微波辅助提取黄芪多糖及含量测定

时珍国医国药２００８年第１９卷第４期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２００８　ＶＯＬ．１９　ＮＯ．４　微波辅助提取黄芪多糖及含量测定　龚苏晓　，高展　，张铁军　，杨俊红　，邸倩倩　３００１９３；２．天津大学，天津３００１９３）　（１．天津药物研究院，天津摘要：目的以微波从黄芪中提取多糖，并测定其含量。方法运用微波技术提取黄芪多糖，采用正交设计法优选苯酚一　浓硫酸法显色务件，并测定其多糖含量。结果苯酚一浓硫酸法的最佳显色条件为５％苯酚溶液的用量为１　ｒｎｌ，浓硫酸用　量为５　ｒｎｌ，水浴温度为１００％，水浴时间为１５　ｍｉｎ；微波辅助提取黄芪多糖的最佳功率和时间为９００　Ｗ和３０　ｍｉｎ。结论　微波辅助提取黄芪多糖，反应速度加快，实验结果令人满意。　关键词：黄芪；　多糖；苯酚一硫酸法；微波提取　中图分类号：Ｒ２８４．２　文献标识码：Ａ　文章编号：１００８－０８０５（２００８）０４－０７８４－０２　Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ　ＥＸｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　０ｆ　Ｐ０ｌｖｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　０ｆ　Ｒａｄｉｘ　Ａｓｔｒａｇａｌｉ　ＧＯＮＧ　Ｓｕ—ｘｉａｏ。，ＧＡＯ　Ｚｈａｎ　，ＺＨＡＮＧ　Ｔｉｅ－ｊｕｎ　，ＹＡＮＧ　Ｊｕｎ－ｈｏｎｇ　，ＤＩ　Ｑｉａｎ－ｑｉａｎ　（１．　０ｎｊｉｎ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，　０　ｎ，３０ｏ１９３，Ｃｈｉｎａ；２．ｎ０ｎｊｉｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ｎ０ｎｊｉｎ，　３００１９３．Ｃ　ｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｆｒｏｍ　Ｒａｄｉｘ　Ａｓｔｒａｇａｌｉ．ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｉｃｒｏｗａｖｅ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｉｔｓ　ｃｏｎｔｅｎｔ．　Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｆｒｏｍ　Ｒａｄｉｘ　Ａｓｔｒａｇａｌｉ．ｗｅｒｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｂｙ　ｍｉｃｒｏｗａｖｅ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．Ｔｈｅ　ｗａｙ　ｏｆ　ｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｆｒｏｍ　Ｒａｄｉｘ　Ａｓｔｒａｇａｌｉ　ｗａｓ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｂｙ　ｐｈｅｎｏｌ—ｓｕｌｆｕｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｌｌｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｗａｙ　ｏｆ　ｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ａｓ　ｆｏｌｌｏｗｓ：１．０　ｍｌ　５％ｐｈｅｎｏｌ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｗａｓ　ａｄｄｅｄ　ｔｏ　２．０　ｍｌ　ｔｅｓｔｉｎｇ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｍｉｘｅｄ．　Ｔｈｅｎ　５．０　ｍｌ　ｃｏｎｃｅｒｎｔｒａｔｅｄ　ｓｕｌｆｕｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｗａｓ　ａｄｄｅｄ　ｑｕｉｃｋｌｙ　ｄｒｏｐ　ｂｙ　ｄｒｏｐ．Ａｔｉｅｒ　ｓｅｔ　ａｔ　ａｍｂｉｅｎｃｅ　ｆｏｒ　５　ｍｉｎ。ｈｅａｔｅｄ　ｉｎ　ｂｏｉｌｅｄ　ｗａｔｅｒ　ｏｒ　１５　ｍｉｎ，ｆｏｌｆｌｏｗｅｄ　ｂｙ　ｃｏｏｌｉｎｇ　ｉｎ　ｃｏｌｄ　ｗａｔｅｒ；ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　Ｗａｓ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｕｎｄｅｒ　９００Ｗ　ｍｉｃｒｏｗａｖｅ　ｐｏｗｅｒ　ｆｏｒ　３０　ｍｉｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｃａｎ　ｂｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｒａｄ／ｘ　Ａｓｔｒａｇａｌｉ　ｂｙ　ｍｉｃｒｏｗａｖｅ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｒａｄｉｘ　Ａｓｔｒａｇａｌｉ；Ｐｏｌｙｓａｅｅｈａｒｉｄｅｓ；Ｐｈｅｎｏｌ—ｓｕｌｆｕｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｍｅｔｈｏｄ；　Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ　黄芪是豆科植物蒙古黄芪Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）　析纯，天津市化学试剂三厂）。其它试剂均为分析纯。　Ｂｇｅ．ｖａｒ．ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ（Ｂｇｅ．）Ｈｓｉａｏ或膜荚黄芪Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ＩＴｔｅｍｂｒａ—　２方法与结果　ｌ￣ｌｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ）Ｂｇｅ．的干燥根，是重要的益气中药，其性甘、温，人　２．１精制黄芪多糖的制备取黄芪饮片５００　ｇ，加入１０倍量的　肺、脾经，具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌的功效　。　蒸馏水７０％浸提２　ｈ，滤过，滤渣加入８倍量水再次提取２　ｈ，滤　黄芪的化学成分主要为多糖类、皂苷类、黄酮类及氨基酸类，另外　过。两次滤液合并后浓缩至４００　ｍｌ，加入２．５倍量９５％乙醇，低　还含有单糖、低聚糖、黏液质、苦味素、胆碱、甜菜碱、叶酸等成　温静置过夜，离心，沉淀用１５０　ｍｌ蒸馏水溶解后，加入等体积５％　分　Ｊ。黄芪多糖是黄芪补气的主要活性物质，大量体内外实验　三氯乙酸～正丁醇液反复３次除蛋白，离心，上清液用２　ｍｏｌ／Ｌ　及临床研究表明，黄芪多糖具有增强机体免疫功能、强心、降压、　ＮａＯＨ调ｐＨ＝７．０，离心，上清液加入２．５倍量９５％乙醇４℃静置　降血糖、抗应激、抗肿瘤、抗病毒、抗辐射、抗氧化等多种药理　４８　ｈ，离心，沉淀用７５　ｍｌ蒸馏水溶解，离心，上清液用中空纤维膜　功效　。　超滤，截留分子量６　０００以上的药液，浓缩，冷冻干燥得黄芪多糖　　近年来微波技术在天然产物成分提取领域得到了很大的发　纯品。展和应用，主要是利用微波的热效应。微波加热具有穿透力强、　２．２黄芪多糖的含量测定方法　选择性高、加热效率高、耗能少、成本低、操作简便等特点。微波　２．２．１精制黄芪多糖供试液的制备精密称定６０％干燥至恒重　辅助提取法提取产物的副产品少，易分离提取，且微波加热易使　的黄芪多糖１０　ｍｇ，加少量蒸馏水，微热使其全部溶解后，定容至　２５０　ｍｌ量瓶中。　植物细胞壁破裂而有效提高提取率。　目前黄芪多糖的微波辅助提取的有关报道较少，本文采用微　２．２．２　５％苯酚试剂的配制取苯酚１００　ｇ，加铝片０．１　ｇ和碳酸　波辅助水提醇析法提取黄芪多糖并用苯酚一浓硫酸法测定多糖　氢钠０．０５　ｇ，蒸馏，收集１８２％馏分，称取此馏分５　ｇ，加水定容至　含量，为以后黄芪多糖微波提取法的开发利用提供依据。　１００　ｍｌ，置棕色瓶中存冰箱备用。　１仪器与材料　２．２．３苯酚一浓硫酸法最大吸收波长的确定精密吸取２　ｍｌ精　ＵＶ一１６０１型可见紫外分光光度计（日本岛津）。ＡＢ一１０４　制黄芪多糖供试液，另精密吸取蒸馏水２　ｍｌ作空白对照，分别加　型电子分析天平（梅特勒一托利多上海仪器有限公司生产）。冷　入５％苯酚溶液１　ｍｌ，混合均匀后快速加入浓硫酸５．０　ｍｌ，即刻　冻干燥机（Ｅｄｗａｒｄｓ）。中空纤维膜（截流Ｍｒ６　０００，天津膜天膜工　摇匀，室温静置５　ｍｉｎ，沸水浴加热２０　ｍｉｎ，取出，流水冷至室温，　程技术有限公司）。　用紫外可见分光光度计在１９０～９００　ｎｍ范围内扫描，确定最大吸　黄芪购于天津市中药饮片厂，经天津药物研究院中药现代研　收波长为４９０　ｎｍ。　究部张铁军研究员鉴定为蒙古黄芪。葡萄糖（分析纯，天津市化　２．２．４显色方法的优选设计５％苯酚溶液的用量（Ａ）、浓硫酸　学试剂一厂）。苯酚（分析纯，天津市化学试剂一厂）。硫酸（分　的用量（Ｂ）、水浴的温度（Ｃ）、水浴的时间（Ｄ）４个因素，每个因　素取３个水平，选用Ｌｑ（３　）正交表进行实验。每组实验均精密　量取精制黄芪多糖供试液２．０　ｍｌ，按正交表中方案显色，测定　收稿日期：２００７－０５—２８；修订日期：２００７－０９－２５　４９０　ａｍ波长处的吸收度，以吸收值为评价指标，另同时测定２　ｈ　基金项目：国家自然科学基金项目（Ｎｏ．５０５７６０６６）　内吸收值的稳定性（每间隔３０　ｒａｉｎ测１次），计算吸收值的ＲＳＤ。　作者简介：龚苏晓（１９７５一），女（汉族），江苏昆山人，现任天津药物研究院　见表１—２。　助理研究员，学士学位，主要从事中药制剂研究工作．　・７８４・　维普资讯 http://www.cqvip.com ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２００８　ＶＯＬ．１９　ＮＯ．４　时珍国医国药２００８年第１９卷第４期　表１因素水平　水平　酾酾Ａ诵丽　丽　Ｂ疆　孤Ｃ　而Ｄ　加入其中，以“标准曲线”项下的操作，测定回收率。结果回收率　平均值为１００．３％，ＲＳＤ＝２．０４９％（ｎ＝６）。　２．２．６　换算因子的测定分别取０．２　ｍｌ黄芪多糖供试液，以　“标准曲线”项下操作测定Ａ值，计算供试液中葡萄糖含量，按下　式计算换算因子，＝Ｗ／ＣＤ。　式中：Ｃ为供试液中葡萄糖含量（　ｍ１）；ｆ为换算因子；　Ｄ为供试液的稀释因素；Ｗ为样品重量（　ｇ）　测得换算因子，＝１．０７３　１，ＲＳＤ＝０．７２０　７％（　＝３）。　２．３微波辅助提取黄芪多糖　２．３．１微波功率对黄芪多糖提取的影响精密称取黄芪粉末　（过３０目筛）３０　ｇ，置于微波提取器中，加８０％乙醇，调节功率为　９００　Ｗ，回流提取２０　ｍｉｎ，滤过，滤液弃去，残渣挥干乙醇，加入蒸　馏水２５０　ｍｌ，称重，分别于２００，４００，６００，９００，１　０００　Ｗ，回流提取　２０　ｍｉｎ，放冷，补足重量。精密量取上述溶液１　ｍｌ，置２００　ｍｌ量瓶　中，加蒸馏水定容于刻度，即可用于黄芪多糖的测定。分别精密　量取上述黄芪多糖待测液２．０　ｍｌ，按照“标准曲线”项下的操作，　测定多糖的含量。结果见表３。　表３微波功率对黄芪多糖提取的影响　功率Ｐ／ｗ　２ｏｏ　４ｏｏ　含量Ｃ／ｍｇ・ｍｌ　０．７３　１．４７　由表２可见，以吸收度为主要考察指标，极差Ｒ值大小显示　６ｏｏ　３．０７　各因素作用主次为Ｄ＞Ｃ＞Ａ＞Ｂ，直观分析其最佳显色条件组合　９ｏｏ　６．９４　为Ａ。Ｂ　Ｃ　Ｄ　。经过方差分析，以吸收度为主要考察指标，Ａ，Ｂ，　１ｏｏＯ　７．０９　Ｃ，Ｄ因素对吸收值大小的影响均无显著意义。综合直观分析和　由表３可以看出，在其它实验条件不变的情况下，提取液中　方差分析结果，同时考虑操作的简便和条件的易控性，最终确定　Ｗ时出现一　最佳显色条件为待测溶液２　ｍｌ，加入５％苯酚溶液１　ｍｌ，混匀，迅　黄芪多糖的含量随着微波功率的增大，在６００～９００　之后随着功率的增大，多糖含量虽有增大的趋势，但是较　速滴加浓硫酸５　ｍｌ，摇匀，室温放置５　ｍｉｎ，沸水浴加热１５　ｍｉｎ，取　个突跃，为缓和。因此，考虑使用９００　Ｗ的功率提取黄芪多糖。　出，流水冷至室温。　２．３．２　提取时间对黄芪多糖提取的影响精密称取黄芪粉末　２．２．５方法学考察　加８０％乙醇，调节功率为　标准葡萄糖溶液的配制：精密称取１０５％干燥至恒重的葡萄　（过３０目筛）３０　ｇ，置于微波提取器中，回流提取２０　ｍｉｎ，滤过，滤液弃去，残渣挥干乙醇，加入蒸　糖１００　ｍｇ于１００　ｍｌ量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，取此溶　９００　Ｗ，称重，分别于９００　Ｗ，回流提取５，１０，２０，３０，４０　ｍｉｎ，　液１０　ｍｌ置于１００　ｍｌ量瓶中，定容至刻度，制成浓度为１００　Ｐ，ｇ・　馏水２５０　ｎｄ，放冷，补足重量。精密量取上述溶液１　ｍｌ，置２００　ｍｌ量瓶中，加　ｍｌ。。的标准葡萄糖溶液。　样品溶液的制备：精密称取黄芪粉末（过３０目筛）适量，置　蒸馏水定容于刻度，即可用于黄芪多糖的测定。分别精密量取上　按照“标准曲线”项下的操作，测定多　于微波提取器中，加８０％乙醇，调节功率为９００　Ｗ，回流提取２０　述黄芪多糖待测液２．０　ｍｌ，　ｍｉｎ，滤过，滤液弃去，残渣挥干乙醇，加入蒸馏水２５０　ｍｌ，称重，于　糖的含量。结果见表４。９００　Ｗ，回流提取２０　ｍｉｎ，放冷，补足重量。精密量取上述溶液１　表４提取时间对黄芪多糖提取的影响　ｍｌ，置２００　ｍｌ量瓶中，加蒸馏水定容于刻度，即可用于黄芪多糖　时间ｔ／ｍｉｎ　含量Ｃ／ｍｇ・ｍｌ　的测定。　５　１．０７　标准曲线的配制：精密吸取标准葡萄糖溶液０．２，０．４，０．６，　１０　２．２１　２０　６．９４　０．８，１．０，１．２　ｍｌ于１０　ｍｌ具塞试管中，补加蒸馏水至２　ｍｌ；另精　３０　７．９５　密吸取蒸馏水２　ｍＩ作空白对照，分别加入５％苯酚溶液１　ｍｌ，混　８．１４　４０　合均匀后快速加入浓硫酸５．０　ｍｌ，即刻摇匀，室温静置２０ｍｉｎ，于　分光光度计４９０　ｎｍ处测定吸收度。以吸收度Ａ为纵坐标，葡萄　由表４的数据，可以看出提取３０　ｍｉｎ后黄芪多糖已基本提　糖浓度Ｃ为横坐标绘制标准曲线，可得回归方程：Ａ＝０．０１４　３６Ｃ　取完全。　＋０．０１９　７３，ｒ：０．９９９　５。葡萄糖浓度在１０～６０　ｍｌ范围内，　综上所述，可以初步确定在液料比不变的情况下，微波辅助　与吸光度呈良好的线性关系。　提取黄芪多糖的最佳条件是９００　Ｗ，提取３０　ｍｉｎ。　精密度实验：分别量取多糖样品溶液２．０　ｍｌ，以“标准曲线”　３讨论　项下的操作，对同一样品液连续测定５次。结果表明：采用苯酚　本实验利用低聚糖、单糖在８０％乙醇中易溶解而多糖不溶　设计黄芪多糖的微波提取工艺。乙醇浓度的稍微不同　硫酸法测定样品中多糖含量精密度良好，ＲＳＤ为０．０３４％，符合　解的特性，含量测定要求。　将造成实验结果的显著差异，因此实验中要严格控制乙醇浓度　重复性实验：精密称取同批黄芪粉末３０　ｇ，共６份，按“样品　为８０％。　溶液的制备”项下方法操作，制备多糖样品溶液６份，进行含量　在黄芪多糖纯化的过程中，本实验采用了三氯乙酸一正丁醇　测定。ＲＳＤ＝０．９４％，结果表明本方法重复性良好。　液除去蛋白质，此法蛋白质去除效率高，同时有脱色的作用，但要　稳定性实验：取同一样品溶液，显色后问隔一定时间，在４９０　在低温条件下操作，否则易造成多糖的降解。　ｎｍ波长处分别测定吸光度。实验结果表明，样品溶液显色后在　苯酚一硫酸法和蒽醌一浓硫酸法目前被认为是测定糖含量　２．０　ｈ内稳定。　的较理想方法。实验中比较两种方法，结果苯酚一浓硫酸法的准　灵敏度较高，适用面较广泛，因此选择苯酚一浓硫酸法　回收率实验：精密量取已知含量的同批样品溶液６份，每份　确性较好，各１　ｍｌ置１０　ｒｎｌ具塞试管中，再精密量取１　ｍｌ精制多糖供试液　作为本实验的含量测定方法。其原理为糖类物质在浓硫酸作用　一・７８５・　维普资讯 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时珍国医国药２００８年第ｌ９卷第４期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡｑ’ＥＲＩＡ　ＭＨ）ＩＣ　ＲＥＳＥ　ＲＣＩｔ　２００８、Ｏ１　．１９　ＮＯ．４　下，先水解成单糖分了，外迅速脱水生成糖醛衍生物，糖醛衍生物　中其它成分提取的影响。　再　笨酚形成有色化合物，在４９０　ｎｍ处有特征性吸收峰。　　目前对黄芪多糖的研究较为充分，黄芪多糖粉针剂已作为抗　参考文献：癌辅助药应用于临床，然而针对黄芪多糖的微波辅助提取研究较　［１］　陈阿琴，杨志刚，俞颂东，等．黄芪多糖药理作用研究进展　Ｊ］．中　少。本实验中比较了加热回流法与微波辅助提取法提取黄芪多　国兽药杂志，２００５，３９（９）：３３．．　糖，发现在黄芪多糖提取率接近的情况下，微波辅助提取法较加　［２］段　丽，谫ｔ梅冬．黄芪化学成分及其有效成分黄芪甲苷含量测定　的研究现状［Ｊ］．中国兽药杂志，２００５，３９（３）：３５．　热回流提取法的提取时间缩短了将近８倍。实验中使用单因素　　Ｈ．Ａ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ｆｏｒ　ｐｏｌｙｓａｃ—　考察法考察了微波功率与提取时间对黄芪多糖的影响，初步确定　［３］Ｓｈａｏ　ＢＭ，Ｘｕ　Ｗ，Ｄａｉｃｈａｒｉｄｅｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｌＯＯｔＳ　ｏｆ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓｍ，ａ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｍｅ—　了提取工艺的参数。在今后的研究还要使用正交设计法考察各　ｄｉｃｉｎａｌ　ｈｅｒｂ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ｒｅｓ　Ｃｏｍｍｕｎ，２００４，２０（４）：１１０３．　因素协同对黄芪多糖提取的影响，并研究微波辅助提取法对黄芪　气相色谱一质谱联用法测定不同　产地苦玄参中有机磷农药残留　周吴萍　，岑菲菲　，甄汉深　（１．广西工学院，广西柳州５４５００６；２．广西中医学院，广西南宁５３０００１）　摘要：目的测定广西不同产地苦玄参中５种有机磷农药残留量。方法以混合溶剂超声提取，提取物通过活性炭净化后　进行气相色谱一质谱联用（ＧＣ—ＭＳ）测定。结果５种农药回收率在７２％一１０８％之间，ＲＳＤ＜１２％。农药的最低检测限在　０．５１—１．２７Ｉｘｇ／ｋｇ之间。５种产地药材中有机磷农药残留均未超过国家标准。结论Ｇｃ—ＭＳ内标法测定苦玄参药材中的　农药残留，方法简便快速、可靠、灵敏度高，可作为有机磷农药残留的定性定量方法。　关键词：气相色谱一质谱联用法；有机磷农药；苦玄参　中图分类号：Ｒ２８８　文献标识码：Ａ　文章编号：１００８－０８０５（２００８）０４－０７８６－０２　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｏｒｇａｎ０ｐｈ０ｓｐｈ０ｒ０ｕｓ　Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ　Ｒｅｍａｉｎｓ　ｉｎ　Ｄｉｆｅｒｅｎｔ　Ｏｒｉｇｉｎ　ｏｆ　Ｐｉｃｒｉａ　ｆｅＺ—ｔｅｒｒａｅ　Ｌｏｕｒ．ｂｙ　ＧＣ．ＭＳ　ＺＨＯＵ　Ｗｕ．ｐｉｎｇ　．ＣＥＮ　Ｆｅｉ．ｆｅｉ　．ＺＨＥＮ　Ｈａｎ．ｓｈｅｎ　（１．Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｌｉｕｚｈｏｕ，Ｇｕａｎｇｘｉ，５４５００６，Ｃｈｉｎａ；２．Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ。Ｎａｎｎｉｎｇ。Ｇｕａｎｇｘｉ，５３０００１，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｒｅｓｉｄｕｅ　ｏｆ　ｆｉｖｅ　ｏｒｇａｒｏｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｉｎ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｏｒｉｇｉｎ　ｏｆ　Ｐｉｃｒｉａ　ｆｅ　～ｔｅｒｒａｅ　Ｌｏｕｒ．．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ　ｗａｖｅ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｍｕｌｔｉ—ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ．Ａｆｔｅｒ　ｃｌｅａｎｅｄ　ｕｐ　ｗｉｔｈ　ａｃｔｉｖｅ　ｃａｒｂｏｎ，ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｒｅａｄｙ　ｆｏｒ　ＧＣ—ＭＳ　ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ｏｆ　ｆｉｖｅ　ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｗｅｒｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　７２％～１０８％，ｗｉｔｈ　ＲＳＤ　＜１２％．Ｔｈｅ　ＬＯＤｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　０．５１～１．２７ｔｒｇ／ｋｇ．Ｔｈｅｉｒ　ｒｅｓｉｄｕｅｓ　ｏｆ　ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｄｉｄｎ　ｔ　ｅｘｃｅｅｄ　ｎａｆｉｏｎＭ　ｓｔａｎｄａｒｄ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ＧＣ—ＭＳ　ｍｅｔｈｏｄ　ｈａｓ　ａｄｖａｎｔａｇｅｓ　ｏｆ　ｔｉｍｅ　ｓａｖｉｎｇ，ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｃｅ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ．Ｉｔ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｑｕａｌｉｔａ－　ｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｒｅｓｉｄｕｅｓ　ｏｆ　ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｉｎ　Ｐｉｃｒｉａ　ｆｅ　—ｔｅｒｒａｅ［－ｏｕｒ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ＧＣ—ＭＳ：　Ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ：Ｐｉｃｒｉａ　ｆｅ　—ｔｅｎ＇ａｅ　Ｌｏｕｒ　有机磷农药在我国的使用已有三十多年历史，其品种和用量　１仪器与材料　目前仍居各类农药之首…。中药材在未按ＧＡＰ要求进行规范化　Ａｇｉｌｅｎｔ　６８９０Ｎ／５９７３Ｎ气相色谱一质谱联用仪（美捷伦　种植前，药农曾有滥施农药的现象，致使农田土壤及中药材中农　公司），ＨＰ一５ＭＳ（３０　ｍ×０．２５　Ｉｘｍ×０．３２　ｍｍ）弹性石英毛细管柱　残含量超标，对中药的污染很严重，制约了我国中药材产品的质　（美捷司），ＡＥ１００型电子分析天平（梅特勒一托利多仪　量，严重地影响到用药的安全性。　器有限公司）。　苦玄参为广西地道药材，来源于玄参科植物苦玄参Ｐ／ｃｒ／ａ　ｆｅｚ　苦玄参分别采于广西龙州、梧州、苍梧、平乐、宁明县，经广西　ｔｅｎ＇ａｅ　Ｌｏｕｒ．的干燥全草　Ｊ，在广西作药用历史已久，也是多种　中医学院药学院刘寿养副教授鉴定为玄参科植物苦玄参Ｐ／ｃｒ／ａ　中成药的原料，市场需求量大。为了解苦玄参药材农药污染情　ｔｅｎ＇ａｅ　Ｌｏｕｒ．）干燥的全草，粉碎，过２号筛，备用。　况，为中药使用的安全可控提供科学依据，以广西特产药材苦玄　丙酮、石油醚（６０～９０￣（２）均为分析纯（中国医药集团上海化　参为研究对象，用气相色谱一质谱联用法（ＧＣ—ＭＳ法）测定苦玄　学试剂公司），重蒸后使用；水为超纯水；活性炭储存于密闭容器　参药材中有机磷农药残留量。　中备用；过滤滤纸用丙酮浸泡、干燥后使用；５种农药标准品乙酰　甲胺磷、甲拌磷、杀螟硫磷、毒死蜱均购自迪马公司，纯度＞９５％，　收稿日期：２００７－０７－２０；修订日期：２００７—１１－２３　甲基一对硫磷（Ｇ２３０１０—９２）国标液（农业部环保科研监测所研　基金项目：国家中医药管理局课题民族项目（０４—０５ＺＭ０１）；　制）。内标磷酸三丁酯为分析纯（广东汕头市西陇化工厂）。　广西科技厅攻关项目（桂科攻０２３５０２２—４）；　２方法与结果　—一广西教育厅课题（桂教科研［２００３］２２号）　作者简介：周吴萍（１９７９～），女（仫佬族），广西宜州人，现任广西工学院讲　师，硕士学位，主要从事中药成分分析及质量研究工作．　通讯作者简介：甄汉深（１９５０一），男（汉族），广东台山人，现任广西中医　学院教授，博士生导师，主要从事中药分析、药物分析工作．　・２．１色谱条件进样口温度２５０ｏＣ，程序升温：１００ｏＣ（２　ｍｉｎ）一　１０￣Ｃ／ｍｉｎ－－￣２００￣Ｃ（５　ｍｉｎ）　２℃／ｍｉｎ＿２１０℃ｐｏｓｔ２８０￣Ｃ（４　ｍｉｎ），　接口温度２８０ｏＣ，载气为Ｈｅ，柱流量为１．Ｏｍｌ／ｍｉｎ，进样方式为脉　冲不分流进样（０．７５ｍｉｎ后开分流阀），进样体积为１　ｌ。　７８６・