承 德 医 学 院 学 报 ＶＯ１．３２ Ｎｏ．１ ２０１５ ２．２对小鼠棉球肉芽肿形成的影响三黄颗粒虽然对 小鼠棉球肉芽肿具有抑制作用，但与空白对照组小鼠棉 果更好。在此基础上，我们将继续研究三黄颗粒和素代三 黄颗粒对不同类型炎症模型的影响，并对其可能的作用 机制作进一步的探索。 球肉芽肿重量比较，差异无统计学意义（尸＞０．０５）；阳性 对照组、素代三黄颗粒组小鼠棉球肉芽肿重量明显低于 【参考文献】 ［１】李红军．黄芩提取物抗炎活性试验研究［Ｊ】．特产研究， ２０１３，３５（２）：１５－１８． 空白对照组和三黄颗粒组（Ｐ＜０．０５）。见附表： 附表三黄颗粒与素代三黄颗粒对小鼠棉球肉芽肿形成的影响（２＋ｓ） 【２】龚明涛，虞丽芳，陈庆华，等．大鼠灌胃黄芩苷及其苷元黄 芩素的药动学研究【Ｊ］．中草药，２００９，４０（３）：３９２－３９４． 【３】Ｔａｉｍｉｎｇ Ｌ＿ＸｕｅｈｕａＪ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆｂａｉｃａｌｉｎ ａｎｄ ｂａｉｃａｌｅｉｎ ｉｎ ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ，２００６，９５（６）： １３２６－１３３３． 与空白对照组比较： ＜０．０５；与三黄颗粒组比较： Ｐ＜０．０５ 【４】 许伯慧，严菲．黄芩苷及其苷元黄芩素体内过程的研究进 ３讨论 本研究通过建立大鼠足跖肿胀模型和小鼠棉球肉芽 肿模型等两个非特异性炎症反应模型，模拟炎症不同时 展［Ｊ］．南通大学学报，２０１０，３０（３）：２２０＿－２２３． 【５】谢林利，周密，陈勇川，等．黄芩苷、黄芩素抑制铜绿假单 胞菌生物膜形成的研究［Ｊ］．中国药房，２０１０，２１（３９）：３６５１－ ３６５３． 期的病理表现，考察三黄颗粒和素代三黄颗粒对不同时 期炎症模型的抗炎效果。结果显示，灌胃给药三黄颗粒和 素代三黄颗粒均可抑制炎症的急性期病变和炎症后期结 缔组织生成，而素代三黄颗粒的抗炎效果明显优于三黄 ［６］杨巧芳，孟庆刚．炎症动物模型探要［Ｊ］．中华中医药学刊， ２００８，２６（３）：５１６－－５１７． ［７］龚新荣，赵万红，董晓霞，等．湖北两产地黄芩抗炎镇痛作 用的研究【Ｊ］．中国实用医药，２０１３，８（１３）：２５８－２５９． （收稿日期：２０１４－０４－２６） 颗粒。因此提示，黄芩素替代黄芩苷制成复方制剂抗炎效 生脉饮中人参总皂苷与麦冬总皂苷的含量测定 苗策禹，赵文普，刘喜纲，刘翠哲 ，刘沛 （河北省中药研究与开发重点实验室／承德医学院中药研究所，河北承德００７０００） 【摘要】目的：建立测定生脉饮中人参总皂苷与麦冬总皂苷含量的方法。方法：以人参皂苷Ｒｅ为对照品，香草 醛比色法测定生脉饮中人参总皂苷的含量；以人参皂苷Ｒｅ为对照品，高氯酸法测定生脉饮中总皂苷的含量； 建立两种测定方法之间的换算系数，以得到以鲁斯考皂苷元为对照品计麦冬总皂苷的含量。结果：生脉饮中 人参总皂苷的线性范围：０．０７５２－０．２ｏｏ６ｍｇ（ｒ＝－ｏ．９９９３），平均回收率为１００．６４￣／ｏ，ＲＳＤ为２．８８％；生脉饮中总皂 苷的线性范围：０．１８８１ｍｇ－０．８１５１ｍｇ（ｒ－＝Ｏ．９９９６），平均回收率为１０１．３３％，ＲＳＤ为２．０１％。麦冬总皂苷含量计算 公式为Ｃ＝（Ａ１．８２Ｂ）／４．１６。生脉饮中人参总皂苷含量为１８．１４４８ｍｇ／ｇ，总皂苷含量为３９．１２０８ｍｇ／ｇ；麦冬总皂 苷含量为１．４６５７ｍｇ／ｇ。结论：本研究建立的方法可分别测定生脉饮中人参总皂苷和麦冬总皂苷的含量，可作 为生脉饮中人参总皂苷与麦冬总皂苷的质量控制方法。 【关键词】人参总皂苷；麦冬总皂苷；比色法；生脉饮 【中图分类号１Ｒ９１７ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】ｌ０ ．６８７９（２０ｌ５）０１—００１２－＿０３ ＤＥＴＥＲＭＩｊ ｎｏＮ ＯＦ ＧＩＮＳＥＮｏＳＩＤＥＳ ＡＮＤ ＯＰ】｝Ｉ】＿０ ＤＧｏＮＥＮ ＩＮ ＳＨＥＮＧＭ ＩＹ口 ＭＩＡＯＣｅ－ｙｕ，ＺＨＡＯＷｅｎ－ｐｕ，Ｌ１ＵＸｉ－ｇａｎｇ，ｅｔａｌ （ＨｅｂｅｉＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＥｘｐｌｏｉｔａｔｉｏｎ ｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ， ＣｈｅｎｇｄｅＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，ＨｅｂｅｉＣｈｅｎｇｄｅ０６７０００，Ｃｈｉｎａ） ｝河北省高校重点学科“中药学”资助 △通讯作者 ・ｌ２・ 承 德 医 学 院 学 报 ＶＯ１．３２ Ｎｏ．１ ２０１５ ［ＡＢＳＴＲＡＣＴＩ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｄｅｔｅ彻ｉＩ】ｅ ｔｈｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ａｎｄ ｏｐｈｉｏｐｏｇｏｎｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ Ｓｈｅｎｇｍａｉｙｉｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｖａｎｉｌｌｉｎ ｃｏｌｏｒｉｍ￣ｙ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ Ｓｈｅｎｇｍａｉｙｉｎ ｗｉｔｈ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｅ ａｓ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ， ｐｅｒｃｈｌｏｒｉｃ ａｃｉｄｃｏｌｏｒｉｍｅｌｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｔｏｔａｌ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｃｏｎｔｅｎｔｉｎ Ｓｈｅｎｇｍａｉｙｉｎｗｉｔｈｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｅ ａｓｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ．Ｔｈｅｏｐｈｉｏｐｏｇｏｎｉｎ￣ｎｔｅｎｔｍ Ｓｈｅｎｇｍａｉｙｉｎｗａｓ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄｂｙｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｂｅｔｗｅｅｎａｂｏｖｉｎｇ ｔｗｏ ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ ｒａｎｇｅ ｏｆｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ｉｎ Ｓｈｅｎｇｍａｉｙｉｎ ｗａｓ ０．０７５２－０．２００６ｍｇ（，＝０．９９９３），ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｍｔｅ ｗａｓ １００．６４％（ＲＳＤ＝２．８８％）；Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ ｒａｎｇｅ ｏｆｔｏｔａｌ ｓａｐｏｎｉｍ ｉｎ Ｓｈｅｎｇｍａｉｙｉｎ ｗａｓ ０．１８８１ｍｇ－Ｏ．８１５１ｍｇ （ ．９９９６），ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｗａｓ １０１．３３％（ＲＳＤ＝２．０１％）．Ｔｈｅ ｆｏｒｍｕｌａ ｏｆｃａｌｃｕｌａｔｉｎｇ ｏｐｈｉｏｐｏｇｏｎｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ＳｈｅｎｇｍａｉｙｉｎｗａｓＣ＝（Ａ１．８２Ｂ）／４．１６．ｈｅｇｉＴｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ￣ｎｔｅｎｔｉｎＳｈｅｎｇｍａｉｙｉｎｗａｓ １８．１４４８ｍｇ／ｇ，ｔｏｔａｌ ｓａｐｏｎｉｎｓｃ￣ｔｅｎｔｗａｓ ３９．１２０８ｍｇ／ｇ，ｏｐｈｉｏｐｏｇｏｎｉｎ￣ｎｔｅｎｔ Ｗａｓ １．４６５７ｍｇ／ｇ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ：ｈｅ Ｔｍｅｔｈｏｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｃａｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｈｅ￣ｎｔｔｅｎｔ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ａｎｄｏｐｈｉｏｐｏｇｏｎｉｎｉｎ Ｓｈｅｎｇｍａｉｙｉｎｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄｃａｎｂｅ ａｃｔｅｄａｓ ｑｕａＵｔｙｃｏｎｔｒｏｌｍｅｔｈｏｄｏｆｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ａｎｄ ｏｐｈｉｏｐｏｇｏｎｉｎｉｎ Ｓｈｅｎｇｍａｉｙｉｎ． ［ＫＥＹＷＯＲＯＳ］Ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ；Ｏｐｈｉｏｐｏｇｏｎｉｎ；Ｃｏｌｏｒｉｍｅｌｉｆｃｍｅｔｈｏｄ；Ｓｈｅｎｇｍａｉｙｉｎ 生脉饮由人参、麦冬、五味子组成，人参总皂苷和麦 １５ｒａｉｎ，冰浴５ｍｉｎ，加入５ＩＩ１ｌ冰醋酸。以随行试剂为空白，在 ２００－７００ｎｍｇｌｚ扫描。结果显示，对照品与供试品在５４５ｎｍ 冬总皂苷是其有效部 “。文献中多为单味人参和麦冬 药材中总皂苷含量测定方法 ，只有许敏等 对生脉饮 中麦冬总皂苷的含量进行了测定。经多次验证，生脉饮样 品液香草醛法显色后，３９５ｎｍ处没有典型麦冬总皂苷吸 收蜂；高氯酸法显色后，人参总皂苷与麦冬总皂苷均在 ３９０ｎｍ￣右有最大吸收峰，无法单独测定其中的一种。为 此，本研究建立了分别测定生脉饮中人参总皂苷和麦冬 总皂苷含量的方法。 处有最大吸收，且阴性供试品无干扰。 ２．１．４标准曲线的制备：分别吸取人参皂苷Ｒｅ对照品溶 液６ｏ、８０、１００、１２０、１４０、１６０ ｌ于比色管中，按２．１．３的方法 在５４５ｎｍ￣测定。以吸光度为纵坐标，人参皂苷Ｒｅ含量为 横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：ｙ－－－－４．３３１４ｘ＋０．００５４， 口０．９９９３，线性范围是０．０７５２－０．２１Ｘｌ６ｍｇ。 ２．１．５方法学考察：精密度、重复性良好，ＲＳＤ分别为 ０．３１％、２．４１％。供试品液在８ｈ内稳定，Ｉ Ｄ为２． ；供试 １仪器与试药 ＨＰ一８４５３紫外可见分光光度计（美国惠普）。人参、 麦冬、五味子（同仁堂承德分公司）；人参皂苷Ｒｅ、鲁斯 品液显色后在３０ｍｉｎ内稳定，ＲＳＤ为２．９０％。取已知含量的 供试品溶液６份，分别精密加入一定量的人参皂苷Ｒｅ对照 品后进行含量测定，计算回收率，结果人参皂苷Ｒｅ平均回 收率为１００．６４０／ｏ，Ｉ Ｄ为２．８８％。 考皂苷元对照品（成都曼斯特生物科技有限公司，批号 ＭＵＳＴ—ｌ１０４１２０ｌ、１ １０７２５）。 ２方法、结果与分析 ２．１香草醛法测定生脉饮中人参总皂苷的含量 ２．１．１对照品液制备：精称人参皂苷Ｒｅ对照品１２．５４ｍｇ ２．１．６生脉饮中人参总皂苷的含量测定：取人参１ｇ、麦 冬 、五味子１ｇ，平行制备３份，按２．１．２和２．１．３的方法测 定吸光度，计算人参总皂苷的含量。结果显示，３批样品人 参总皂苷的平均含量为１８．１４４８ｍｇ／ｇ。 ２．２高氯酸法测定生脉饮中总皂苷含量 ２．２．１ 对照品液制备：精称鲁斯考皂苷元对照品 于１０ｍｌ量瓶中，甲醇溶解定容，即得。 ２．１．２供试品液制备：取人参ｌｇ、麦冬 、五味子ｌｇ于 具塞三角瓶中，８倍量６５％乙醇超声提取３次，每次ｌｈ，过 滤，滤液浓缩至稠膏状，用水饱和的正丁醇萃取４次，每次 １０ｍｌ，合并正丁醇液，水层弃去，用０．１ｍｏｌ／Ｌ的Ｎａ０Ｈ溶液 洗正丁醇层２次，每次１０ｍｌ，弃去Ｎａ０Ｈ层，回收正丁醇，残 渣用甲醇溶解定容至１０ｍｌ。同法制备不含人参的阴性供 试品液。 ｌ１．９６ｍｇ干１０ｍｌ￣：瓶中，甲醇溶解定容。人参皂苷Ｒｅ对照 品溶液制备方法同２．１．１。 ２．２．２供试品液制备：方法同２．１．２，同法制备不含人 参、麦冬的阴性供试品溶液。 ２．２．３检测波长确定：精密吸取鲁斯考皂苷元、人参 皂苷Ｒｅ对照品溶液各２００“ｌ，供试品和阴性供试品液各 ３００ ｌ于比色管中，挥干溶剂，精密加入高氯酸５ｍｌ，６５℃ 水浴１５ｒａｉｎ，冰浴５ｍｉｎ，以随行试剂为空白，２００＿－７（￣ｍａ ・２．１．３检测波长确定：精取对照品、供试品和阴性供试 品液各１００ ｌ至比色管中，挥干溶剂，分别精密加入新配 的５％香草醛一冰醋酸溶液０．２ｍｌ、高氯酸０．８ｍｌ，６０￣Ｃｊ￣浴 １３・ 承 德 医 学 院 学 报 ＶＯ１．３２ Ｎｏ．１ ２０１５ 扫描，结果鲁斯考皂苷元在３９７ｎｍ处有最大吸收、人参皂 苷Ｒｅ在３８６ｎｍ处有最大吸收，供试品在３８４ｎｍ处有最大 吸收，阴性样品无干扰，故确定以人参皂苷Ｒｅ为对照品在 ３８６ｎｍｇ．ｋ测定。 以鲁斯考皂苷元为对照品测得值的４．１６倍。 因此，本研究确定以鲁斯考皂苷元为对照品计麦 冬总皂苷含量的换算公式为：Ｃ＝（Ａ－１．８２Ｂ）／４．１６。式 中：Ａ一以人参皂苷Ｒｅ为对照品，高氯酸法测定生脉饮中 总皂苷的含量；Ｂ一香草醛法测定生脉饮中人参总皂苷的 含量；Ｃ一生脉饮中以鲁斯考皂苷元为对照品计麦冬总皂 苷的含量。 ２．３．２生脉饮中麦冬总皂苷的含量：取人参１ｇ、麦冬 、 五味子１ｇ，平行制备３份，按２．１．２的方法制备样品溶液， 按２．２、２．３．１的方法测定生脉饮中麦冬总皂苷的含量，结 果麦冬总皂苷平均含量为１．４６５７ｍｇ／ｇ。 ２．２．４标准曲线制备：精密吸取人参皂苷Ｒｅ对照 品溶液１５０、２５０、３５０、４５０、５５０、６５０ １于比色管中，按 ２．２．３的方法在３８６ｎｍ处测定。以吸光度为纵坐标， 人参皂苷Ｒｅ含量为横坐标，绘制标准曲线，得回归 方程：ｙ＝１．１８６６ｘ＋０．０１１２，ｒ＝０．９９９６，线性范围是 ０．１８８１一Ｏ．８１５１ｍｇ。 ２．２．５方法学考察：精密度、重复性良好，ＲＳＤ分别为 ０．５３％、２．１８％。供试品液在８ｈ内稳定，ＲＳＤ为０．６７０／０；供试 品液显色后在３０ｍｉｎ内稳定，ＲＳＤ为０．５０％。取已知含量的 供试品溶液６份，分别精密加入一定量的人参皂苷ＲｅＸｑ照 品后进行含量测定，计算回收率，结果人参皂苷Ｒｅ平均回 收率为１００．３３％，ＲＳＤ为２．０１％。 ２．２．６生脉饮中总皂苷的含量测定：取人参ｌｇ、麦冬 、 五味子ｌｇ，平行制备３份，按２．２．２和２．２．３的方法测定吸 光度，计算总皂苷的含量。结果显示，３批样品总皂苷的平 均含量为３９．１２０８ｍｇ／ｇ。 ２．３ 生脉饮中麦冬总皂苷的含量测定 ３讨论 高氯酸法是测定麦冬中麦冬总皂苷含量的常用方 法，但以高氯酸法检测时，生脉饮中人参皂苷与麦冬皂苷 的最大吸收波长相近，无法单独测定麦冬总皂苷的含量。 香草醛法只能测定人参皂苷而无法测定麦冬皂苷的含 量。本研究前期曾考虑以茴香醛法测定生脉饮中麦冬总 皂苷，但显色后吸收峰不明显，重复性差，测定结果不准 确。因此，本研究建立换算系数法计算得到生脉饮中的麦 冬总皂苷含量，可作为生脉制剂以及其它含人参、麦冬制 剂中麦冬总皂苷含量的测定方法。 ２．３．１确定换算系数：由于香草醛法显色后未发现典型 麦冬总皂苷吸收峰，高氯酸法无法单独测定麦冬总皂苷 的含量，因此考虑以高氯酸法测得的总皂苷含量减去香 草醛法测得的人参总皂苷的含量，得到麦冬总皂苷的含 量。预实验发现，高氯酸法生脉饮中人参总皂苷含量的测 定值是香草醛法的１．８２倍；２０１０￣ｐ版 中国药典 中，麦冬 药材麦冬总皂苷的含量以鲁斯考皂苷元为对照品计，而 本研究麦冬总皂苷以人参皂苷Ｒｅ为对照品测定，预实验 【参考文献】 …１ 严永清．生脉散口服液的综合研究ＩＭ】．北京：中国医药 科技出版社，１９９０．１－７． ［２】 桂双英，周亚球．比色法测定人参中人参总皂苷的含量【Ｊ］． 安徽中医学院学报，２００３，２２（４）：５１－５２． 【３］许敏，高英，李卫民．麦冬总皂苷含量测定方法的研究［Ｊ］． 临床医药实践，２０１０，１９（５Ｂ）：５９６－－５９７． 【４】许敏．生脉饮复方有效部位纯化工艺初探及麦冬药材的 质量标准研究［Ｄ］．广州：广州中医药大学，２０１０． 确定以人参皂苷Ｒｅ为对照品测得的麦冬总皂苷含量是 【鳄（通易０ ）【珂Ｃ通 ｏ （迥 。 ）（曙（通 。歌×鲴 ×曙Ｃ遗幻 ×鲴．（谴蜀。 Ｇ爰 （收稿日期：２０１４－０４－２８） （基础医学栏目编辑：陈志宏） ）（曙Ｇ ）１ Ｋ曙０＆ ）１ ）（绍融） 关节镜治疗踝关节继发性骨关节炎中短期疗效分析 陈永良 ，刘清晨 ，付丽敏 ，吕永明 ，徐丛 （１．承德医学院附属医院关节外科，河北承德０６７０００；２．宽城县医院） 【摘要】目的：探讨应用踝关节镜治疗踝关节继发性骨关节炎的疗效。方法：９例踝关节骨关节炎患者行踝关节 镜检查和关节镜手术治疗。结果：所有患者均获得随访，术后平均随访ｌ８个月。根据美国足踝骨科协会（ＡＯＦＡＳ） △通讯作者 ・１４・