华北煤炭医学院学报２０１０年月第１２卷第４期Ｊ Ｎｏｒｔｈ Ｃｈｉｎａ Ｃｏａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｍｉｔｙ ２０１０ Ｊｕｌｙ，１２（４） ・４８３・ 血清和胸腔积液肿瘤标志物联合检测的诊断价值 席向红 谢景华① 张建荣 （宁夏医科大学附属医院医学试验中心宁夏银川７５０００４；①宁夏银川市第三人民医院检验科） ［摘要］ ①目的探讨联合检测血清和胸腔积液中肿瘤标志物含量对胸腔积液性质的诊断价值。②方法应用微粒子发光酶免疫分析 法分别检测良性胸腔积液３５例、恶性胸腔积液２９例及其相应血清中的ＣＥＡ、ＣＡ１２５和ＣＡ１９９含量。③结果恶性组血清及积液３项标志 物含量均显著高于良性组（Ｐ＜０．Ｏ１）。ＣＥＡ和ＣＡ１９９在恶性组血清及积液中阳性率均明显高于良性组（Ｐ＜０．０１）。ＣＡ１２５在两组血清与 积液中的阳性率差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。２项或３项指标联合检测对血清和恶性胸腔积液的灵敏度分别为６９．Ｏ％、９６．６％。特异性 分别为９４．３％、９７．１％。④结论联合检测血清和胸腔积液肿瘤标志物对良、恶性积液的鉴别诊断有重要的临床价值。 ［关键词】 肿瘤标志物胸腔积液血清积液性质 ［中图分类号］ Ｒ４４７［文献标识码】Ａ［文章编号】 １００８—６６３３（２０１０）０４—４８３—０２ 胸腔积液可由多种疾病引起，区分这些积液的性质对于疾 表２两组患者血清及胸腔积液３项肿瘤标志物阳性率 病的诊断与治疗非常重要。近年来应用检测血清及胸腔积液中 的癌胚抗原（ＣＥＡ）、糖链抗原１２５（ＣＡ１２５）、糖链抗原１９９ （ＣＡ１９９）等肿瘤标志物含量，提高了恶性积液的检出率。目前 由于各种病因引起的胸腔积液各种单项指标检测的结果常有交 叉，难以鉴别，因此临床常采用多项指标的联合检测。本文联合 检测血清及胸腔积液ＣＥＡ、ＣＡ１２５、ＣＡ１９９肿瘤标志物含量，旨 在探讨其对胸腔积液性质的鉴别诊断价值。 １资料与方法 １．１研究对象选择２００８年４—１０月因胸腔积液在我院住院 患者６４例，其中恶性胸腔积液２９例，男２２例，女７例，平均年 ２．３ ３项肿瘤标志物测定对恶性血清和胸腔积液的诊断价值 龄６３岁。均经病理组织学或细胞学确诊，包括肺腺癌１７例、肺 鳞癌７例、小细胞未分化癌３例、恶性间皮瘤１例、食管癌伴胸 ＣＥＡ、ＣＡ１２５和ＣＡ１９９对恶性胸腔积液（不分病理类型）的诊 膜侵犯１例。良性胸腔积液３５例，男１９例，女１６例，平均年龄 断灵敏度分别为５８．６％（１７／２９），９３．１％（２７／２９），６５．５％（１９／ ５５岁，包括结核性胸膜炎２Ｏ例、肺炎９例、漏出性胸腔积液（肝 ２９）；特异性分别为８８．６％（３１／３５），２０．Ｏ％（７／３５），９１．４％（３２／ 硬化或心衰）６例，患者均依据临床、结核菌素试验、胸腔积液常 ３５）；２项或３项指标联合检测恶性胸腔积液的灵敏度为 规生化、细菌培养等检查确诊。 ９５．６％（２８／２９），特异性为９７．１％（３４／３５）。对血清的诊断灵敏 １．２检测方法采用微粒子发光酶免疫分析法（ＭＥＩＡ），检测 度分别为３１．０％（９／２９）、７２．４％（２１／２９）、３４．５％（１０／２９），特异 试剂盒及仪器均由美国雅培公司提供，结果判断标准：ＣＥＡ＞ 性分别为９１．４％（３２／３５）、３７．１％（１３／３５）、９４．３％（３３／３５），２ ５．０ｎｇ／ｍＬ、ＣＡ１２５＞３５Ｕ／ｍＬ、ＣＡ１９９＞３７Ｕ／ｍＬ为阳性。 项或３项指标联合检测恶性胸腔积液的灵敏度为６９．０％（２０／ １．３统计学处理数据以均数±标准差（ ±ｓ）表示，采用ｔ ２９），特异性为９４．３％（３３／３５）。 和Ｘ２检验，Ｐ＜０．０５有统计学意义。 ３讨论 ２结果 ＣＥＡ、ＣＡ１２５、ＣＡ１９９是临床广泛应用的肿瘤相关性抗原，在 恶性肿瘤组织中均有不同程度的表达。ＣＥＡ是一种广谱肿瘤 ２．１两组患者血清及胸腔积液ＣＥＡ、ＣＡ１２５、ＣＡ１９９测定 恶 性胸腔积液组血清及积液３项指标均显著高于良性组（Ｐ＜ 标志物，对内胚层分化来的恶性肿瘤，尤其在多种消化道肿瘤中 ０．０１），见表１。 都有不同程度的升高，它与肿瘤细胞的分化有关，分化越差， ＣＥＡ的值越高 ｊ。ＣＥＡ虽不能作为诊断某种恶性肿瘤的特异 表ｌ 两组患者血清及胸腔积液３项肿瘤标志物含量 性指标，但在恶性肿瘤的鉴别诊断，病情监测，疗效评价等方而， 仍有重要的临床价值。ＣＡ１９９是一种与胰腺癌、胆囊癌、结肠癌 和胃癌相关的抗原物质，在消化道肿瘤上皮内含量最高，特别是 胰腺癌。ＣＡ１２５是很重要的卵巢癌相关抗原，广泛存在于体腔 上皮起源的各种组织及这些组织发生的肿瘤中，在许多疾病中 均有升高。 本文结果显示，无论是血清还是胸腔积液，恶性组各项标志 物含量均高于良性组（Ｐ＜０．Ｏ１）。由于恶性肿瘤己侵犯胸膜， ２．２两组患者血清及胸腔积液中ＣＥＡ、ＣＡ１２５、ＣＡ１９９阳性率 癌细胞增殖、合成和释放此类肿瘤标志物至胸腔内的量增加，肿 比较ＣＥＡ和ＣＡ１９９在恶性胸腔积液组血清及积液中的阳性 瘤标志物滞留在胸腔内，不易被血循环带至肝脏代谢和灭活，同 率均明显高于良性组（Ｐ＜０．０５）。ＣＡ１２５在恶性组和良性组 时胸腔是相对封闭的空间，脱落坏死的肿瘤细胞含量也较高，使 血清与积液中的阳性率差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），见表２。 肿瘤抗原含量升高【２］，因而胸腔内浓度高于血清。据文献报 ・４８４・ 华北煤炭医学院学报２０１０年月第１２卷第４期Ｊ Ｎｏｒｔｈ Ｃｈｉｎａ Ｃｏａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ２０１０ Ｊｕｌｙ，１２（４） 道 ，ＣＡ１２５抗原分子有肺腺癌细胞的抗原决定簇１３０—２０和 １４５～９。因此ＣＡ１２５是卵巢癌和肺癌细胞共同具有的抗原，当 癌细胞大量增殖时，积液中ＣＡ１２５浓度明显增高。本文检测结 已知有５０％一８０％以上的良性反应性间皮细胞也表达 （９６．６％）。因此在临床上对于病因不明的胸腔积液患者，应采 用多项目联合检测以助良、恶性积液的鉴别。 参考文献 ［Ｊ］．江西医学检验，２００５，２３（５）：４１７ ［２］钱东华，左梦华，李丹，等．ＣＥＡ、ＣＡ１９９、ＣＹＦＲＡ２１—１测定对癌 性、结核性胸腔积液的鉴别诊断价值［Ｊ］．中国老年学杂志，２００７， ２７（２）：３５６ 郭以宝．肿瘤标志物联检对恶性胸腔积液的诊断价值 果证实此三项肿瘤标志物对良恶性胸腔积液的鉴别有一定意义。 ［１］余红，ＣＡ１２５，当谈症刺激间皮细胞，积液中也出现大量的ＣＡ１２５，故 在积液中不能据此来鉴别良、恶性 。本研究发现，在恶性积 液和良性积液中ＣＡ１２５阳性率没有显著差异，与某些文献报道 一致 Ｊ，证实单项ＣＡ１２５检测在区别恶性积液与良性积液中 价值不大。我们发现单一检测血清或胸腔积液中的ＣＥＡ和 ＣＡ１９９对诊断积液的性质有一定的意义，但敏感性均偏低，假阴 性较多，易造成漏诊。本文应用ＣＥＡ，ＣＡ１２５和ＣＡ１９９两项或 ［３］ 张薇，王进，武志芳，等．ＣＡ１２５在鉴别良恶性胸腔积液中的应 用分析［Ｊ］．山西医药杂志，２００６，３５（５）：４３０ ［４］ 黄家淼，杨剑，周仁荣，等．腹水／血清肿瘤标志物对良恶性腹水 的鉴别价值［Ｊ］．世界华人消化杂志，２００６，１４（１５）：１５３３ ［５］李长生，程邦昌，戈伟，等．血清和胸水中肿瘤标志物检测对老 年人胸腔积液的的诊断价值［Ｊ］．中华老年医学杂志，２００４，２３ （１Ｏ）：６９７ 三项肿瘤标志物联合检测恶性胸腔积液的诊断效果显示，联合 检测可提高单一恶性胸腔积液诊断的敏感性和特异性，并且在 不降低特异性的同时，可以明显提高恶性胸腔积液的敏感性 （２０１０—０４—２２收稿）（肖永红编辑） 甲肝灭活疫苗生产中聚乙二醇残留量测定 韩中山 （河北省唐山怡安生物工程有限公司［关键词］ 甲肝灭活疫苗聚乙二醇残留量测定 河北唐山０６３０２０） 碘溶液０．５ｍＬ，混匀，室温反应１５ｍｉｎ，照紫外一可见分光光度 法在用５３５ｎｍ处测定吸光度。同时以１ｍＬ水代替供试品溶液， ［中圈分类号】Ｒ ３９２—３３［文献标识码】Ｂ 【文章编号］１００８—６６３３（２０１０）０４—４８４一叭 同法操作，即为空白对照。 １．３．２标准曲线。精密量取１０、２０、３０、４｜Ｄ、５０ｗｇ／ｍＬＰＥＧ对照 品各１．０ｍＬ，加入０．５ｍｏｌ／Ｌ高氯酸溶液５．０ｍＬ，混匀，自“室温 放置ｌ５分钟”起，同供试品方法操作。 以标准ＰＥＧ的浓度（ｘ）为横坐标，以相应浓度的吸收度 （Ｙ）为纵坐标作图，将Ｘ值、Ｙ值输入计算机，应用统计学软件 ＳＴＡ１（１４）进行数据处理，得一标准曲线回归方程，由回归方程 及样品的稀释倍数计算出样品的ＰＥＧ残留量。 ２结果 甲肝灭活疫苗生产提纯中需用聚乙二醇（ＰＥＧ）去除中间产 品、半成品中的杂蛋白质，但这些产品中也残留了ＰＥＧ。Ｇ现用 紫外线分光光度法对ＰＥＧ进行测定，以使其保持在安全的范围。 １材料与方法 １．１主要材料及试剂ＰＥＧ６０００，０．５ｒｎｏｌ／Ｌ高氯酸溶液，５％氯 化钡溶液，１ｍｏｌ／Ｌ碘溶液，１０ｏｖＬｇ／ｍｌＰＥＧ对照品。 １．２主要仪器 ＳＰＥＣＴＲＯ ＵＶ—ＶＩＳ ＡＵＴＯ紫外分光光度计 Ｌａｂｏｍｅｄ，Ｉｎｅ，Ｕ．Ｓ．Ａ，离心机。 １．３检测方法 ２．１标准曲线（９９％可信限范围） 取不同浓度的ＰＥＧ对照 品，测定吸光值，重复３次，相关系数在０．９９２７—０．９９９３之间。 １．３．１供试品。取供试品适量，用水稀释，使蛋白质不高于 ｌ％，即为供试品溶液。精密量取供试品１．０ｍＬ，加入０．５ｍｏｌ／Ｌ 、表明ＰＥＧ浓度在１０～５０ｊｘｇ／ｍＬ范围内，ＰＥＧ对照品溶液与吸收 高氯酸溶液５．０ｍＬ，混匀，室温放置１５ｒａｉｎ，４０００ｒ／ｍｉｎ，离心 度具有很好的线性关系，见表１。 １０ｒａｉｎ。取上清液４ｍＬ，加入５％氯化钡溶液１．０ｍＬ和０．１ｍｏｌ／Ｌ 表１标准曲线回归方程及相关系数 表２ ６批甲肝灭活疫苗ＰＥＧ残留量测定结果 留量均小于１０Ｗｇ／ｍＬ，见表２。 ３讨论 通过６批疫苗ＰＥＧ残留量测定的结果可以看出，ＰＥＧ残留 量均小于１０１ｘｇ／ｍＬ，说明甲肝灭活疫苗生产工艺可行，建议甲肝 灭活疫苗残留ＰＥＧ残留量质量标准小于ｌ０ ／ｍＬ。 通过讨论及实验分析结果说明，ＰＥＧ残留量测定方法用于 甲肝灭活疫苗生产中测定残留ＰＥＧ残留量是可行的。 ２．２ ６批甲肝灭活疫苗ＰＥＧ残留量测定结果应用该方法进 （２０１０—０３—３０收稿）（岳静玲编辑） 行６批疫苗ＰＥＧ残留量测定，每批疫苗检测６次，结果ＰＥＧ残
