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蛋白胶银染方法

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银染色所需试剂

A 固定液(可先配)

甲醇 100ml

冰醋酸 甲醛 ddH2O B 清洗液(可先配)

甲醇 ddH2O C 定影液 (临用前配)

硫代硫酸钠 ddH2O D 染色液(临用前配)

24ml

100µl

76ml

100ml

100ml

0.04g

200ml

银 0.4g

甲醛 150µl

ddH2O 200ml

E 显影液(临用前配)

无水Na2CO3 12g

甲醛 100µl

硫代硫酸钠 0.001g

ddH2O 200ml

F 停止液(可先配)

甲醇 100ml

冰醋酸 24ml

ddH2O 76ml

(1)电泳后凝胶在固定液中固定1 h以上,静置不动。

(2)用清洗液浸泡3次,每次10 min(摇床)。

(3)在定影液中反应2 min(摇床)。

(4)用ddH2O洗涤3次,每次5 min(摇床)。

(5)在染色液中反应30 min(摇床)。

(6)ddH2O涮洗几下,时间不宜过长。

(7)用显影液浸泡数分钟,直到显出蛋白质条带。

(8)加入停止液,反应终止。

(9)ddH2O洗凝胶2-3次,用1%的醋酸保存。

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