为你们的答复中没有提供一个更全面的计划来确保所有有关API质量和 纯度数据安全性的计划, 所以也是不全面的。

（3）没有对日常测试中原始数据处理进行充分控制

比如, 你们工厂实验室人员可以修改打印与IR图谱有关的原始数据, 我们担心缺乏安

全控制的系统允许这样的行为。

你们回复中没有表示你们工厂将如何确保原始分析数据的完整性, 只是表示采购计算

机服务器用来保存和打印 IR图谱。

请提供所涉及的新系统的配置信息, 相关新的或变更程序, 和你们如何确认系统的计划。

104

实验室控制系统 GMP实施指南

15 物料及产品的检验

15 物料及产品的检验

本章中涉及以下问题：  质量标准的制定原则  检验的注意事项。  检验报告书的管理。  委托检验的要求。 【法规要求】

2010版GMP正文：

第六章 物料与产品 第一节 原则

第一百零二条 药品生产所用的原辅料、与药品直接接触的包装材料应符合相应的质量标准。 药品上直接印字所用油墨应符合食用标准要求。 进口原辅料应符合国家相关的进口管理规定。

第一百零七条 物料接收和成品生产后应及时按待验管理，直至放行。 2010版GMP指南中第六章（物料与产品）第二节 原辅料

第一百一十三条 只有经质量管理部门批准放行并在有效期或复验期内的原辅料方可使用。

第一百一十四条 原辅料应按有效期或复验期贮存。贮存期内，如发现对质量有不良影响的

特殊情况，应进行复验。 第八章 文件管理 第二节质量标准

第一百六十四条 物料和成品应有经批准的现行质量标准；必要时，中间产品或待包装产品 也应有质量标准。

第一百六十五条 物料的质量标准一般应包括：

(一) 物料的基本信息：

1.企业统一指定的物料名称和内部使用的物料代码； 2.质量标准的依据； 3.经批准的供应商；

4.印刷包装材料的实样或样稿。

(二) 取样、检验方法或相关操作规程编号；

(三) 定性和定量的限度要求；

(四) 贮存条件和注意事项；

105

15 物料及产品的检验 实验室控制系统 GMP实施指南

(五) 有效期或复验期。

第一百六十六条 外购或外销的中间产品和待包装产品应有质量标准；如果中间产品的检验

结果用于成品的质量评价，则应制定与成品质量标准相对应的中间产品质量标准。 第一百六十五条 成品的质量标准应包括：

(一) 产品名称以及产品代码；

(二) 对应的产品处方编号(如有)；

(三) 产品规格和包装规格；

(四) 取样、检验方法或相关操作规程编号；

(五)定性和定量的限度要求； (六)贮存条件和注意事项； (七)有效期。

第十章 质量控制与质量保证

第一节质量控制实验室管理

第二百一十七条质量控制实验室的人员、设施、设备应与产品性质和生产规模相适应。 企业通常不得进行委托检验，确需委托检验的，应按第十一章中委托检验部分的规定，委托 外部实验室进行检验，但应在检验报告中予以说明。

第二百二十三条 物料和不同生产阶段产品的检验应至少符合以下要求：

(一) 企业应确保药品按照注册批准的方法进行全项检验。

(二) 符合下列情形之一的，应对检验方法进行验证：

1. 采用新的检验方法； 2. 检验方法需变更的；

3. 采用《中华人民共和国药典》及其他法定标准未收载的检验方法； 4. 法规规定的其他需要验证的检验方法。

(三) 对不需要进行验证的检验方法，企业应对检验方法进行确认，以确保检验数据准确、 可靠。

(四) 检验应有书面操作规程，规定所用方法、仪器和设备，检验操作规程的内容应与经确 认或验证的检验方法一致。

(五) 检验应有可追溯的记录并应复核，确保结果与记录一致。所有计算均应严格核对。

(六) 检验记录应至少包括以下内容：

1.产品或物料的名称、剂型、规格、批号或供货批号，必要时注明供应商和生产商（如不同） 的名称或来源；

106

实验室控制系统 GMP实施指南

15 物料及产品的检验

2.依据的质量标准和检验操作规程； 3.检验所用的仪器或设备的型号和编号；

4.检验所用的试液和培养基的配制批号、对照品或标准品的来源和批号； 5.检验所用动物的相关信息；

6.检验过程，包括对照品溶液的配制、各项具体的检验操作、必要的环境温湿度； 7.检验结果，包括观察情况、计算和图谱或曲线图，以及依据的检验报告编号； 8.检验日期；

9.检验人员的签名和日期；

10.检验、计算复核人员的签名和日期。

(七) 所有中间控制（包括生产人员所进行的中间控制），均应按经质量管理部门批准的方 法进行，检验应有记录。

(八) 应对实验室容量分析用玻璃仪器、试剂、试液、对照品以及培养基进行质量检查。

(九) 必要时应将检验用实验动物在使用前进行检验或隔离检疫。饲养和管理应符合相关的

实验动物管理规定。动物应有标识，并应保存使用的历史记录。 第二节 物料和产品放行

第二百二十八条 应分别建立物料和产品批准放行的操作规程，明确批准放行的标准、职责，

并有相应的记录。

第二百二十九条 物料的放行

1. 物料的质量评价内容应至少包括生产商的检验报告、物料包装完整性、 密封性的检查情况和检验结果。

2. 物料的质量评价应有明确的结论，如批准放行、不合格或其它决定。 3. 物料的放行应由指定人员签名批准放行。 第二百三十条 产品的放行应至少符合以下要求：

(一) 在批准放行前，应对每批药品进行质量评价，保证药品及其生产应符合注册和本规范 要求，并确认以下各项内容：

1.主要生产工艺和检验方法经过验证；

2.已完成所有必需的检查、检验，并综合考虑实际生产条件和生产记录； 3.所有必需的生产和质量控制均已完成并经相关主管人员签名；

4.变更已按照相关规程处理完毕，需要经药品监督管理部门批准的变更已得到批准； 5.对变更或偏差已完成所有必要的取样、检查、检验和审核；

6.

所有与该批产品有关的偏差均已有明确的解释或说明，或者已经过彻底调查和适当处理；

107

15 物料及产品的检验 实验室控制系统 GMP实施指南

如偏差还涉及其他批次产品，应一并处理。

(二) 药品的质量评价应有明确的结论，如批准放行、不合格或其他决定。

(三) 每批药品均应由质量受权人签名批准放行。

(四) 疫苗类制品、血液制品、用于血源筛查的体外诊断试剂以及国家药品监督管理部门规

定的其他生物制品放行前还应取得批签发合格证明。

【背景介绍】



每批物料和成品均需由质量控制部进行检验并出具检验报告书。检验报告书中的结论作

为物料和成品放行的依据之一。只有经质量管理部门批准放行并在有效期或复验期内的 原辅料方可使用，成品只有在质量受权人批准放行后方可销售。



对于中间产品或待包装产品的检验可由生产人员进行，也可由中间控制实验室或质量控

制部实验室进行。具体可由企业自己规定，但必须在相关文件中明确规定。



本章节主要描述质量标准（包括物料，中间产品/待包装产品，以及成品）的制定，检

验和检验报告书的相关要求以及委托检验。



本章节所提及的术语含义如下

 物料：指原料、辅料和包装材料等。

 产品：包括药品的中间产品、待包装产品和成品。

 中间产品：指完成部分加工步骤的产品，尚需进一步加工方可成为待包装产品。  待包装产品：尚未进行包装但已完成所有其他加工工序的产品。  成品：已完成所有生产操作步骤和最终包装的产品。

 复验期：原辅料、包装材料贮存一定时间后，为确保其仍适用于预定用途，由

企业确定的需重新检验的日期。

 中间控制：也称过程控制，指为确保产品符合有关标准，生产中对工艺过程加

以监控，以便在必要时进行调节而做的各项检查。可将对环境或设备控制视作 中间控制的一部分。

 放行：对一批物料或产品进行质量评价，做出批准使用或投放市场或其他决定

的操作。

【实施指导】

15.1 质量标准的管理

质量标准不仅是检验的依据，而且是质量评价的基础。在完成物料，中间产品和成品的 检验后，通过对检验结果与质量标准的评估，并在完成其他项目的质量评价（详见2010版 GMP 指南中第十章中第二节中第二百二十九和二百三十条）后，才能得出批准放行、不合

格或其他决定。因此，必须制定质量标准。

108

实验室控制系统 GMP实施指南

15 物料及产品的检验

企业应建立质量标准管理的操作规程，包括质量标准的设计、制定、审核、批准 与发放。 质量标准的起草、修订、审核、批准、替换或撤销、复制、保管和销毁等应按操作规程管理， 并有相应的分发、撤销、复制、销毁记录。

15.1.1 质量标准的设计与制定

A. 设计与制定质量标准的一般原则

 

质量标准的制定必须满足2010版GMP 指南中第八章中第二节中有关质量标准的要求。

企业在实际实施时, 可以编写一份满足 GMP 规范中所有要求的质量标准, 也可以制定

几份文件来满足所有的要求。

例如：某企业编订的原料质量标准包含如下文件：

 原料取样操作规程

 供应商的批准程序及批准的供应商目录。

 检验方法，包括物料名称和内部使用的物料代码、质量标准的依据、检验项目、

检验方法、接受限度、有效期或复验期、以及贮存条件和注意事项。  检验操作规程



检验方法应与经确认或验证的检验方法一致。

B. 物料的质量标准



物料的检验方法应不低于注册/申报标准，也可以增加注册/申报标准以外的附加检验项

目。

  

药品上直接印字所用油墨应符合食用标准要求。 进口原辅料应符合国家相关的进口管理规定。 物料的复验期

原辅料、包装材料贮存一定时间后，为确保其仍适用于预定用途，由企业决定是否进行 复验。对于复验，应建立相应的操作规程确定复验的程序和原则。根据复验结果、物料的稳 定性数据、运输与贮存条件等因素进行评估，来确定物料延长的使用期限。如果物料具有有 效期，复验后延长的期限不得超过有效期。

C. 中间产品和待包装产品的质量标准



外购或外销的中间产品和待包装产品应有质量标准；如果中间产品的检验结果用于成品

的质量评价，则应制定与成品质量标准相对应的中间产品质量标准。



中间产品和待包装产品的质量控制, 是为确保产品符合有关标准，而对生产工艺过程加

以监控以便在必要时进行调节而做的各项检查。因此中间产品和待包装产品的质量标准 应根据产品开发和生产验证过程中的数据或以往的生产数据来确定，同时还需综合考虑 所生产产品的特性，反应类型以及控制工序对产品质量影响等因素。

例如：外观、重量差异、硬度、脆碎度和崩解时限是影响某片剂成品质量的关键因素。 因此在压片的开始，中间每隔 60分钟以及结束时，需进行外观、重量差异、硬度、脆碎度

109

15 物料及产品的检验

实验室控制系统 GMP实施指南

和崩解时限的检查，检验方法和接受标准均在批文件中规定。当检验结果接近接受标准或与 以往趋势不同时，则通知生产进行相应的调节。

对于原料药，前期生产的中间体控制标准可以松一些，越接近成品，中间控制的标准越 严格。



中间产品和待包装产品的检验方法

中间产品和待包装产品的检验方法可与产品放行的检验方法相同，但中间控制的接受标 准通常比放行标准严格. 例如：含量的放行接受限度为90.0%-110.0% ，而中间控制的接受

限度可规定为95.%-105.0%。

中间产品和待包装产品的检验方法可与产品放行的检验方法不同。例如：某企业成品放 行时需按要求进行溶出度的检测，而在中间控制时，规定进行崩解时限的检查。



取样方法

中间产品和待包装产品的包装与成品的包装不同。成品通常采用独立的小包装如铝箔包 装和10毫升瓶装，而中间产品和待包装产品大多采用罐装，桶装或大的双层塑料袋包装, 因 此需对中间产品和待包装产品的取样方法进行明确规定。



贮存条件和贮存时间

如果中间产品和待包装产品会在生产过程中需要放置一段时间，可通过稳定性研究确认 中间产品和待包装产品的贮存条件和贮存时间（参见第十三章节）。

如果中间产品和待包装产品直接进行下一阶段的生产而没有等待时间时，可不对贮存条 件和贮存时间进行确认。若生产过程中出现偏差而无法直接进行下一阶段的生产时，必须通 过偏差调查程序进行充分的评估。

D. 成品质量标准

 

成品的检验方法应不低于注册/申报标准。

如适用，质量标准中可增加产品的化学名称, 中英文对照, 化学分子式, 分子量以及安

全防护等内容。

15.1.2 质量标准的审核与批准

所有质量标准需经过质量管理部门审核与批准，包括由生产人员进行中间控制所采用的 质量标准。

15.1.3 质量标准的分发、撤销、复制、销毁

质量标准的分发、撤销、复制、销毁需受控并应有相应的记录。 所用质量标准必须是经批准的现行版本。

110

实验室控制系统 GMP实施指南

15 物料及产品的检验

15.2 检验

15.2.1 检验样品：

根据相应的取样规程, 对物料, 中间产品或待包装产品, 成品进行取样（详见第 7章）, 并将检验样品在规定条件下贮存。

备注：物料接收和成品生产后应及时按待验管理，直至放行。



建立相应的检验书面操作规程，规定所用方法、仪器和设备，检验操作规程的内容应与

经确认或验证的检验方法一致。



依据批准的质量标准和操作规程进行检验，检验过程中需关注人、机、料、法、环五个

方面，并及时在检验记录和实验室日志上记录。并出具检验结果。备注：每批物料和成 品都必须按照注册批准的方法进行全项检验。

 人，指检验人员, 只有经过培训和考核通过的检验人员方可独立进行实验。

 机，指分析仪器包括容量分析用玻璃仪器, 只有通过验证和校验且在校验周期

内的分析仪器方可使用。

 料，包括检验样品、试剂、试液、对照品以及培养基。在实验过程中应严格遵

守相应的规程。

 法，指检验方法。 检验方法必须是批准的现行版本。

 环，指环境。在实验过程中应严格遵守相关要求。如在天平使用过程中，应关

闭防风罩避免气流的影响。

其中，检验记录中的内容应涵盖2010版GMP指南中第十章第一节第二百二十三条中

的要求。检验记录和实验室日志的填写应符合本书第十五章原始数据的管理中的相关规定。 数值的修约应遵守国家标准 GB8170-87 数值修约规则。



检验人员出具检验结果后，与质量标准中规定的接受标准进行比对，并作出该检验项目

合格或不合格的评定。实验结束后，检验记录交由有资质的第二个人进行复核，确保结 果与记录一致（详见本书第十五章原始数据的管理）。如检验结果超出标出，应按本书 第十四章节进行超标结果的调查。

15.3 检验报告书的管理



应建立检验报告书的相关操作规程，包括检验报告书的内容、格式、准备、审核与批准、

发放的相关程序。



检验报告书的内容要求

物料检验报告书一般包括：物料的品名、生产日期、复检日期、检验依据、物料号、来 源、批号、分析号、批量、供应商的检验报告号、实验项目、实验结果、实验要求、结论。 为便于追溯和管理，可增加报告书的版本号。

产品检验报告书一般包括：产品的品名、批号、规格、生产日期、产品编号、有效期、 包装形式、检验依据、批量、分析号、实验项目，实验要求、实验结果、结论。为便于追溯 和管理，可增加报告书的版本号。

111

15 物料及产品的检验

实验室控制系统 GMP实施指南

物料和成品完成全项检验后，使用批准的报告书模板依据检验记录和相关信息出具检验 报告书。如 委托外部实验室进行检验，应在检验报告中予以说明。

中间产品或待包装产品是否出具检验报告书可由企业根据自身管理模式确定，并应在相 应规程中明确规定。



检验报告书的审核批准

检验报告书只有经过质量控制部负责人或其受权人审核批准后方可发放。

物料检验报告书：质量控制部可依据生产商的检验报告、物料包装完整性、密封性的检 查情况和自己的检验结果出具检验报告书。在检验报告书上需标明“符合要求”或“不符合 要求”的结论。经质量管理负责人或质量控制部负责人及其受权人签名批准放行后，物料可 被放行使用。物料检验报告书是物料放行的重要依据。

产品检验报告书：检验报告书经过质量控制部负责人或其受权人审核批准后，交给负责 放行的部门。产品检验报告书具有一定的法律效力，因此报告书中的数据必须正确。

15.4 委托检验

【法规要求】

2010版GMP正文：

第十章 质量控制与质量保证

第一节质量控制实验室管理

第二百一十七条质量控制实验室的人员、设施、设备应与产品性质和生产规模相适应。 企业通常不得进行委托检验，确需委托检验的，应按第十一章中委托检验部分的规定，委托 外部实验室进行检验，但应在检验报告中予以说明。 第十一章 委托生产与委托检验 第一节 原则

第二百七十八条 为确保委托生产产品的质量和委托检验的准确性和可靠性，委托方和受托

方必须签订书面合同，明确规定各方责任、委托生产或委托检验的内容及相关的技术事项。 第二百七十九条 委托生产或委托检验的所有活动，包括在技术或其他方面拟采取的任何变

更，均应符合药品生产许可和注册的有关要求。 第二节 委托方

第二百八十条 委托方应对受托方进行评估，对受托方的条件、技术水平、质量管理情况进 行现场考核，确认其具有完成受托工作的能力，并能保证符合本规范的要求。

第二百八十一条 委托方应向受托方提供所有必要的资料，以使受托方能够按药品注册和其 他法定要求正确实施所委托的操作。

委托方应使受托方充分了解与产品或操作相关的各种问题，包括产品或操作对受托方的环

112

实验室控制系统 GMP实施指南

15 物料及产品的检验

境、厂房、设备、人员及其他物料或产品可能造成的危害。 第二百八十 二条 委托方应对受托生产或检验的全过程进行监督。

第二百八十 三条 委托方应确保物料和产品符合相应的质量标准。

第三节 受托方

第二百八十 四条 受托方必须具备足够的厂房、设备、知识和经验以及人员，满足委托方

所委托的生产或检验工作的要求。

第二百八十 五条 受托方应确保所收到委托方提供的物料、中间产品和待包装产品适用于预 定用途。

第二百八十 六条 受托方不得从事对委托生产或检验的产品质量有不利影响的活动。

第四节 合同

第二百八十 七条 委托方与受托方之间签订的合同应详细规定各自的产品生产和控制职责， 其中的技术性条款应由具有制药技术、检验专业知识和熟悉本规范的主管人员拟订。委托生

产及检验的各项工作必须符合药品生产许可和药品注册的有关要求并经双方同意。 第二百八十 八条 合同应详细规定质量受权人批准放行每批药品的程序，确保每批产品都已

按药品注册的要求完成生产和检验。

第二百八十 九条 合同应规定何方负责物料的采购、检验、放行、生产和质量控制（包括

中间控制），还应规定何方负责取样和检验。

在委托检验的情况下，合同应规定受托方是否在委托方的厂房内取样。

第二百九十条 合同应规定由受托方保存的生产、检验和发运记录及样品，委托方应能随时 调阅或检查；出现投诉、怀疑产品有质量缺陷或召回时，委托方应能方便地查阅所有与评价 产品质量相关的记录。

第二百九十一条 合同应明确规定委托方可以对受托方进行检查或现场质量审计。

第二百九十二条委托检验合同应明确受托方有义务接受药品监督管理部门检查。

 

除 GMP 要求外，药品管理部门分别出台相关要求对委托检验进行限制： (国食药监安[2004]108号) 关于药品GMP认证过程中有关具体事宜的通知

四、药品生产企业对放行出厂的制剂产品必须按药品标准项下的规定完成全部检验项目。 除动物试验暂可委托检验外，其余各检验项目不得委托其他单位进行。 菌、疫苗制品的动 物试验不得委托检验。对于已通过GMP认证的动物试验允许委托检验的菌、疫苗制品企业

（或车间)，应在2004年12月31日前整改到位。

药品生产企业在对进厂原辅料、包装材料的检验中，如遇使用频次较少的大型检验

仪器设备（如核磁、红外等)，相应的检验项目可以向具有资质的单位进行委托检验。 上述检验项目如有委托行为，受托方应相对稳定，有关委托情况（包括变更受托方)

须报省级药品监督管理部门备案。企业在申请药品 GMP 认证时，有关委托协议复印件须加 盖本企业公章随申报资料一并上报。在生产活动中，企业应将委托行为纳入药品 GMP 自检 重点范畴。各级药品监督管理部门须对有药品检验委托行为的企业加强药品GMP监督检查。

113

15 物料及产品的检验

实验室控制系统 GMP实施指南

 京药监安2009 [40号] 北京市药品监督管理局 关于加强药品生产企业检验工作的通知

114

实验室控制系统 GMP实施指南

15 物料及产品的检验

【实施指导】

15.4.1 原则

 

委托检验必须根据现行法规要求进行。

委托检验必须明确界定检验内容和职责，经双方同意并严格控制，委托方和受托方必须

签订书面合同，明确规定各方的职责。合同必须明确说明质量授权人在批准放行销售每 一批产品时， 如何履行其全部职责。



药品生产企业对本企业放行出厂的产品（包括制剂和原料药）必须按药品标准项下的规

定，自行完成所有检验项目。除动物试验暂可委托外，菌、疫苗制品的动物试验除外）， 其余各检验项目不得委托其他单位进行。



委托检验的所有活动，包括在技术或其他方面拟采取的任何变更，均应符合有关药品注

册批准的要求及合同要求。



对于委托方提供质量标准的检验，如果检验方法不是药典等收载的通用方法，应该评估

是否需要方法转移。



药品生产企业委托检验，应保持受托方相对稳定，委托检验（包括变更受托方）应按相

关规定在药品监督部门备案



只有合同生效期内所作的委托检验结果是有效的。

15.4.2 应用范围



委托方应遵照相应法规执行，例如由于实验室条件（能力容量，仪器、试剂的短缺）及

人员资格的限制，或仪器发生故障不能满足正常工作时，可以考虑对原辅料，包装材料

115

15 物料及产品的检验

实验室控制系统 GMP实施指南

放行产品部分实验项目等的委托检验



委托检验的受托方可以使国家或地方药品检验所，，或第三方具有检验资质的机构或企 业。主要看其检验仪器是否经过计量校验（生产企业和药检所在这方面是强制执行的）， 是否处于良好工作状态，人员是否具备要求的技术水平，质量管理水平是否符合 GMP 法规要求等。



所有实验样品均可根据法规要求进行委托检验，其中包括原辅料检验，放行产品的动物 试验，包装材料检验，稳定性产品储存及检验等等。

16.4.3 职责 A. 委托方



应负责对受托方进行评估，包括资质、实验室条件、仪器设备的计量校验、人员技术水

平、质量管理情况进行详细考察，确认其具备完成委托工作的能力，确认采用委托检验 的方式仍能保证遵照执行本规范阐述的原则和要求。



委托方应向受托方提供所有必要的资料，例如，试验方法和操作指南，样品贮存和运输

条件，试剂的规格，标准品来源及储存条件等等，以使受托方能够按所要求的标准和其 他法定要求正确实施所委托的操作，委托方应让受托方充分了解与产品和检验相关的各 种问题，包括产品或操作有可能对受托方的分析设备，人员及其他造成的危害

  

委托方，必要的时候应对受托方进行方法转移，并在检验的全过程进行指导和监督 委托方应确保受托方接到的所有实验样品，均按照合理的取样规则取样，具有代表性。 委托方应确保按照所要求的条件贮藏和运输样品

如对记录格式有特别需求，委托方必须向受托方提供所要求的记录格式

B. 受托方



受托方应有相应的资质，必须具备足够的实验室空间，相应的分析设备，具备相应知识

和经验的人员，以确保完成委托方所委托的检验工作

 

如需要，受托方亦可按合同要求，依据合理的取样原则取样，保证样品具有代表性 受托方应确保所有收到的实验样品（包括初始物料，中间产品，待包装产品和成品）和

标准品/试剂按要求妥善保管，并用于预定用途

 

不得从事任何可能对委托方检验的产品质量有不利影响的活动

对于检验过程中出现的不符合规定的结果，受托方有义务按合同要求及时通知委托方，

并进行相应的调查，同时将调查结果反馈委托方



对于合同实施过程中，出现其他偏离合同要求的情况，受托方亦应按要求通知委托方，

并作相应的调查。

 

受托方有义务接受委托方的审计

受托方应对委托方提供的内控检验方法及数据实施保密措施，不得泄露或作其他用途

16.4.4 受托方的选定



委托方应根据实验需求，挑选有资质的实验室，并由质量部门组织进行现场考察，包括

116

实验室控制系统 GMP实施指南

15 物料及产品的检验

实验室的组织结构，资质证书，实验条件、仪器管理现状，校验/使用历史，人员资质 和培训，试剂管理和标准品溶液的管理等。审计时，需注意现场的操作与批准生效的管 理程序的一致性。根据审计结果出具现场审计报告，并由质量管理部门相关负责人批准。



就实验方案的细节同候选的合同实验室进行交流探讨，以确定它具有条件按质按量完成 试验

15.4.5 合同签订



委托方与受托方之间应签订合同（包括商业条款及质量协议），详细规定各自的控制职

责，其中的技术性条款应由具有检验技术知识和熟悉本规范的主管人员拟定，委托检验 的各项工作必须符合质量标准的要求并应双方同意。



合同应详细规定质量授权人批准放行的方式，确保每批产品都已按约定的质量标准的要

求或合同规定完成检验。



合同应阐明何方负责试剂、标准品的采购，批准放行使用，同时也应明确何方负责取样。

在委托检验的情况下，合同应阐明受托方是否在委托方的厂房内取样，或有委托方送样。



原始记录及数据的保存，样品的返回及报废程序应在合同中明确规定在委托方质量缺陷

处理或药品召回处理的操作规程中应详细规定，出现投诉或怀疑有缺陷是，委托方必须 能够方便的查阅所有与评价产品质量相关的记录。

  

合同应允许委托方对受托方进行检查或质量审计。

委托检验合同应明确受托方同意接受药品监督管理部门检查。 委托检验合同应由质量部负责人，工厂相关负责人批准。

15.4.6 合同实施



方法转移：如果委托方提供检验方法不是药典或其他国家法定标准收载的通用的实验方

法均需进行方法转移，以确认受托方完全由能力独立完成检验。方法转移应按照双方签 署的转移草案执行，并出具方法转移报告。只有方法转移成功后才能进行合同检验。制 剂



方法确认：对于药典和国标收载的通用的试验方法，应进行方法确认，接受标准由双方

共同建立明确

 

如为受托方提供标准和方法，应获得委托方的确认和批准。

样品的准备和运输：样品应按要求准备，运输时应保证运输条件符合规定，如为温度/

湿度等因素敏感产品，建议实时监控运输条件，其数据应附于分析报告中作为参考



样品的储存：受托方应按照要求储存接受到的样品。对于温湿度敏感产品，其储存条件

的数据也需要提供给委托方作为结果的一部分。



实验：受托方应按照规定的方法进行检验和填写实验记录，如使用电子系统进行公式计

算，需提前进行公式验证，并有文件记录及批准。



实验报告：受托方应按要求向委托方出具实验报告，报告应加盖检验公章，其原始数据

应按法规或合同要求保留。

15.4.7 结果评估



受托方一旦发现超出质量标准的分析结果，必须及时通知委托方，共同进行实验室调查，

117

15 物料及产品的检验

实验室控制系统 GMP实施指南

并按要求提供调查报告给委托方。



受托方检验结果与法定抽样结果或复核结果不一致时， 应双方协商解决。

15.4.8 实验后样品处理

所有试验后的样品应按照合同要求处理。对于有特殊安全需要的样品，按照相关规定处 理。

【实例分析】

例 1：每批物料或产品均应按照注册批准的方法进行全项检验。下面是FDA 在2010年 1月28日给国内某制药企业的警告信中提出的一个问题：

质量部门没有保证原料进行过适当的测试和结果报告。比如: 采用2009年3月5日 Y584-090301批的IR图谱对进厂的Y564-090401和Y584-090701进行放行。

这样的方法是不能被接受的, 同时也使人严重怀疑该工厂实验室进行分析活动的完整

性和可靠性。

118

实验室控制系统 GMP实施指南

16 微生物检验

16 微生物检验

本章中涉及以下问题：  进行微生物检验需要的设施及环境要求？  关于微生物检验人员的资质要求？  培养基、菌种管理及使用的具体要求？  微生物试验的种类及具体要求？ 【法规要求】

2010版GMP正文：

第六十六条 质量控制实验室、中药标本室通常应与生产区分开，生物检定、微生物和放射 性同位素的实验室还应彼此分开。

第六十九条 处理生物或放射性样品等特殊物品的实验室应符合国家的有关要求。

第二百二十六条 质量控制实验室的检验人员应至少具有相关专业中专或高中以上的学历，

并至少经过一定时限与所从事的检验操作相关的实践培训且通过考核。 第二百三十三条 试剂、试液、培养基和检定菌

5.每次配制的培养基均应进行无菌性和适应性检查，并有相关记录。应有培养基使用的记录。 6. 应有检验所需的各种检定菌，并建立检定菌保存、传代、使用、销毁的操作规程和相应 记录。

7. 检定菌应有适当的标识，内容至少包括菌种名称、编号、代次、传代日期、传代操作人。 8. 检定菌应按规定的条件贮存，贮存的方式和时间不应对检定菌的生长特性有不利影响。

下表中列出了国内外针对微生物检验的相关指南： 机构或组织 文件名称 美国食品药品监督管理局（FDA） Guidance for industry: Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing-Current Good Manufacturing Practice 工业指导原则：无菌工艺生产的无菌产品cGMP指南 Guide to Inspections of Microbiological Pharmaceutical Quality Control Laboratories 药品质量控制微生物实验室检查指南 美国药典(USP) Microbiological Test 微生物检查法

119

16 微生物检验

实验室控制系统 GMP实施指南

药品检查合作组织（PIC/S） Inspection of Quality Control Laboratories 质量控制实验室检查 欧洲药典(EP) Microbiological Test(14.K) 微生物检查法 中国药典(CP2010) Microbiological Laboratory guidance 微生物实验室规范指导原则 【背景介绍】

16.1 应用范围

药品生产所使用的所有原料及制剂都必须遵守法规要求，其生产及销售都必须符合法律 要求。应对药品的微生物质量进行监控，微生物质量的标准可能会因地域及应用方式的不同 而不同。各国药典中都有相应微生物试验的详细要求。

16.2 原则

中国药典2010版附录 微生物实验室规范指导原则中阐明：药品微生物的检验结果受到

很多因素的影响，如样品中微生物可能分布不均匀、微生物检验方法的误差较大等。因此在 药品微生物检验中，为保证检验结果的可靠性，必须使用经验证的检验方法并严格按照药品 微生物试验室规范要求进行试验。

【技术要求】

16.3 人员资质及培训要求

从事药品微生物试验工作的人员应具备微生物学或相近专业知识的教育背景。试验人员 应依据所在岗位和职责接受相应的培训，在确认它们可以承担某一试验前，他们不能独立从 事该项微生物试验。应保证所有人员在上岗前接受胜任工作所必须的设备操作、微生物检验 技术和试验室生物安全等方面的培训，经考核合格后方可上岗，同时，实验室应制定所有级 别试验人员的继续教育计划。

检验人员必须熟悉相关监测方法、程序、检验目的和结果评价。微生物实验室的管理者 其专业技能和经验水平应与他们的职责范围相符，如：管理技能、实验室安全、试验安排、 预算、试验研究、实验结果的评估和数据偏差的调查、技术报告书写等。（CP2010附录： 微生物实验室规范指导原则）

16.4 设施

实验室应具有进行微生物检测所需的适宜、充分的设施条件。实验室的布局与设计应充 分考虑到良好微生物实验室操作规范和实验室安全的要求。实验室布局设计的基本原则是既 要最大可能防止微生物的污染，又要防止检验过程对环境和人员造成危害。合适的规划及活 动区域的合理区分将提高微生物实验室操作的可靠性。

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16 微生物检验

通常，实验室应划分成洁净或无菌区域和活菌操作区域，同时应根据试验目的，在时间 或空间上有效分隔不相容的试验活动，将交叉污染的风险降低到最低。

一般情况下，药品微生物检验的实验室应有符合无菌检查法（附录Ⅺ Ｈ）和微生物限 度检查法（附录Ⅺ J）要求的、用于具有开展无菌检查、微生物限度检查等检测活动的、独

立设置的洁净室（区）或隔离系统，并为上述检验配备相应的细菌（真菌）等实验室、培养 室、培养基及实验用具准备（包括灭菌）区、样品接收和储藏区、标准菌株储藏区、污染物 处理区和文档处理区等辅助区域，同时，应对上述区域明确标识。

16.4.1 无菌及微生物限度检验等实验区域

无菌操作室的环境洁净度条件不应低于无菌生产操作区，以降低无菌检查出现假阳性的 风险。无菌检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离

系统中进行。用于无菌检查和微生物限度检查的洁净操作室应配有属于“人流净化”的更衣 室及属于“物流净化”的缓冲间或传递窗（柜），使进入洁净操作室的实验人员和试验物品 分别经适当净化后进入实验操作间。

无菌室分无菌操作室和缓冲间。无菌操作室应具有空气除菌过滤的单向流空气装置。操 作室或工作台应保持正压。应在压差十分重要的相邻级别区之间安装压差表。应采取适当的 方法监控压差，如连锁系统或声光报警系统。

微生物限度检查的全过程，均应遵守无菌操作，严防再污染。因此，微生物限度检查宜 在环境洁净度10000级下的局部洁净度 100级的单向流空气区域内进行；限度检查实验室应

配有相应的人流和物流缓冲间，并定期作环境监测。

16.4.2 菌种处理、微生物鉴别和阳性对照室

菌种的处理包括的内容比较多，如菌种的传代、保藏、制备以及培养基促生长实验、阳 性对照、微生物方法验证、消毒剂和防腐剂的效力测定和对环境中分离菌的鉴别等，这些实 验过程中都在处理活的微生物，处理不当会造成实验室环境污染，影响其他实验结果，因此， 该室必须与其他实验室严格分开；必要时，应按实验室性质的需要保持对相邻实验室的相对 压差；需采取必要的消毒方式确保实验室洁净条件合格（如臭氧，乳酸熏蒸等），以净化层 流台作为局部100级的控制措施，最好是使用生物安全柜，所有的与活毒菌种相关的活动都

应在层流台或生物安全柜中进行。每次实验结束后要对层流台或生物安全柜及整个实验室环 境进行消毒。所有与菌种相关的试验废物均应经过灭菌处理后方可丢弃。

16.4.3 抗生素微生物检定室

抗生素微生物检定（俗称效价检定）用实验室应注意防止抗生素及微生物的污染。实验 室由两部分组成：用于样品处理的试验间和用于制备双碟的半无菌间。半无菌间要求有紫外 灯、温控设备、稳固水平的试验台（如水泥台）、隔水式培养箱（36℃±1℃）、恒温水浴 箱。实验室温度应控制在 30℃以下（《抗生素微生物检定法及其标准操作》）。

16.4.4 培养室及其他功能间

培养室用于放置培养细菌和真菌的培养箱。准备区即试液及培养基配制/灭菌区域、实 验器皿洗涤、烘干室、灭菌室、实验用品及易耗品储藏室等没有特殊要求的功能间，可为一 般清洁环境。

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16 微生物检验

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16.5 设备

16.5.1 无菌隔离器（如使用）

此系统具备无菌操作室的全部功能。它既可以对检品外部进行消毒，又能保持操作环境 的无菌条件，由于它和外界环境是隔离的，因此美国药典并不要求它安装在洁净区/室内， 但应控制无关人员进入隔离操作系统所处的房间；欧盟则建议将它放置于100000级区的环

境中。

隔离操作系统基本的操作程序如下：

样品放入转移舱（进样舱）中后→用过氧乙酸（或其他适宜的灭菌剂，如过氧化氢）对 表面进行灭菌→排尽灭菌剂余气→连通无菌操作舱→将实验样品移入操作舱中→完成无菌 检查→将样品从操作舱中移入转移舱→关闭两舱之间的转移门并断开连接→从转移舱中取 出实验样品→阳性对照及培养。

利用隔离系统进行无菌操作的安全性及可靠性好，除非系统发生泄漏，一般不可能出现 假阳性结果。但设备及耗材价格昂贵，目前国内使用尚不普遍。

A. 确认

无菌隔离器应包括设计确认（DQ）,安装确认 (IQ), 操作确认 (OQ), 性能确认(PQ),定

期再验证，当设备发生变化时，常通过变更控制的管理程序进行评估和重新验证及维护。如 果在无菌隔离器的传输部位使用蒸汽灭菌则需要做该过程的验证和再验证。

B. 检漏实验

运行灭菌程序之前，需进行检漏实验，保证舱体无漏点，防止灭菌剂气体的泄露。检漏 实验合格后才可以进行灭菌，否则要排查漏点，直到检漏实验通过。

检漏试验方案应至少规定：

  

测试频率: 建议每次灭菌前必须做检漏试验 测试物品：如半身服、舱体、手套等

可接受的标准：例如压强变化率不大于 1.6Pa/minute

C. 环境监测

无菌隔离器的环境监控应基于风险控制的分析。风险评估应包含以下方面的定义和文件：

  

环境监测的种类：可采用空气取样器法，沉降菌法等

环境监测的频率：参见无菌实验室的环境监测的频率（参照本指南无菌检查章节） 环境监测的位点：可以选择舱体内工作台的两侧也可以根据实际情况选择风险较高的其

他位置



环境监测可接受的标准：无微生物检出

应持续监控压差，产生的压差报警都需要调查。

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16 微生物检验

16.5.2 实验室用层流台

应定期监测层流台内的空气质量（微生物和粒子数）及风速，微生物监测可以使用空气 取样器法、沉降菌法、表面测试法等。

空气取样器法：本方法采用计数浓度法，通过收集悬浮在空气中的生物性粒子于专门的 培养基，经若干时间，在适宜的生长条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，从而判定洁净 环境内单位体积空气中的活微生物数。以此评定洁净区的洁净度。参见GB/T16293-1996医 药工业洁净室浮游菌测试方法。

沉降菌法：本方法采用沉降法，通过自然沉降原理收集在空气中的生物性粒子于培养基 平皿，经若干时间，在适宜的生长条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中 的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数。并以此评定洁净区的洁净度。参见 GB/T16294-1996医药工业洁净室沉降菌的测试方法。

表面微生物测试（棉签取样/接触平皿法，表面菌监测）：用无菌棉签在相应位点的表 面涂拭取样，取样面积约为5x5cm ，将棉签在整个平碟表面均匀涂抹以确保整个棉签头部

2

与琼脂接触，然后合上碟盖。 对于平整的表面可以使用接触平皿法代替棉签取样法，使用 55mm接触平皿和待取样表面充分接触后培养。并以此评定洁净区的表面洁净度。

16.5.3 培养箱

新设备应在进行安装确认 (IQ), 操作确认 (OQ), 性能确认(PQ)合格之后方可使用。使

用时应进行温度监控，建议进行性能确认（PQ）时进行多点温度分布的确认。并应定期进 行校正，定期进行内表面的清洁。

16.5.4 蒸汽灭菌柜

湿热灭菌条件通常采用121度 15分钟、121度30分钟、116度40分钟的程序，也可采

-6

用其他温度和时间参数，但必须保证物品灭菌后无菌保证值SAL≤10 。当灭菌程序选定采

用 F0 概念时，应采取特别措施确保被灭菌物品能得到足够的无菌保证，此时，除对灭菌程 序进行验证外，还必须在生产过程中对微生物进行监控，证明污染的微生物指标低于设定的 限度。

灭菌程序经验证合格后方可使用。定期进行 BD 实验、 真空泄漏测试、温度参数测试

（空载热分布、定载热穿透、满载热穿透）、压力改变速率测试（GB8599-2008大型蒸汽灭 菌器技术要求），同时以生物指示剂验证灭菌效果, 必须保证物品灭菌后无菌保证值SAL

小于百万分之一。

16.5.5 空调高效过滤器

定期对过滤器的过滤效果进行检查，测定风速、粒子数，必要时进行送风量、换气次数 的测量、检漏实验，对气流流向、压差进行检验，须符合设计标准。

16.6 灭菌消毒方式

灭菌和消毒方式需经验证合格后，方可正式使用。



湿热灭菌：湿热灭菌法系指将物品置于灭菌柜内利用高压饱和蒸汽、过热水喷淋等手段

使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。该法灭菌能力强，为热

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16 微生物检验

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力灭菌中最有效、应用最广泛的灭菌方法。药品、容器、培养基、无菌服、胶塞以及其 他遇高温潮湿不发生变化或损坏的物品都可采用湿热灭菌。



干热灭菌：本法系指将物品置于干热灭菌柜、隧道灭菌器等设备中，利用干热空气达到 杀灭微生物或消除热源物质的方法。适用于耐高温但不宜用湿热灭菌法灭菌的物品，如 玻璃器具，金属制容器、纤维制品、固体试药、液状石蜡等均可采用本法灭菌，无论采 用何种灭菌条件，均应保证灭菌后的物品的无菌保证值SAL≤10 。如果程序用于除去

热原，要对其去热原效果进行验证。



辐射灭菌：本法系指将灭菌物品置于适宜放射源辐射的γ射线或适宜的电子加速器发生 的电子束中进行电离辐射而达到杀灭微生物的方法。本法最常用60 Co- γ射线辐射灭 菌。医疗器械、容器、生产辅助用品不受辐射破坏的原料及成品等均可用本法灭菌。



气体灭菌：本法系指用化学消毒剂形成的气体杀灭微生物的方法，常用的化学消毒剂有 环氧乙烷、气态过氧化氢、甲醛、臭氧等，本法适用于在气体中稳定的物品灭菌。采用 气体灭菌法时，应注意灭菌气体的可燃可爆性、致畸性和残留毒性。本法中最长用的气 体是环氧乙烷，一般与80%-90% 的惰性气体混合使用，在充有灭菌气体的高压腔室内 进行。该法可用于医疗器械、塑料制品等不能采用高温灭菌的物品灭菌。含氯的物品及

能吸附环氧乙烷的物品则不宜使用本法灭菌。

  

消毒剂杀菌：适用于洁净室墙面、地面、设备表面等消毒。 紫外照射杀菌：对于进入洁净区域的物体表面进行照射消毒。

过滤除菌：本法系利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理以除去气体或液体中的微生物 的方法。常用于热不稳定的药品溶液或原料的除菌。除菌过滤器采用孔径分布均匀的微 孔滤膜作为过滤材料，微孔滤膜分亲水性和疏水性两种，滤膜材质依过滤物品的性质及 过滤目的而定。药品生产中采用的滤膜孔径一般不超过 0.22 微米，过滤器对滤液的吸 附不得影响药品质量，不得有纤维脱落，禁用含石棉的过滤器，滤器和滤膜在使用前应 进行洁净处理，并用蒸汽灭菌或作在线灭菌，更换品种和批次应先清洗过滤器，再更换 滤膜。

-6

16.7 菌种的管理

试验过程中，生物样本可能是最敏感的，因为他们的活性和特性依赖于合适的实验操作 和储存条件。实验室菌种的处理和保藏的程序应标准化，使尽可能减少菌种污染和生长特性 的改变。按统一操作程序制备的菌株是微生物试验结果一致性的重要保证。

药品微生物检验用的试验菌应来自认可的国内或国外菌种保藏机构的标准菌株，或是用 于标准菌株所有相关特性等效的商业派生菌株。

标准菌株的复活或培养物的制备应按照供应商提供的说明或按已验证的方法进行。从国 内或国外菌种保藏机构获得的标准菌株经过复活并在适宜的培养基中生长后，即为标准储备 菌株。标准储备菌株应进行纯度和特性确认。标准储备菌株可用于制备每月或每周 1次转种

的工作菌株。冷冻菌种一旦解冻转种制备工作菌株后，不得重新冷冻和再次使用。

工作菌株的传代次数应严格控制，不得超过5代（从菌种保藏机构获得的标准菌株为第

0代），以防止过度的传代增加菌种变异的风险。必要时，实验室应对工作菌株的特性和纯

度进行确认。

工作菌株不可替代标准菌株，标准菌株的商业衍生物均可用作工作菌株。

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16 微生物检验

实验室必须建立和保存其所有菌种的进出、收集、储藏、确认试验以及销毁的记录，应 有菌种管理的程序文件（从标准菌株到工作菌株），该程序包括：标准菌种的申购记录；从 标准菌株到工作菌株操作及记录；菌种必须定期转种传代，并作纯度、特性等实验室所需关 键指标的确认，并记录；每支菌种都应注明其名称、标准号、接种日期、传代数；菌种生长 的 培养基和培养条件；菌种保藏的位置和条件；其他需要的程序。

【实施指导】

16.8 培养基

培养基是微生物试验的基础,直接影响微生物试验结果。适宜的培养基制备方法、贮藏 条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。

16.8.1 培养基的制备

培养基可按处方配制,也可使用按处方生产的符合规定的脱水培养基。

在制备培养基时,应选择质量符合要求的脱水培养基或单独配方组分进行配制。脱水培 养基应附有处方和使用说明,配制时应按使用说明上的要求操作以确保培养基的质量符合要 求,不得使用结块或颜色发生改变的脱水培养基。脱水培养基或单独配方组分应在适当的条 件下贮藏,如低温、干燥和避光,所有的容器应密封,尤其是盛放脱水培养基的容器。商品化的 成品培养基除了应附有处方和使用说明外,还应注明有效期、贮藏条件、适用性检查试验的 质控菌和用途。

为保证培养基质量的稳定可靠,各脱水培养基或各配方组分应准确称量,并要求有一定的 精确度。配制培养基最常用的溶剂是纯化水,特殊情况下,可能需要用去离子水和蒸馏水。应 记录各称量物的重量和水的使用量。

配制培养基所用容器和配套器具应洁净,可用纯化水冲洗玻璃器皿以消除清洁剂和外来 物质的残留。对热敏感的培养基如糖发酵培养基其分装容器一般应预先进行灭菌,以保证培 养基的无菌性。

脱水培养基应完全溶解于水中,再行分装与灭菌。配制时若需要加热助溶,应注意不要过 度加热,以避免培养基颜色变深。如需要添加其他组分时,加入后应充分混匀。

应按照生产商提供或使用者验证的参数进行培养基的灭菌。商品化的成品培养基必须附 有所用灭菌方法的资料。培养基灭菌一般采用湿热灭菌技术,特殊培养基可采用薄膜过滤除 菌。

培养基若采用不适当的加热和灭菌条件,有可能引起颜色变化、透明度降低、琼脂凝固 力或pH的改变。因此,培养基应采用验证的灭菌程序灭菌,培养基灭菌方法和条件,应通过无

菌性试验和促生长试验进行验证。此外,对高压灭菌器的蒸汽循环系统也要加以验证,以保证 在一定装载方式下的正常热分布。温度缓慢上升的高压灭菌器可能导致培养基的过热,过度 灭菌可能会破坏绝大多数的细菌和真菌培养基促生长的质量。灭菌器中培养基的容积和装载 方式也将影响加热的速度。因此,应根据灭菌培养基的特性,进行全面的灭菌程序验证。

应确定每批培养基灭菌后的pH值(冷却至室温 25℃测定)。若培养基处方中未列出pH

值的范围,除非经验证表明培养基的pH值允许的变化范围很宽,否则,pH值的范围不能超过规 定值土0.2。

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16 微生物检验

实验室控制系统 GMP实施指南

制成平板或分装于试管的培养基应进行下列检查：容器和盖子不得破裂,装量应相同,尽 量避免形成气泡,固体培养基表面不得产生裂缝或涟漪,在冷藏温度下不得形成结晶,不得污 染微生物等。应检查和记录批数量、有效期及培养基的无菌检查。

16.8.2 培养基的贮藏

自配的培养基应标记名称、批号、配制日期等信息,并在已验证的条件下贮藏。商品化 的成品培养基标签上应标有名称、批号、生产日期、失效期及培养基的有关特性,生产商和 使用者应根据培养基使用说明书上的要求进行贮藏,所采用的贮藏和运输条件应使成品培养 基最低限度的失去水分并提供机械保护。

培养基灭菌后若贮藏在高压灭菌器中,质量可能会受影响,一般不提倡这种存放法。琼脂 培养基不得在0℃或0℃以下存放,因为冷冻可能破坏凝胶特性。培养基应避光保存,若要长期

保存,应置于密闭容器中以防止水分流失。琼脂平板最好现配现用,如置冰箱2-8℃保存,一般

不超过1周,且应密闭包装,若延长保存期限,保存期需经验证确定。

固体培养基灭菌后的再融化只允许1次,以避免因过度受热造成培养基质量下降或微生

物污染。培养基的再融化一般采用水浴或流通蒸汽加热。若使用微波炉,应避免培养基过度 受热及水分的蒸发,更要注意安全,融化的培养基应置于45~50℃的水浴中,不得超过8小时。 倾注培养基时,应擦干培养基容器外表面的水分，避免容器外壁的水滴进入培养中造成污染。

使用过的培养基（包括失效的培养基）应按国家污染废物处理相关规定进行。

16.8.3 培养基的质量控制实验

实验室应对试验用培养基建立质量控制程序，以确保所用的培养基质量符合相关的监测 需要。

实验室配制或商品化的成品培养基的质量依赖于其制备过程，采用不适宜方法制备的培 养基将影响微生物的生长或复苏，从而影响实验结果的可靠性。所有配制好的培养基均应进 行质量控制实验，实验室配制的培养基的常规监控项目是pH,适用性检查试验，定期的稳定

性检查以确定有效期，培养基在有效期内应依据适用性检查试验确定培养基质量是否符合要 求，有效期的长短将取决于在一定存放条件下（包括容器特性及密封性）的培养基其组成成 分的稳定性。

除药典附录另有规定外，在实验室中，若采用已验证的配制和灭菌程序制备培养基且过 程受控，那么同一批脱水培养基的适用性检查试验可只进行一次，如果培养基的制备过程未 经验证，那么每一批培养基均要进行适应性检查试验， 试验的菌种可根据培养基的用途从 药典相关附录中进行选择，也可增加从生产环境及产品中常见的污染菌株。

培养基的质量控制实验若不符合规定，应寻找不合格的原因，以防止问题重复出现。 任

何不符合要求的培养基均不能使用。

用于环境监控的培养基需特别防护，最好用双层包装和终端灭菌，如果不能采用终端灭 菌，那么在使用前应进行 100% 的预培养以防止外来的污染物带到环境中及避免出现假阳 性结果。



欧洲药典的规定有所不同，要求对每批成品培养基和每批配制培养基（包括从干粉配制

和按照成分配制）都必须检查其生长性。

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实验室控制系统 GMP实施指南

16 微生物检验

针对不同用途的培养基，可根据其用途（总菌落数检查、控制菌检查、无菌检查），按 照药典的不同要求进行不同的适应性检查。

16.9 实验分类

16.9.1 总菌落数检查

A. 限度要求：

各种产品不同的限度标准参见中国药典附录 XIJ微生物限度检查法项下 微生物限度标 准。

欧洲药典对限度检查标准在EP 5.1.4 项下表内有详细规定。

不仅是最终产品一定要检查其微生物限度，其使用的原料也要检查。用于药物制剂生产 的原料确实具有不可低估的重要性。药典没有微生物检验要求的原料可以通过定期抽检的方 式进行监测。

B. 检验条件：

此检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度 100级的单向流空气区域内进行。

C. 取样计划：

检验量即一次试验所用的供试品量(g、ml或cm2)。除另有规定外,一般供试品的检验量 为 l0g或10ml, 膜剂为10Ocm2, 贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减。要求检查沙

门菌的供试品,其检验量应增加2Og或20ml(其中1Og或lOml用于阳性对照试验)。检验时，

应从2个以上最小包装单位中抽取供试品，膜剂还不得少于4片。一般应随机抽取不少于检 验用量（两个以上最小包装单位）的3倍量供试品。

取样要求：样品应具代表性，应能反应整批产品的情况及工艺情况。应对取样器进行必 要的质量控制，合格后方可使用。

取样量：除另有规定外，一般供试品的检验量为10g或10ml, 化学膜剂为 100cm2,贵重

药品、微量包装药品的检验量可以酌减，要求检查沙门菌的供试品，其检验量应增加10g 或10ml。

D. 总菌落数检查用培养基

培养基种类：

    

中国药典：细菌计数：营养琼脂培养基 霉菌和酵母菌计数：玫瑰红钠琼脂培养基 酵母菌计数：酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基 欧洲药典：细菌计数：胰蛋白胨大豆琼脂培养基 霉菌和酵母菌计数：沙氏葡萄糖琼脂培养基

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16 微生物检验

实验室控制系统 GMP实施指南

培养基适用性检查：取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌各50~100cfu,分别

注入无菌平皿中,立即倾注营养琼脂培养基,每株试验菌平行制备2个平皿,混匀,凝固,置 30~35℃培养48小时,计数，取白色念珠菌、黑曲霉各50~100cfu,分别注入无菌平皿中,立即

倾注玫瑰红钠琼脂培养基,每株试验菌平行制备 2个平皿,混匀,凝固,置23~28℃培养72小时,

计数;取白色念珠菌50~100cfu,注入无菌平皿中，立即倾注酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基, 平行制备2个平皿,混匀,凝固,置23~28℃培养72小时,计数。同时,用相应的对照培养基替代

被检培养基进行上述试验。

结果判定：若被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%,且

菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致,判该培养基的适用性检查符合规定。

E. 样品制备

通常根据供试品的理化特性和生物学特性，采取适宜的方法制备供试液，参见CP 微生 物限度检查法/供试液制备。每个产品的样品制备是不同的。

1. 液体供试品

取供试品10ml,加pH7.O无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至l00ml,混匀,作为1:10的供试液。

油剂可加入适量的无菌聚山梨酯80使供试品分散均匀。水溶性液体制剂也可用混合的供试

品原液作为供试液。

2.固体、半固体或黏稠性供试品

取供试品1Og,加pH7.O无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml,用匀浆仪或其他适宜的方法, 混匀,作为1：10的供试液。必要时加适量的无菌聚山梨酯80,并置水浴中适当加温使供试 品分散均匀。

3.需用特殊方法制备供试液的供试品 (1}非水溶性供试品

方法1取供试品5g(或5ml),加至含溶化的(温度不超过45℃)5g司盘80、3g单硬脂酸甘

油酯、1Og聚山梨酯80无菌混合物的烧杯中,用无菌玻棒搅拌成团后,慢慢加入45℃的pH7.O 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml,边加边搅拌,使供试品充分乳化,作为1：20的供试液。

方法2取供试品1Og,加至含20ml无菌十四烷酸异丙酯（制法见附录 XI无菌检查法中

供试品的无菌检查项下)和无菌玻璃珠的适宜容器中,必要时可增加十四烷酸异丙酯的用量, 充分振摇,使供试品溶解。然后加入45℃的pH7.O无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100m1,振摇5~10

分钟,萃取,静置使油水明显分层,取其水层作为1：10的供试液。

{2}膜剂供试品

取供试品1O0cm2,剪碎,加pH7.O无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml(必要时可增加稀释 液),浸泡,振摇,作为1：10的供试液。

{3}肠溶及结肠溶制剂供试品

取供试品1Og,加pH6.8无菌磷酸盐缓冲液(用于肠溶制剂)或pH7.6无菌磷酸盐缓冲液(用

于结肠溶制剂)至100ml,置45℃水浴中,振摇,使溶解,作为1：10的供试液。

(4)气雾剂、喷雾剂供试品

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实验室控制系统 GMP实施指南

16 微生物检验

取规定量供试品,置冰冻室冷冻约1小时,取出,迅速消毒供试品开启部位,用无菌钢锥在

该部位钻一小孔,放至室温,并轻轻转动容器,使抛射剂缓缓全部释出。用无菌注射器吸出全部 药液,加至适量的pH7.O无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液(若含非水溶性成分,加适量的无菌聚山梨

酯80)中,混匀,取相当于1Og或1Oml的供试品,再稀释成1：10的供试液。

{5}贴剂供试品

取规定量供试品,去掉贴剂的保护层,放置在无菌玻璃或塑料片上,粘贴面朝上。用适宜的 无菌多孔材料(如无菌纱布)覆盖贴剂的粘贴面以避免贴剂粘贴在一起。然后将其置于适宜体 积并含有表面活性剂(如聚山梨酯80或卵磷脂)的稀释剂中,用力振荡至少30分钟,制成供试

液。贴剂也可采用其他适宜的方法制备成供试液。

(6)具抑菌活性的供试品

当供试品有抑菌活性时,采用下列方法进行处理,以消除供试液的抑菌活性,再依法检查。 常用的方法如下。

①培养基稀释法 取规定量的供试液,至较大量的培养基中,使单位体积内的供试品含量

减少,至不含抑菌作用。测定细菌、霉菌及酵母菌的菌数时,取同稀释级的供试液2ml,每lml 供试液可等量分注多个平皿,倾注琼脂培养基,混匀,凝固,培养,计数。每 1ml供试液所注的平

皿中生长的菌落数之和即为1ml 的菌落数,计算每1ml供试液的平均菌落数,按平皿法计数规

则报告菌数;控制菌检查时,可加大增菌培养基的用量。

②离心沉淀法 取一定量的供试液,500转/分钟离心3分钟,取全部上清液混合。用于细

菌检查。

③薄膜过滤法 同细菌、霉菌及酵母菌计数的薄膜过滤法。

④中和法 凡含汞、砷或防腐剂等具有抑菌作用的供试品,可用适宜的中和剂或灭活剂 消除其抑菌成分。中和剂或灭活剂可加在所用的稀释液或培养基中。

F. 检验方法：

计数方法包括薄膜过滤法和平皿计数法。

检查时,按已验证的计数方法进行供试品的细菌、霉菌及酵母菌菌数的测定。按计数方 法的验证试验确认的程序进行供试液制备。用稀释液稀释成1:10、l:00、l:1000等稀释级的

供试液。

薄膜过滤法：采用薄膜过滤法,滤膜孔径应不大于 0.45um,直径一般为50mm,若采用其他

直径的滤膜,冲洗量应进行相应的调整。选择滤膜材质时应保证供试品及其溶剂不影响微生 物的充分被截留。滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。使用时,应保证滤膜在过滤前 后的完整性。水溶性供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润湿滤膜。油类供试品,其滤膜 和滤器在使用前应充分干燥。为发挥滤膜的最大过滤效率,应注意保持供试品溶液及冲洗液 覆盖整个滤膜表面。供试液经薄膜过滤后,若需要用冲洗液冲洗滤膜,每张滤膜每次冲洗量为 100ml。总冲洗量不得超过1000ml,以避免滤膜上的微生物受损伤。

取相当于每张滤膜含1g、1ml或10cm 供试品的供试液,加至适量的稀释剂中,混匀,过滤。 若供试品每 1g、1ml或 10cm2所含的菌数较多时,可取适宜稀释级的供试液 lml进行试验。

2

用pH7.O无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或其他适宜的冲洗液冲洗滤膜，冲洗方法和冲洗量同计

129

16 微生物检验

实验室控制系统 GMP实施指南

数方法的验证。冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂 培养基平板上培养，

阴性对照试验：取试验用的稀释液1 ml, 照上述膜过滤法操作，作为阴性对照，阴性对

照不得有菌生长。

平皿计数法：

根据菌数报告规则取相应稀释级的供试液lml,置直径90mm的无菌平皿中,注入15~20ml 温度不超过 45℃的溶化的营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼

脂培养基,混匀,凝固,倒置培养。每稀释级每种培养基至少制备2个平板。

阴性对照试验 取试验用的稀释液 1ml,置无菌平皿中,注入培养基,凝固,倒置培养。每种 计数用的培养基各制备2个平板,均不得有菌生长。

G. 培养：

除另有规定外,细菌培养3天,霉菌、酵母菌培养5天,逐日观察菌落生长情况,点计菌落数, 必要时,可适当延长培养时间至7天进行菌落计数并报告。细菌培养温度为30-35℃，霉菌及

酵母菌培养温度为23-28℃。



欧洲药典（Ph. Eur.）规定的培养条件，细菌培养 30-35℃5天，真菌培养20-25℃5天。

H. 计数

点计菌落数后,计算各稀释级供试液的平均菌落数,按菌数报告规则报告菌数。若同稀释 级两个平板的菌落平均数不小于15, 则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。

一般营养琼脂培养基用于细菌计数，玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌及酵母菌计数;酵母 浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基用于酵母菌计数。在特殊情况下,若营养琼脂培养基上长有霉菌 和酵母菌、玫瑰红钠琼脂培养基上长有细菌,则应分别点计霉菌和酵母菌、细菌菌落数。然 后将营养琼脂培养基上的霉菌和酵母菌数或玫瑰红钠琼脂培养基上的细菌数,与玫瑰红钠脂 培养基中的霉菌和酵母菌数或营养琼脂培养基中的细菌数进行比较,以菌落数高的培养基中 的菌数为计数结果。

含蜂蜜、王浆的液体制剂,用玫瑰红钠琼脂培养基测定霉菌敬,用酵母浸出粉胨葡萄糖琼 脂培养基测定酵母菌数,合并计数。



《欧洲药典》6.0 “2.6.12微生物总计数”协调方法中描述：以前的细菌数被定义为“细

菌培养基”上菌落形成单位的平均数，真菌数是真菌培养基上菌落形成单位的平均数， 如沙氏葡萄糖培养基，并且微生物总数是细菌数和真菌数的总和，而现在需氧菌总数 （TAMC）是酪蛋白大豆消化琼脂上包括真菌的菌落形成单位的数量，酵母菌和霉菌总

数（TYMC）是沙氏葡萄糖培养基上包括细菌的菌落形成单位的数量。

I. 菌数报告规则：



平皿计数法：细菌、酵母菌宜选取平均菌落数小于300cfu、霉菌宜选取平均菌落数小于

100cfu 的稀释级,作为菌数报告〈取两位有效数字〉的依据。以最高的平均菌落数乘以 稀释倍数的值报告lg、lml或10cm 供试品中所含的菌数。

2

130

实验室控制系统 GMP实施指南

16 微生物检验

如各稀释级的平板均无菌落生长,或仅最低稀释级的平版有菌落生长,但平均菌落数小于 1时,以< 1乘以最低稀释倍数的值报告菌数。



膜过滤法：以相当于1g、1ml或10cm 供试品的菌落数报告菌数，若滤膜上无菌落生长，

2

以<1报告菌数（每张滤膜过滤lg、lml或10cm 供试品），或以<1 乘以稀释倍数的值报

2

告菌数。

J. 方法验证：



当建立产品的微生物限度检查法时,应进行细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证,以确认

所采用的方法适合于该产品的细菌、霉菌及酵母菌数的测定。若产品的组分或原检验条 件发生改变可能影响检验结果时,计数方法应重新验证。

验证时,按供试液的制备和细菌、霉菌及酵母菌计数所规定的方法及下列要求进行。对各试 验菌的回收率应逐一进行验证。



验证方法：验证试验至少应进行 3 次独立的平行试验,并分别计算各试验菌每次试验的 回收率。

(1)试验组 平皿法计数时,取试验可能用的最低稀释级供试液1ml和50~100cfu试验菌,

分别注入平皿中,立即倾注琼脂培养基,每株试验菌平行制备2 个平皿,按平皿法测定其菌数。 薄膜过滤法计数时,取规定量试验可能用的最低稀释级供试液,过滤,冲洗,在最后一次的冲洗

液中加入50~100cfu试验菌,过滤,按薄膜过滤法测定其菌数。

(2)菌液组：测定所加的试验菌数。

(3)供试品对照组：取规定量供试液,按菌落计数方法测定供试品本底菌数。

(4〉稀释剂对照组： 若供试液制备需要分散、乳化、中和、离心或薄膜过滤等特殊处

理时,应增加稀释剂对照组,以考察供试液制备过程中微生物受影响的程度。试验时,可用相应 的稀释液替代供试品,加入试验菌,使最终菌浓度为每1ml供试液含50~10Ocfu,按试验组的供 试液制备方法和菌落计数方法测定其菌数。



结果判断: 在 3 次独立的平行试验中,稀释剂对照组的菌数回收率(稀释剂对照组的平均

菌落数占菌液组的平均菌落数的百分率)应均不低于70%。若试验组的菌数回收率(试验

组的平均菌落数减去供试品对照组的平均菌落数的值占菌液组的平均菌落数的百分率) 均不低于 70%,照该供试液制备方法和计数法测定供试品的细菌、霉菌及酵母菌数; 若 任一次试验中试验组的菌数回收率低于 70%,应采用培养基稀释法、离心沉淀法、薄膜

过滤法、中和法等方法或联合使用这些方法消除供试品的抑菌活性,并重新进行方法验 证。

若没有适宜的方法消除供试品的抑菌活性,那么验证试验中微生物回收的失败可看成是 因供试品的抗菌活性引起的,同时表明该供试品不能被试验菌污染。但是,供试品也可能仅对 试验用菌株具有抑制作用,而对其他菌株没有抑制作用。因此,根据供试品须符合的微生物限 度标准和菌数报告规则,在不影响检验结果判断的前提下,应采用能使微生物生长的更高稀释 级的供试液进行方法验证试验。若验证试验符合要求,应以该稀释级供试液作为最低稀释级 的供试液进行供试品检验。计数方法验证时,采用上述方法若还存在一株或多株试验菌的回 收率达不到要求,那么选择回收率最接近要求的方法和试验条件进行供试品的检验。

131

16 微生物检验 实验室控制系统 GMP实施指南

验证试验也可与供试品的细菌、霉菌及酵母菌计数同时进行。

【实例分析】 实例： 某口服产品总菌数测定方法验证

（1）实验准备  标准菌株和菌液制备  大肠埃希菌（CMCC（B）44102）  金黄色葡萄球菌（CMCC（B）26003）  枯草芽孢杆菌（CMCC（B）63501）  白色念珠菌（CMCC（F）98001）  黑曲霉（CMCC（F）98003） 接种相应菌株至适宜培养基中并培养24小时，得到新鲜培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液稀 释成每1ml含菌数为50~100cfu的菌悬液。  供试液的制备 称取10克样品，加入100毫升PH7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液中溶解混匀，作为1：10 的供试液。 （2）细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证  实验组 取 1:10的供试液1毫升和50-100CFU的实验菌，分别注入平皿中，根据菌株的不同立刻倾 注营养琼脂或玫瑰红钠琼脂培养基，每株实验菌平行制备 2个平皿。按照平皿计数法测定其菌 数。 营养琼脂平皿于30-35℃培养48小时，玫瑰红钠琼脂平皿于23-28℃培养 72小时观察结果。    菌液组：平皿中加入实验菌，测定所加的试验菌数 供试品对照组：取规定量的供试液加入平皿中，进行计数。 结果判断 在 3次独立的平行试验中，若试验组的菌数回收率(试验组的平均菌落数减去供试品对照组 的平均菌落数的值占菌液组的平均菌落数的百分率)不低于70%，照该供试液制备方法和计数法 测定供试品的细菌、霉菌及酵母菌数，否则须重新进行方法验证。在表中记录试验结果。 16.9.2 控制菌检查

A. 环境条件

应该与总菌落数检查的环境要求一致，并且相应的环境也应该进行监控。

132

实验室控制系统 GMP实施指南

16 微生物检验

B. 样品制备

与总菌落数检查的样品制备一致。

C. 控制菌的测定及结果判断

供试品检出控制菌或其他致病菌时，按一次检出结果为准，不再复试。

如果特定微生物检验结果略有可疑，就应执行特定的确认反应，或者使用鉴别系统对结 果进行确认。

如果说对总菌落数的结果尚有解释的余地，控制菌的结果则丝毫没有解释的余地。唯一 的例外就是内毒素和某种特定的菌。如果发现了其他菌，必须要考虑使患者感染的风险，并 以此作为产品放行与否的依据。

D. 培养基和培养基实验

每批培养基都必须进行以下试验，该试验可以在产品试验之前执行也可以同时进行。



无菌性

药典中没有明确规定要做无菌性试验，但只有和总菌落数试验一样，测定培养基的无菌 性才能保证结果可靠。



促生长能力、抑制能力及指示能力检查（测试培养基的营养性、选择性和指示性）

生长性试验应该按以下频次检验：

 每批已经制备好的培养基

 每批由干粉培养基制备而来的培养基  每批按配方配制的培养基

因为培养基的灭菌在培养基的制备过程中是至关重要的步骤，所以培养基灭菌的时间不 能够太长，灭菌温度不能够太高。因此只测试干粉批次是不够的。必须保证培养基已经在正 确的温度下培养了足够长的时间，同时还要保证培养基没有被灭菌的时间过长或温度过高。

结果除了能观察到阳性结果即可，还要和以前测试过并且合格的批次进行比较。 在测试促生长性时，在液体培养基中应在最短时间内观察到明显的生长（和以前检验过 并已接受的培养基比较），在固体培养基中的菌落数应当和以前检验过并已接受的培养基有 可比性。

抑制能力检查至少应在培养的最长时间内不能观察到微生物的生长。

指示能力检查在规定的时间内必须和以前检验过并已接受的培养基在外观和指示反应 都具备可比性。

E. 方法验证

当建立药品的微生物限度检查法时，应进行控制菌检查的方法验证。 以确认所采用的 方法适合于该药品的控制菌检查。 若药品的组分或原检验条件发生改变可能影响检验结果

时，检查方法应重新验证。验证时，依各品种项下微生物限度标准中规定检查的控制菌选择

133

16 微生物检验

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相应验证菌株，验证大肠菌群检查法时，应采用大肠埃希菌作为验证菌株。验证试验按照供 试液的制备和控制菌检查法的规定及中国药典要求进行。

验证频次的设定应参照以下情况

  

每种新产品 检验过程有变化

产品生产过程发生可能影响检验结果的变化

验证时，依各品种项下微生物限度标准中规定检查的控制菌选择相应验证的菌株，验证 大肠菌群检查法时，采用大肠埃希菌作为验证菌株。验证试验按供试液的制备和控制菌检查 法的规定及下列要求进行。

菌种及菌液制备： 同控制菌检查用培养基的适用性检查。

验证方法：取规定量供试液及10-100cfu试验菌加入增菌培养基中，依相应控制菌检查

法进行检查。当采用薄膜过滤法时，取规定量供试液，过滤，冲洗，试验菌应加在最后一次 冲洗液中，过滤后，注入增菌培养基或取出滤膜接入增菌培养基中。

结果判断：若上述试验检出试验菌，按此供试液制备法和控制菌检查法进行供试品的该 控制菌检查；若未检出试验菌，应采用培养基稀释法、离心沉淀法、薄膜过滤法、中和法等 方法或联合使用这些方法消除供试品的抑菌和活性，并重新进行方法验证。

验证试验也可与供试品的控制菌检查同时进行。

16.9.3 非无菌产品的实验频率

对于大多数非无菌制剂及原料来说，只能在极少数情况下对所有批次进行微生物检验。 必须建立一个系统以保证随机取样也能保证足够的安全性。

A. 制剂产品

仅仅确定是随机取样检查还是逐批检查是不够的。还应建立取样频次。产品首先应该按 照受污染的程度进行以下分类：

A: 检验数据不足以证明其风险水平的产品:新的产品及配方或生产过程发生重大变化

的产品。生产过五批之后，再按照下面 B类（高风险）或C类（低风险）来进行分类。

B: 高风险产品：所有微生物结果超标的产品。

C: 低风险产品：至少最近五批没有发生微生物结果超标。

表 16-1 非无菌制剂产品类型与检验频次示例

产品类型 A B 检验频次 头五批 每批或每一阶段 放行的可行性 微生物检查结果必需为批发放依 据。 微生物检查结果必需为批发放依 据。

134

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16 微生物检验

C

每季度或每五批，取二者 微生物检查结果不需为批发放依 频次最高者 据。 B. 原料

不是所有的起始物料都需要进行每批均检的微生物试验。在 ICH Q6A 的规定中，可以

找到制定原料微生物检验频次的指导。由此可以看出检验及检验频次的制定主要依赖于原料 受污染的风险。

对于非无菌产品，已经把原料按照受污染的风险分为几个不同的类别：第一类是药典中 要求强制检验微生物的原料以及起始原料是植物、动物的原料。这种物料必须要考虑到杂质。

第二类（随机取样）是那些在生产过程中经过提取而可靠消毒的天然物质及合成的物质。 如果杂质可以被去除，以硝酸为例，该原料可以认为是低风险类的。其检验频次可以参 照下表：

表 16-2 原料检验频次及分类标准示例

级别 1 2 3 4 标准 原料非常关键，要求强检 原料不关键 检验频次 每批均检 每五批检一次或每年检一批 因物料的种类及工艺过程决定其受污染的 无需检验 可能性很低 新物料 初始每批均检，直至可以评估其风 险水平并设定相应检验频次 16.9.4 无菌检查法

A. 无菌检查法的局限性

无菌检验由于检验样品量小，所以无菌检验方法检测样品受到微生物污染的能力是有限 的。例如，就如USP 中描述的，假设一批产品的产量为10000个单位，如果染菌率为 0.1%，

取样量位20个单位, 则通过无菌检查的概率为 98%。

USP和EP对无菌检查的描述就是“无菌检查得出的结果只能表示被检样品在检测条件 下没有发现有微生物存在”。中国药典2010版对无菌检查的描述中也有这样的说明“若供试

品符合无菌检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染”。

B. 无菌产品的取样原则

样品应具代表性，应能反应整批产品的情况及工艺情况。取样应按照以下原则进行：



对无菌灌装产品而言，所取的样品必须包括最初、最终灌装的产品以及灌装过程中发生

较大偏差后的产品；



对最终灭菌产品而言，应考虑从可能的灭菌冷点处取样；

135

16 微生物检验

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 同一批产品经多个灭菌设备或同一灭菌设备分次灭菌的，样品应从各个/次灭菌设备中 抽取。

C. 检验数量及检验量

检验数量是指一次试验所用供试品最小包装容器的数量。检验量是指一次试验所用的供 试品总量（g或ml）。具体规定见《中国药典 2010 附录Ⅺ H无菌检查法》

D. 阳性对照/阴性对照

中国药典要求做阳性对照，对照菌应根据供试品特性进行选择。阳性对照管培养 48-72 小时应生长良好。

阴性对照应取相应溶剂和稀释液、冲洗液同法操作。阴性对照不得有菌生长。

E. 培养基

培养基的适用性检查：无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培养基改良马丁培养基等应符合培 养基的无菌性检查及灵敏度检查的要求。本检查可在供试品的无菌检查前或与供试品的无菌 检查同时进行。

无菌性检查：每批培养基随机取不少于 5支（瓶），培养 14天，应无菌生长。

灵敏度检查：

菌种：培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代，并采用适宜的菌种保藏技

术，以保证试验菌株的生物学特性。

菌液制备：接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽胞杆菌的新鲜培养物至营养肉 汤培养基中或营养琼脂培养基上，接种生孢杆菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中， 30~35℃培养18~24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中或改良马丁琼

脂培养基上，23~28℃培养24~48小时，上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml 含菌

数小于 100cfu（均落形成单位）的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培 养基上，23~28℃培养5~7天，加入3~5ml含 0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠

溶液，将孢子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%(ml/ml)

聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml 含孢子数小于100cfu的孢子悬液。

菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2~8℃，可在24小时内使

用。黑曲霉孢子悬液可保存2~8℃，在验证过的储存期内使用。

培养基接种：取每管装量为12ml的硫乙醇酸盐流体培养基9支。分别接种小于100cfu

的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽胞杆菌、生孢梭菌各2支，另1支不接种作为空

白对照，培养3天；取每管装量为9ml的改良马丁培养基5支，分别接种小于 100cfu的白 色念珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接种作为空白对照，培养5天。逐日观察结果。

结果判断：空白对照管应无菌生长，若加菌的培养基管应生长良好，判该培养基的灵敏 度检查符合规定。

136

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16 微生物检验

F. 测定方法

通常采用薄膜过滤法和直接接种法。

G. 培养及观察

按规定温度培养 14天，培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。培养结束后，观察

培养基，如果出现混浊、絮结、沉淀，表示有微生物生长，对于难以判断的情况，可以转移 部分初次培养产物至新鲜培养基中继续培养，培养14天后如果未有微生物生长可以判定为

阴性，否则为阳性。(CP2010/附录Ⅺ H无菌检查法)

H. 结果判断

阳性对照管应生长良好，阴性对照管不得有菌生长，否则，试验无效。

I. 阳性结果的调查

在进行无菌试验操作时应该谨慎操作避免一切可能带来污染的行为。当检验结果出现阳 性时，需要进行实验室调查，只有当调查结果为以下几种原因中的一种或几种时，阳性结果 才被认为无效。

   

实验时的环境监测结果超标

回顾规程时发现规程中存在能够引起培养基、冲洗液、设备被污染的漏洞 阴性对照出现阳性并且污染菌株和引起产品阳性的菌株是同一种

通过对引起阳性的菌株的鉴定分析证明，阳性结果确实是由实验中使用的材料或实验的

技术原因引起的

当阳性结果被认为无效时，应重新进行试验。若阳性结果确定，则应通知QA启动调查 程序。

J. 方法验证

（1）验证原则

当建立产品的无菌检验法时，应进行方法的验证，以证明所采用的方法适用于该产品的 无菌检验。 （2）验证方法

中国药典规定可以采用薄膜过滤法和直接接种法。

若与对照管比较，生长良好则可以照此方法进行无菌检验。若含供试品的任一容器中的 实验菌生长微弱、缓慢或不生长，则需重新进行方法验证试验。方法验证的最终目的是证明 该方法不会产生假阴性结果。具体验证方法参见《中国药典2010/附录Ⅺ H无菌检查法》

K. 无菌实验室环境监测

（3）无菌室的消毒

应采用经验证合格的消毒方式，保证无菌室的洁净级别达到要求。

137

16 微生物检验

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（4）监测方法及频次

层流工作台每次使用时都要进行沉降菌法环境监测，并贯穿整个实验过程，监测时层流 台左右两侧各露置一平皿。无菌室的整体环境监测定期进行，在无菌室环境有较大变化或在 有新的设备引进时，在进行变更管理或验证的同时加大环境监测频次。人员的微生物学监测 在每次无菌实验结束后进行一次。 （5）监测中发现微生物的鉴定

于任何级别环境中发现超过行动值的菌落时，应鉴定至种。其他情况可进行革兰氏染色 及细胞形态检查。

A 至D级发现的霉菌可通过观察菌落形态和镜下形态进行鉴定并记录（例如画图，参 考出版物，照相）。

（6）警戒限、行动限和行动措施

无菌实验室的检验条件应与生产条件相同要求，行动限具体要求见GMP附录一。警戒

限的设定应根据历史数据来制定。

如果层流工作台内的监测结果超过行动值,应调查原因, 并需对层流工作台的有效性进

行检查。如果其它区域超过行动值，则相应区域或无菌室应彻底清扫和重新薰蒸消毒（常用 消毒剂可选择甲醛、过氧化氢、乳酸、臭氧等）。

如果无菌服和无菌手套的监测结果超过行动值，应采取如下措施： 增加监测频次 重新培训

重新进行资格确认或相关人员暂时不进入无菌室工作。

16.9.5 内毒素检查

A. 方法分类

欧洲药典中方法分类包括：A.凝胶限度法、B.凝胶半定量法、C.动态浊度法、D.动态显 色基质法、E.终点显色基质法、F.终点浊度法。供试品检测时可以使用其中任何一种方法进 行试验。当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶法结果为准。

B. 实验室环境和人员

为保证实验结果的准确性，防止污染，内毒素检查实验应在密闭的洁净室中或密闭实验 室的超净工作台下进行。检测人员应经过严格的培训，并应配备相应的防护设施（如穿防护 服，戴口罩、头套等）。

C. 鲎试剂

分为美洲鲎试剂（LAL）和东方鲎试剂（TAL）

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16 微生物检验

D. 标准品

分为国家标准品和工作标准品。

细菌内毒素国家标准品系自大肠埃希菌提取精制而成，用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵 敏度和标定细菌内毒素工作标准品的效价。

细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准品为基准物质标定其效价，用于试验中 灵敏度复核、干扰试验及各种阳性对照。

细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品应使用由中国药品生物制品检定所统 一发放的标准品。如果用于出口产品的检验，细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准 品须经 USP细菌内毒素参考标准品标定后，方可使用。

E. 试验器具的准备

实验室所用器皿需经处理，以除去可能存在的外源性内毒素。耐热器皿常用干热灭菌法 （250℃，30分钟以上）除内毒素。也可用其他不干扰细菌内毒素检查的适宜的方法。若使 用塑料器械，应选用标明对试验无干扰的器械。

F. 供试品溶液的制备

某些供试品需进行复溶、稀释或在水溶性溶液中浸提制成供试品溶液。一般要求供试品 溶液的 pH值在 6.0-8.0的范围内。对于过酸、过碱或本身有有缓冲能力的供试品，可用酸、 碱溶液或适宜的缓冲液调节pH值。对于自行配制的一些用于调节 pH用的酸碱溶液可以用

浓缩物或固体物质与内毒素检查用水在除内毒素处理的的容器中配制，其存储条件和有效期 应经过验证。缓冲液必须经过验证不含内毒素和干扰因子。供试品溶液的浓度应该和方法验 证中的浓度一致，或者是低于验证的浓度而不得超过最大有效稀释倍数。

G. 鲎试剂灵敏度复核

具体方法参见《中国药典2010附录 XI E细菌内毒素检查法》，其操作应和药典要求完

全一致。

内毒素标准品的准备：根据鲎试剂的灵敏度标示值（），将细菌内毒素国家标准品或 工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解，在漩涡混合器上混匀 15分钟，然后制成2、、 0.5和0.25四个浓度的内毒素标准溶液，每稀释一步应在漩涡混合器上混匀30秒钟。

结果判断：当最大浓度 2管均为阳性，最低浓度0.25管均为阴性，阴性对照管为阴性， 试验方为有效。按下式计算反应终点浓度的几何平均值，即为鲎试剂灵敏度的测定值（c）：

c=antilg（∑X/4）。当复核灵敏度（c）在0.5～2时，方可用于内毒素检查，并以标示

灵敏度（）为该批鲎试剂的灵敏度。

试验频次：当使用新批号鲎试剂或试验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时，应 进行灵敏度复核试验。

H. 方法验证（干扰试验）：

具体方法参见《中国药典 2010附录XI E细菌内毒素检查法》。

139

16 微生物检验

实验室控制系统 GMP实施指南

内毒素限值的确定：一般按以下公式：L=K/M。

式中L为供试品的的内毒素限值，一般以EU/ml、EU/mg或 EU/U（活性单位）表示。

K 为人每千克体重每小时最大可接受的内毒素计量，以EU/ kg.h）表示，注射剂K=5EU/

（kg.h），放射性注射剂K=2.5EU/（kg.h），鞘内注射剂K=0.2EU/（kg.h）。

M为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量，以 ml/(kg.h)、mg/（kg.h）或U/(kg.h)

表示，人均体重按60kg计算，人体表面积按1.62m 计算。注射时间不足1小时，按1小时 计算。供试品每平方米体表面积剂量乘以0.027即可转换为每千克体重剂量（M）。

2

最大有效稀释倍数的确定：最大有效稀释倍数是指在试验中供试品溶液被允许达到稀释 的最大倍数（1→MVD），在不超过此稀释倍数的浓度下进行内毒素限值的检测。用以下公 式来确定：MVD=cL/

L为供试品的细菌内毒素限值。

c 为供试品溶液的浓度，当L以EU/ml 表示时，则c等于 10ml/ml，当L以EU/mg或

EU/U表示时，c的单位为mg/ml 或U/ml。如果供试品为注射用无菌粉末或原料药，则MVD 取1，可计算供试品的最小有效稀释浓度c=/L。

方法验证要求至少检测三批样品（如为新产品需检测三批样品），同时使用两个鲎试剂 厂家的鲎试剂进行干扰试验。如同一样品对两个厂家的鲎试剂测定结果差异较大，应使用第 三个厂家的鲎试剂。在确认该品种在某一不超过最低有效浓度下不干扰细菌内毒素检查，或 该品种在有效浓度下虽有干扰作用但采用适当方法能消除这种干扰作用时，该品种方可采用 细菌内毒素检查方法。

干扰因素的排除：参见《中国药典2010附录XI E细菌内毒素检查法》

试验频次：当进行新药的内毒素检查试验前，或无内毒素检查项的品种增加内毒素检查 项时，须建立该品种的内毒素检查法，并须进行方法验证。

当鲎试剂、供试品的处方、生产工艺改变或试验环境发生了可能影响试验结果的变化时， 须重新进行方法验证。

140

实验室控制系统 GMP实施指南

参考文献

参考文献

中国药典 2010版

欧洲药典 EP 6.8 美国药典 USP 32

FDA：Guide to Inspection of Pharmaceutical Quality Control Labs（质量控制部实验室检查指 南）

EMEA： EudraLex - Volume 4 :

EU Guidelines to Good Manufacturing Practice Medicinal Products for Human and Veterinary Use

Part I: Basic Requirements for Medicinal Products， Quality Control

Part II - Basic Requirements for Active Substances used as Starting Materials FDA Inspection Guides “guide to inspection of pharmaceutical quality control lab” ICH guidelines of Q1A, Q1B, Q1C, Q1D, Q3A, Q3B

Report of WHO Expert Committee on Specifications for Pharmaceutical Preparations PIC/S Inspection Guides “Inspection of pharmaceutical Quality Control Laboratories” 国家标准 GB8170-87 数值修约规则

EC: 分析方法验证，参照指南，III，844/87，最终版，1989年8月（欧洲）

WH: 分析方法验证被用于药物原料的测定中，WHO 技术报告系列，1992

US : 美国药典USP <1225>

ICH: 分析方法验证Q2(R1)

CP 中国药典2010 版

141

术语表

术语

表

重复性 中间精密度 重现性

准确度 精密度

专属性 检测限 定量限

范围

耐用性 稳定性 无菌检查法 微生物限度检查法无菌隔离器 检验数量 检验量

142

实验室控制系统 GMP实施指南

在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度称为 重复性。

在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备测定结 果之间的精密度，称为中间精密度。

在不同实验室之间由不同分析人员测定结果之间的精密度，称 为重现性。

用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度。 系指在规定的测试条件下，同一均匀供试品，经多次取样测定 所得结果之间的接近程度。

系指在其他成分(如：杂质、降解产物、辅料等)可能存在下，采 用的方法能正确测定出被测物的特性。

系指试样中的被分析物能够被检测出的最低量。

系指试样中的被分析物能够被定量测定的最低量，其测定结果 应具有一定的准确度和精密度

系指能够达到一定的精密度、准确度和线性，测试方法适用的 高低限浓度或量的区间

系指测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度,为 使方法可用于常规检验提供依据。

药品的稳定性是指原料药及其制剂保持其物理、化学、生物学 和微生物学性质的能力。稳定型试验的目的是考察原料药、中 间产品或制剂的性质在温度、湿度、光线等条件的影响下随时 间变化的规律，为药品的生产、包装、贮存、运输条件和有效 期的确定提供科学依据，以保障临床用药的安全有效。并且通 过持续稳定性考察可以监测在有效期内药品的质量，并确定药 品可以或预期可以在标示的贮存条件下，符合质量标准的各项 要求。

系用于检查药典要求无菌的产品、医疗器械、原料、辅料及其 他品种是否无菌的一种方法。

系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方 法。

是一个防止污染的单元，应为之提供 100

级甚至更高级别质量

的空气，它能完全将内部、外部隔离.

是指一次试验所用供试品最小包装容器的数量。 是指一次试验所用的供试品总量（g

或

ml）。

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术语表

洁净区 警戒限度 鲎试剂 内毒素

内毒素标准品

需要对环境中尘粒及微生物污染进行控制的房间（区域），其 建筑结构、装备及其使用均具有防止该区域内污染物的引入、 产生和滞留的功能。

当系统的关键参数超出正常工作范围、但未达到纠偏限度时， 有可能需要采取纠正措施的限度标准。

将鲎血液变形细胞裂解物冷冻干燥制备而成。

革兰氏阴性细菌细胞壁的构成成分，具有多种生物活性，其化 学结构是脂多糖（LPS）。热原与内毒素的关系在学术上仍有争 论，但目前认为，在

GMP 的条件下，内毒素是主要的热原物质，可以说无内毒素就无热原，控制细菌内毒素就控制热原物质。

指经人工提取精制并经生物效价测定的细菌内毒素，作为细菌 内毒素检查的参考品。由于大肠杆菌内毒素在天然内毒素中的 致热活性比较高，在各种细菌内毒素对鲎试剂反应的灵敏性上 处于中值的位置，且其稳定、可溶，因此一般都采用大肠杆菌 的内毒素作为内毒素标准品。

143

关键词索引

关键

词索引

Ｂ

标准品4, 7, 9, 17, 19, 20, 21, 26, 27, 34, 43, 56, 61, 62, 90, 91, 94, 100, 102, 105, 116, 117, 139 Ｈ

行动限 .................................................... 8, 138 Ｊ

精密度27, 35, 42, 48, 50, 51, 52, 53, 55, 56, 57, 58, 59, 60

警戒限 .................................................... 8, 138

144

实验室控制系统 GMP实施指南

Ｎ

内毒素 .......................... 77, 133, 138, 139, 140 Ｗ

稳定性 .. 2, 3, 4, 5, 8, 10, 15, 17, 18, 20, 21, 26, 27, 41, 42, 55, 56, 57, 58, 59, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 90, 100, 103, 109, 110, 116, 126 ＺＨ

重现性 .................................. 26, 33, 38, 48, 51