T-SPOT.TB在肺外结核诊断中的应用价值研究

实验与检验医学2019年6月第37卷第3期ExperimentalandLaboratoryMedicine,Jun.2019,Vol.37,No.3

·检验与临床·

T-SPOT.TB在肺外结核诊断中的应用价值研究

徐烨

(宜春市人民医院检验科袁江西宜春336000)

摘要:目的本研究旨在探讨T-SPOT.TB在肺外结核诊断中的价值遥方法本研究采用回顾性分析方法袁收集宜春市人民医院2015年9月至2016年10月收治并确诊为肺外结核患者87例的临床资料袁及50例非结核疾病患者和50例健康对SPOT.TB对肺外结核感染的诊断价值遥结果T-SPOT.TB对肺外结核诊断的敏感度尧特异度尧阳性预测值尧阴性预测值尧诊断照组作为对照袁对各组研究对象的一般临床资料尧T-SPOT.TB尧ESR尧结核抗体等几种方法的检验诊断性能进行比较袁研究T-

准确率为85.0%尧88.0%尧92.5%尧77.1%尧86.8%袁均显著高于结核抗体和血沉检测遥结论T-SPOT.TB在肺外结核感染的诊断中有较高的应用价值遥

关键词：肺外结核曰结核抗体曰T淋巴细胞斑点试验中图分类号：R446.61袁R52

文献标识码：A

文章编号：1674-1129(2019)03-0528-03

DOI院10.3969/j.issn.1674-1129.2019.03.059

肺外结核是指结核分枝杆菌侵染肺部以外的部位所引起的结核病遥肺外结核疾病呈现多脏器尧多样性袁而且临床症状不典型尧不明显袁大多数肺外结核来源于肺结核袁是由结核分枝杆菌感染肺部后通过血行播散及淋巴循环或逆行传播袁或通过结核病灶直接蔓延所致遥肺外结核按发病部位尧发病脏器命名遥肺外结核由于发病隐匿且标本获取困难尧病理表现不典型尧细菌学阳性率低等原因从而使得肺外结核的早期诊断受到遥T-SPOT.

TB检测是y一干扰素释放试验中的一种袁它是以激单个核细胞产生y一干扰素袁然后用酶联免疫方法检测y一干扰素从而判断是否有结核感染的一核诊断的一项主要技术遥

种技术[1]遥由于其灵敏度特异度较高而成为肺外结

核和结核病接触史袁使用免疫抑制剂袁HIV检测阳1.2主要仪器和试剂CO2培养箱渊美国Thermo公司冤曰结核分枝杆菌T-SPOT渊T-SPOT.TB冤试剂盒性遥

渊牛津Immunotec公司冤曰结核抗体试剂盒渊北京健乃喜生物技术有限公司冤

1.3方法收集患者一般临床资料袁对每个研究对象进行T-SPOT.TB尧ESR尧结核抗体等检测遥

1.3.1T-SPOT.TB检测采集6ml肝素抗凝血袁混匀袁4h内进行检测遥分离单个核细胞袁并制成细胞浓度2.5伊106个/ml左右的细胞工作液遥取出预包被活化抗体的板条袁每份标本分别加4孔袁即AIMV渊阴性对照冤尧抗原A渊ESAT-6冤尧抗原B渊CFP-CO2袁保持湿度冤温育16~18h遥洗板袁加入碱性磷酸酶标记的小鼠抗人IFN-酌单克隆抗体50滋l袁4~8益

早期分泌靶抗原6和培养滤过蛋白10为抗原袁刺

本文通过对我院近1年收治的临床考虑肺外结核患者的T-SPOT.TB尧结核抗体尧血沉等相关检测资料进行回顾性分析袁以评价T-SPOT.TB技术在肺外结核诊断中的临床应用价值遥1资料与方法

1.1研究对象收集宜春市人民医院2015年9月至2016年10月收治并确诊为肺外结核患者87例的临床资料袁及50例非结核疾病患者和50例健康对照组作为对照遥肺外结核纳入标准院优标本活检的组织病理结果显示为结核性肉芽肿和干酪样坏死组织遥悠局部脓液涂片或培养提示抗酸杆菌阳性遥忧临床表现尧影像学等支持结核尧排除其他疾病尧且诊断性抗结核有效者遥排除标准院肺结

10冤尧阳性对照50滋l袁然后在4孔中均加入100滋l配置好的细胞工作液遥置CO2培养箱渊37益袁5%

温育1h遥再次用PBS洗板3次袁加入显色底物50滋l袁室温暗处温育8min遥取出用蒸馏水冲洗终止数量遥

反应袁晾干袁显微镜下进行斑点计数袁并记录斑点1.3.2结果判断空白对照孔斑点数为0~5个且渊抗原A或抗原B孔的斑点数冤原渊空白对照孔斑点A或抗原B孔的斑点数冤逸2伊渊空白对照孔斑点数冤检测结果为阳性袁表明样本中存在针对结核杆菌特异的效应T细胞曰如果不符合上述标准且阳性对照孔正常时渊斑点数不少于20个冤检测结果数冤逸6或者空白对照孔斑点数为6~10个且渊抗原

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为1.3.3阴性遥

15mm/h1.3.4结血核沉抗检体测检测女性免跃疫20mm/h胶体金为法遥

阳性袁男性跃

1.4据分统析计为袁学阳性各分组析遥

样本采率用的统比计较软应件用SPSSPearson13.0字进2检验行数袁P<0.05为差异具有统计学意义遥2结果

2.1核尧50一例般非临床结核资料疾病及本研究50例共健康收集对照者87例的肺资料外结遥其中肺外结核患者组中包括男性61例袁女性26例45袁性例平均年龄渊48.43依18.23冤岁袁包括结核性胸膜炎1疾例腹膜炎尧淋巴8结结例尧结核核10性例脑尧膜炎骨关6节例结尧核结核13性例心尧结包核炎渊病尧患皮者下组组中织袁结男核性128例例及袁左女乳性结22核例1袁例平均曰非结年核27.35龄比例较袁依平均14.23差异年冤无龄岁统渊曰计35.18健康学意依对义16.12照组渊P>0.05冤中岁袁遥男冤遥

三性组25的性别例袁女龄

尧性年2.2组抗各原组A渊T-SPOT.TBESAT-6冤和抗检原测阳性B渊CFP-10率比较冤检肺测外阳性结核率分别为83.9%和79.3%袁均显著高于健康对照组和非结核疾病组遥由于患者对抗原A和抗原B的免疫反应性有所不同袁将抗原A和抗原B联合观察结果可显著提高检测的阳性率袁见表1遥

表1各组T-SPOT.TB检测阳性率比较

组别例数抗原A渊%冤抗原B渊%冤抗原A或B渊%冤健康对照组非结核疾病组50肺外结核组

508710.00.0

83.910.00.0

79.312.00.0

86.22.3T-SPOT.TB几种检测预测的项敏目感在度肺尧外结核中的诊断性能比较77.1%值虽然抗尧尧86.8%诊断准原A尧抗袁确原均率显分特B著高别为异度尧阳性预测值尧阴性

均有较于结85.0%高核的抗尧敏体88.0%感和性血尧92.5%尧

尧特沉异检性测及袁诊断准确率袁但是联合抗原A和抗原B检测能显著提高诊断准确率袁见表2遥3讨论

我国是除印度以外的第二大结核高负担国14.3%家袁估计每年新发130万病例袁占全球结核病的

[2]的25%-30%遥而有袁在资料中国显示全球约为9.7%-11.8%肺外结核约占总[3袁4]遥由结于肺核表2几种检测项目在肺外结核中的诊断性能比较

检测项目敏感性特异性阳性阴性诊断渊渊预测值渊%冤预测值渊%冤准确率渊%冤

抗原A抗原B83.9%冤90.0%冤抗原A/B79.376.2结核抗体85.090.093.571.486.1血沉

57.488.093.277.183.2.676.092.520.080.666.150.686.852.6.2.2外结核存在部位不同袁临床表现差异及其复杂性袁故肺外结核漏诊尧误诊较为常见袁诊断较为困难遥传统的结核诊断方法有血沉尧结核菌涂片尧结核菌培养及皮肤结核菌素试验等袁其中病原学诊断即结核菌涂片及结核菌培养是结核诊断的野金标准冶遥但是肺外结核发病形式不定袁多脏器性袁临床特征不典型袁获得细菌学依据困难袁有些需要手术或穿刺活检才能获得标本袁故了病原学诊断在肺外结核中的应用遥而且培养法需要2~8周才能获得结果袁耗时过长袁结核菌涂片则敏感性太低袁通常需要>5000个菌/ml才能检测到阳性结果

[5]遥

结核抗体检测是以纯化的结核分枝杆菌细胞

壁应IgM蛋白答遥为它抗基是原础已宿来检袁检主测感染测血血清结清中结核分中相核分枝应杆菌的抗枝杆菌抗后体的体IgG原液或者特免异疫

性的抗体袁操作简单尧快速尧不需要活细胞是它的优点遥但是结核抗体的检测敏感度可能与个人的免疫状态有关袁机体免疫低下时不能产生抗体则容易造成假阴性袁另外如果患者正处窗口期袁未产生抗体也容易造成假阴性遥又由于抗体交叉反应易造成假阳性结果遥崔鲂的研究中显示结核抗体59.5%在肺外结核诊断中的灵敏度和特异度分别为

的研究和中72.4%TB-Ab袁本对结研究核结的果诊与断之相灵敏近[6]度遥尧特张晓异度梅尧等阳76.1%性预测尧61.1%值尧阴性预测值分别为60.6%尧76.5%尧[7]EAST-6T-SPOT.TB遥

是一种利用结核特素袁然后和再CFP-10用ELISPOT刺激技术单个检核测细胞释放释放异出的y性一抗y干体一扰干扰素袁从而判断结核感染的一种方法遥该方法灵敏度高袁特异性好袁被广泛应用于结核的诊断遥本研究中显示在肺外结核诊断中T-SPOT.TB敏感度和特异度为85.0%和88.0%袁远远优于结核抗体尧血沉等项目遥Kim的一项研究中显示对于活动性肺外

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正常的成年人活动性结核诊断敏感性为83%~97%

[9]度仅为47%[8]遥孙瑛等指出T-SPOT.TB检测对免疫

结核袁T-SPOT.TB的敏感性为94%袁而PPD的敏感

遥肺外结核由于其症状不典型袁病变部位不确定袁故细菌学标本较难获得袁而结核T细胞斑点试验使用的是静脉血袁不受病变部位影响袁因而拓宽了它的应用范围遥另一方面袁T-SPOT.TB也不受机体免疫力的影响袁万荣等对35例HIV合并肺结核患者的研究T-SPOT.TB的敏感度为74.3%袁特异度

[10]SPOT检测的灵敏度为85.1%[11]遥T-SPOT.TB在各种肺外结核的诊断中敏感性均较好袁如结核性胸膜炎尧肠结核等[12袁13]遥T-SPOT.TB用于诊断结核的标本并不局限于血液标本袁结核抗原特异性T细

为86.7%袁远高于PPD试验遥曾江等对87例艾滋病合并菌阴性肺结核患者的一项研究显示T-

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胞具有向病变部位集中的特点袁所以也可以用支气管肺泡灌洗液尧痰液尧胸腹水尧脑脊液等等对结核特别是肺外结核进行诊断遥刘珍琼等对32例结核性胸膜炎患者的胸腔积液做了T-SPOT.TB检测袁检测灵敏度为93.75%袁特异度为96.15%袁且均

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高于外周血T-SPOT检测遥虽然T-SPOT能够对各种肺外结核进行诊断袁如结核性胸膜炎尧结核性脑膜炎尧肾结核尧肠结核等袁但是它不能对感染部位进行定位袁需要根据其他检查和临床体征做出综合判断袁这也是它的局限性所在[15]遥

综上所述袁T-SPOT.TB能有效的诊断肺外结

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