1. 细胞状态良好，密度合适，换液后一天
2. 用吸管将细胞吹起，均匀的加到冻存管中，离心3000rpm，3min，一个细胞瓶对应一个冻存管
3. 离心后弃上清，加入冻存液（1.5ML左右），现配现用 4. 冻存液配方DMSO：血清=1:9
5. 放在冻存盒中，放在-80℃，之后放入液氮中
复苏细胞
1. 将水浴锅预热到37℃
2. 进细胞室向无菌培养瓶中加入5-10mL的（已预热）培养基
3. 取出冻存管，迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化
4. 约1-2min冻存管中的液体完全融化，用酒精棉球擦拭，拿进无菌操作台 5. 将冻存管中的细胞加入细胞培养瓶中，轻轻混匀，放于细胞培养箱中，1h后换液，除去细胞液中的DMSO.
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